浙江伊利康生物技術(shù)有限公司質(zhì)量管理體系文件文件編號(hào)：ERKN-C-SOP-039-006低密度脂蛋白膽固醇檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)操作程序StandardOperatingProcedures版本：A/0生效日期：2015-11-01標(biāo)準(zhǔn)操作程序項(xiàng)目：低密度脂蛋白膽固醇方法：直接法為使臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范化，指導(dǎo)檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行正確的常規(guī)操作，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，特制定本操作規(guī)程。本規(guī)程的編寫遵循了ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一一關(guān)于質(zhì)量和能力的特殊要求》及WS/T227-2002《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫要求》的有關(guān)規(guī)定并結(jié)合產(chǎn)品實(shí)際情況制訂，作為本產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。本規(guī)程從2007年5月2日起實(shí)施，每2年復(fù)審1次。本規(guī)程由浙江伊利康生物技術(shù)有限公司編制。本規(guī)程起草單位：伊利康生物技術(shù)有限公司技術(shù)部。本規(guī)程主要起草人：蒙凱、蔡其浩。本規(guī)程首次起草。TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"1檢驗(yàn)申請(qǐng) ?32標(biāo)本采集與處理 33試劑及成份 44方法原理 ?45儀器 46校準(zhǔn)液及校準(zhǔn)模式 4\o"CurrentDocument"7質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則 4\o"CurrentDocument"8標(biāo)本檢測(cè)步驟 5\o"CurrentDocument"9結(jié)果計(jì)算 510操作性能 511試劑使用的注意事項(xiàng) ?...……5\o"CurrentDocument"12參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平 1.……5\o"CurrentDocument"13檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍 ?. 514臨床意義 .…. 615結(jié)果審核分析以及相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系 ……..……616威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定. ..…617有關(guān)引用程序與文件 ??「??.618參考文獻(xiàn)附錄AXXX型全自動(dòng)生化分析儀參數(shù)低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程.檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血清低密度脂蛋白膽固醇（LowDensityLipoprotein-Cholesteroll；,縮寫LDL-C）測(cè)定；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血脂測(cè)定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。.標(biāo)本采集與處理受檢者的準(zhǔn)備：采血前2周保持平時(shí)的飲食習(xí)慣，3d內(nèi)避免高脂飲食，24h內(nèi)不飲酒，空腹12h后采集標(biāo)本。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的正常狀況記錄。注意有無(wú)應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。此外，對(duì)于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因?yàn)闃颖局懈黜?xiàng)目的含量有季節(jié)性變動(dòng)，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)。應(yīng)囑體檢對(duì)象在抽血前24小時(shí)內(nèi)不做劇烈運(yùn)動(dòng)。標(biāo)本采集除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過(guò)1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶，不抗凝，置普通試管中。或采用含分離膠的黃色蓋子SST真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子PST試管。檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識(shí)。標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、黃疸和渾濁的標(biāo)本。對(duì)無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。標(biāo)本處理接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（15?25℃）下可穩(wěn)定1d,普通冰箱中（2?8℃）穩(wěn)定7d。-20℃可保存數(shù)月；-70℃至少保存半年；避免反復(fù)凍溶。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò)1d的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置2?8℃冰箱內(nèi)保存7d。標(biāo)本的注意事項(xiàng)不建議采集抗凝標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。妊娠后期各項(xiàng)血脂都會(huì)增高，應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳后3個(gè)月查血才能反映基本血脂水平。采血前最好停用影響血脂的藥物（如調(diào)脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數(shù)天或數(shù)周，否則應(yīng)記錄用藥情況。血清標(biāo)本出現(xiàn)溶血、脂血、黃疸或抗壞血酸的干擾情況參見抗干擾能力。.試劑及成份試劑本科使用的低密度脂蛋白膽固醇檢測(cè)試劑盒，由浙江伊利康生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品貨號(hào)為XXX,試劑為液體雙試劑，其組份如下：試劑組成主要成份濃度R1Good’S緩沖液：120mmol/LHSDA2.5mmol/L膽固醇酯酶1KU/L表面活性劑適量防腐劑適量R2Good’S緩沖液：120mmol/L膽固醇氧化酶0.8KU/L過(guò)氧化物酶10KU/L4-安基氨替比林0.42mmol/L試劑盒保存及效期未啟封試劑盒在2?8℃保存，可儲(chǔ)存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉(cāng)冰箱內(nèi)穩(wěn)定28d。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。試劑盒準(zhǔn)備液態(tài)試劑型，即開即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備。.方法原理測(cè)定方法：終點(diǎn)法。原理：樣品中的低密度脂蛋白（LDL）與試劑中的聚陰離子結(jié)合形成復(fù)合物而被遮蔽，而高密度脂蛋白（HDL）、極低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒（CM）在特殊表面活性劑作用下與酶試劑發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)中生成的H2O2在缺乏偶聯(lián)劑時(shí)不顯色，對(duì)LDL有特異作用的表面活性劑水解LDL,釋放出膽固醇，生成的膽固醇再在試劑中膽固醇酯酶（CEH）、膽固醇氧化酶（COD）、過(guò)氧化物酶（POD）等物質(zhì)作用（Trinder反應(yīng)）形成紫色醌化合物，從而引起546nm處吸光度的上升。此種變化與樣品中LDL-C濃度成正比。.儀器XXXX型號(hào)儀器。.校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式校準(zhǔn)品：使用浙江伊利康生物技術(shù)有限公司的LDL-C標(biāo)準(zhǔn)液。標(biāo)準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，1個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。校準(zhǔn)周期：全點(diǎn)定標(biāo)：校準(zhǔn)間隔時(shí)間為30d。但在:①更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。①更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須需要全點(diǎn)定標(biāo)。.質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則質(zhì)控品采用由XXX公司提供的兩個(gè)不同水平定值質(zhì)控血清。質(zhì)控液重建方法：用XXX.00mL蒸餾水溶解質(zhì)控品，輕輕混勻，20min后即可使用。質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定至少兩個(gè)水平質(zhì)控血清各一次。質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測(cè)。.標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑一進(jìn)行校準(zhǔn)一進(jìn)行質(zhì)控一輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目一加載標(biāo)本一標(biāo)本測(cè)定一結(jié)果復(fù)核一報(bào)告。.結(jié)果計(jì)算樣品中LDL-C濃度（mmol/L）=CS^AAU/AAS式中：AAT待測(cè)樣品的吸光度值A(chǔ)AS校準(zhǔn)液的吸光度值CS校準(zhǔn)液中LDL-C的濃度（mmol/L）.操作性能精密度：批內(nèi)CVW3.0%,批間相對(duì)極差CVW6.0%。準(zhǔn)確度：測(cè)量結(jié)果在質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會(huì)存在差異，使用時(shí)請(qǐng)確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。線性范圍：0.05-10mmol/L（血清與試劑用量之比為1:100時(shí)）方法的有限性及干擾因素：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度＞2540]imol/L,膽紅素濃度＞342pmol/L,血紅蛋白濃度＞5.00g/L,甘油三酯濃度＞20mmol/L時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果有干擾。其他脂蛋白無(wú)影響。.試劑使用的注意事項(xiàng)本試劑僅應(yīng)用于體外診斷。扔棄廢物應(yīng)符合當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)要求。.參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平合適范圍： ＜3.12mmol/L邊緣升高：3.15?3.61mmol/L升高：>3.64mmol/L.檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍結(jié)果的報(bào)告結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。報(bào)告范圍：血清與試劑用量之比為1:100時(shí)，測(cè)定上限為10mmol/L。超過(guò)此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說(shuō)明，并經(jīng)上級(jí)主管技師審核后報(bào)告。.臨床意義低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定試劑盒用于定量測(cè)定血清中低密度脂蛋白的含量。LDL的濃度是診斷冠狀動(dòng)脈硬化的一個(gè)重要指標(biāo)。低密度脂蛋白（LDL）是由極低密度脂蛋白（VLDL）轉(zhuǎn)變而來(lái)的。LDL的主要功能是把膽固醇運(yùn)輸?shù)饺砀魈幖?xì)胞，但主要是運(yùn)輸?shù)礁闻K合成膽酸。每種脂蛋白都攜帶有一定量的膽固醇，但體內(nèi)攜帶膽固醇最多的脂蛋白^DL。體內(nèi)三分之二的LDL是通過(guò)受體介導(dǎo)途徑吸收入肝和肝外組織，經(jīng)代謝而清除的。而余下的三分之一是通過(guò)一條“清掃者”通路而被清除的，在這一非受體通路中，巨噬細(xì)胞與LDL結(jié)合，吸收LDL中的膽固醇，這樣膽固醇就留在細(xì)胞內(nèi)，變成，泡沫”細(xì)胞。因此，LDL能夠進(jìn)人動(dòng)脈壁細(xì)胞，并帶人膽固醇。故LDL水平過(guò)高能致動(dòng)脈粥樣硬化，使個(gè)體處于易患冠心病的危險(xiǎn)中。.結(jié)果審核分析以及相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。相關(guān)項(xiàng)目：審核與血脂其他指標(biāo)和載脂蛋白等的關(guān)系，HLDL-C濃度一般與apoB呈正相關(guān)，與TC常呈正相關(guān)，且HDL-C+LDL-C應(yīng)略低于TC。如出現(xiàn)與