紅色熒光蛋白紅色熒光蛋白基因基因表達(dá)基因工程：即

。

通俗的說，就是按照

，把一種生物的某種

提取出來，加以

，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，

地改造生物的

原理：操作水平：結(jié)果：基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類所需要的品種?；蚱唇蛹夹g(shù)或DNA重組技術(shù)定向遺傳性狀一、基因工程概念“剪刀”“運(yùn)載體”“針線”DNA人們的意愿基因修飾改造二、基因工程的操作工具1、“基因剪刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(簡稱限制酶)

一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。特點(diǎn)：專一性作用于：磷酸二酯鍵嘗試寫出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端

DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA具有相同的黏性末端，堿基能夠通過互補(bǔ)進(jìn)行配對。CTTCATGGAAGTACTTAAGGGATTAATTCCCTAAACGTGCTTAAAATTCCCATTGGGTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAG目的基因

被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端？要想獲得某個(gè)目的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？一個(gè)目的基因有幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端，兩個(gè)。

是，會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端。

被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，他們之間正好互補(bǔ)配對，這樣的切口叫黏性末端。2、“基因針線”——DNA連接酶連接酶的作用：將脫氧核糖和磷酸交替連接的DNA骨架的缺口“縫合”。CTTCATGGAAGTACTTAAGGGATTAATTCCCTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAG連接酶連接的部位：生成磷酸二酯鍵AATTGCCTTAAG連接磷酸二酯鍵不同點(diǎn)：

連接酶：將DNA片段間互補(bǔ)配對的兩個(gè)黏性末端連接起來，使之成為一個(gè)完整的DNA分子。DNA聚合酶和DNA連接酶有何異同點(diǎn)？聚合酶：以一條DNA為模板，將一個(gè)一個(gè)核苷酸連接起來相同點(diǎn)：都是通過形成磷酸二酯鍵連接起來思考：如何將重組DNA分子送入受體細(xì)胞呢？3、基因的“運(yùn)載體”（2）種類：質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)、植物病毒等（1）作用：將

送入受體細(xì)胞外源基因存在于許多______以及__________等生物中，是擬核或細(xì)胞核外能夠

的_____________。質(zhì)粒：細(xì)菌自主復(fù)制環(huán)狀DNA分子酵母菌（3）條件：1、具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切位點(diǎn)，便于與外源基因連接2、在細(xì)胞內(nèi)能自主復(fù)制且穩(wěn)定保存3、具有標(biāo)記基因便于篩選重組質(zhì)粒DNA連接酶……CTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAG目的基因相同的限制酶三、基因工程的操作步驟提取目的基因1直接分離基因人工合成基因方法目的基因與運(yùn)載體結(jié)合2實(shí)際上是不同來源的基因重組的過程。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞3受體細(xì)胞：大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞

原理：借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。目的基因的檢測與鑒定41.下列關(guān)于基因工程的敘述中,正確的是:A.限制酶只用于提取目的基因

B.細(xì)菌體內(nèi)的環(huán)狀DNA均可作運(yùn)載體

C.DNA連接酶可用于目的基因和運(yùn)載體的連接

D.重組DNA分子一旦進(jìn)入受體細(xì)胞,基因工程則完成.2.以下說法正確的是:A.目的基因是指重組DNA

B.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列

C.DNA重組所用的工具酶是限制酶、連接酶和運(yùn)載體

D.只要受體細(xì)胞中含有目的基因，目的基因就一定能夠成功表達(dá)小試身手四、基因工程的應(yīng)用1、基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用四、基因工程的應(yīng)用1、基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄不會(huì)引起過敏的轉(zhuǎn)基因大豆2、基因工程在畜牧業(yè)上的應(yīng)用生長快、耐不良環(huán)境、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(中國)乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)導(dǎo)入人基因具特殊用途的豬和小鼠乳汁中分泌人凝血因子IX的轉(zhuǎn)基因山羊3、基因工程在藥物研制的應(yīng)用胰島素——治療糖尿病的特效藥干擾素——抗病毒的特效藥方法特點(diǎn)胰島素干擾素傳統(tǒng)方法直接從生物體的組織、細(xì)胞或血液中提取產(chǎn)量低價(jià)格昂貴4~5g/100kg胰腺1mg/300L血液基因工程“工程菌”發(fā)酵工業(yè)化生產(chǎn)高質(zhì)量低成本100g/2000L大腸桿菌培養(yǎng)液20~40mg/1kg細(xì)菌培養(yǎng)物人造血液及其生產(chǎn)我國生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物白細(xì)胞介素、溶血栓劑、凝血因子、人造血液代用品疫苗：乙肝、狂犬病、百日咳、霍亂、傷寒、瘧疾基因工程藥品4、基因工程在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況，卻不易因環(huán)境污染而大量死亡，甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。5、基因工程的其他應(yīng)用

1.基因工程的正確操作步驟是:①使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞③檢測目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求④提取目的基因③②④①B.②④①

③C.④①

②③