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藥物血漿半衰期測(cè)定實(shí)驗(yàn)第一頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三【目的】學(xué)習(xí)藥物血漿半衰期測(cè)定方法。
【藥品】
10%水楊酸鈉,10%三氯醋酸4ml,0.5%肝素生理鹽水,10%三氯化鐵
【動(dòng)物】
家兔第二頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三【原理】血中藥物濃度隨時(shí)間推移呈規(guī)律性(一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除)下降。
第三頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三【方法、步驟】1.取3支離心管標(biāo)記1、2、3,加入10%三氯醋酸4ml;取9支試管標(biāo)記:A1,A2,A3B1,B2,B3C1,C2,C3備用。2.取家兔一只,稱(chēng)重,麻醉(20%烏拉坦5ml/kg,2/3iv,1/3ip)第四頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三向心端頭端動(dòng)脈夾3.分離頸總動(dòng)脈,頭端用線結(jié)扎,心端用動(dòng)脈夾夾閉。第五頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三向心端離心端動(dòng)脈夾4.動(dòng)脈插管,備取血用。5.肝素化:0.5%肝素生理鹽水2ml/只,IV。第六頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三6.取血:開(kāi)啟動(dòng)脈夾取血約1~1.5ml,放入A1號(hào)試管,再?gòu)腁1號(hào)試管準(zhǔn)確吸取1ml移入1號(hào)離心管,充分搖勻,以沉淀血漿蛋白。
7.給藥:10%水楊酸鈉2ml/kg,IV。每次移入離心管的血量務(wù)必準(zhǔn)確開(kāi)啟動(dòng)脈夾取血時(shí),不要將動(dòng)脈夾抽離動(dòng)脈第七頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三8.取血:在給藥后20分鐘和40分鐘時(shí),開(kāi)啟動(dòng)脈夾取血約1~1.5ml20分鐘→A2→準(zhǔn)確取1ml→2號(hào)離心管40分鐘→A3→準(zhǔn)確取1ml→3號(hào)離心管。每次取血前應(yīng)先將動(dòng)脈插管內(nèi)殘余血放掉!移入離心管的血液搖勻或攪拌均勻,以充分沉淀血漿蛋白第八頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三
9.離心:3000rpm,3分鐘。
漫漫傾倒上清液入對(duì)應(yīng)編號(hào)的B1、B2、B3號(hào)試管中。
從B組管精確吸取上清液3ml→C組管
A1→B1→C1
A2→B2→C2
A3→B3→C3
10.顯色:各管加入10%三氯化鐵(FeCl3)0.5ml,顯色。第九頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三比色杯必須配套,擦干凈;721分光光度計(jì)調(diào)零點(diǎn)時(shí)至少三次后再測(cè);清洗比色杯后用衛(wèi)生紙單向擦拭透光面,
11.比色、測(cè)光密度值:以C1號(hào)管為對(duì)照管,用721分光光度計(jì)在520nm波長(zhǎng)下讀取C2、C3號(hào)管的光密度值。第十頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三12.計(jì)算:
OD1和OD2分別為2、3號(hào)管的光密度值。
第十一頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三
公式推導(dǎo)第十二頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三第十三頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三時(shí)間時(shí)間零級(jí)一級(jí)零級(jí)一級(jí)對(duì)數(shù)濃度濃度第十四頁(yè),共十五頁(yè),編輯于2023年,星期三血1~1.5ml三氯醋酸4ml離心(3000rpm.3min)傾入吸取上清液3ml三氯化鐵0.5mlA1號(hào)試管B1號(hào)試管C1號(hào)試管1號(hào)
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