第16章衣原體（Chlamydiae

）下頁退出內(nèi)容提要章目錄導航欄概述共同特性衣原體分類生物學性狀致病性與免疫沙眼衣原體生物學性狀致病性與免疫微生物檢查防治原則鸚鵡熱衣原體肺炎嗜衣原體概述定義:一類嚴格真核細胞內(nèi)寄生，具有獨特發(fā)育周期，并能通過細菌濾器的原核細胞型微生物，歸屬于細菌學范疇共同特性有細胞壁，革蘭陰性，呈圓形或橢圓形具有獨特的發(fā)育周期，類似細菌的二分裂方式繁殖有DNA和RNA兩種核酸含有核糖體；具有嚴格的細胞內(nèi)寄生性對多種抗生素敏感。衣原體科衣原體屬(3個種)沙眼衣原體鼠衣原體豬衣原體嗜衣原體屬(6個種)肺炎嗜衣原體鸚鵡熱嗜衣原體獸類嗜衣原體流產(chǎn)嗜衣原體貓嗜性衣原體豚鼠嗜性衣原體衣原體分類四種衣原體的性狀比較生物學性狀發(fā)育周期與形態(tài)染色衣原體發(fā)育周期包括原體和網(wǎng)狀體原體（Elementarybody，EB） 呈球形、橢圓形或梨形，直徑0.2～0.4μm。是發(fā)育成熟的衣原體。原體具有強感染性，在宿主細胞外較為穩(wěn)定，無繁殖能力。當進入宿主易感細胞后，宿主細胞膜圍于原體外形成空泡，原體在空泡中逐漸發(fā)育，增殖成為網(wǎng)狀體。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈紅色。網(wǎng)狀體（Reticuiatebody），亦稱始體（Initialbody）體積較大，直徑0.5～1.0μm，圓形或橢圓形電子致密度較低，無胞壁，代謝活躍，以二分裂方式繁殖，在空泡內(nèi)增殖成許多子代原體成熟的子代原體從被破壞的感染細胞中釋放，再感染新的易感細胞，開始新的發(fā)育周期，每個發(fā)育周期約48～72h網(wǎng)狀體是衣原體發(fā)育周期中的繁殖型，不具感染性Macchivello染色呈藍色包涵體（Inclusionbody）：系指在易感細胞內(nèi)含繁殖的始體和子代原體的空泡。由于發(fā)育時期不同，包涵體的形態(tài)和大小都有差別。成熟的包涵體含大量的原體。衣原體的發(fā)育周期原體吸附于細胞，并被吞入，8小時后發(fā)育成始體并增殖；30小時后始體開始分化為原體，并在細胞形成包涵體；48小時后細胞破裂，釋放的原體繼續(xù)感染鄰近細胞。原體和始體的比較性狀原體始體大?。é蘭）0.2～0.40.5～1.0細胞壁＋-代謝活性-＋胞外穩(wěn)定性強弱感染性強無繁殖能力無強RNA：DNA比1:13:1培養(yǎng)特性雞胚接種在6～8日齡雞胚卵黃囊中繁殖，于感染后3～6d致雞胚死亡，并可在雞胚卵黃囊膜中找到包涵體（inclusion）、原體和始體顆粒。組織細胞培養(yǎng)可在HeLa、McCoy或HL等細胞中生長良好?？蓪⒔臃N有標本的細胞培養(yǎng)管離心沉淀以促使衣原體穿入細胞，在細胞培養(yǎng)管中加入代謝抑制物其目的在于使細胞生長代謝緩慢，有利于衣原體的寄生性生長或提高衣原體吸附細胞的能力，使它易穿入細胞進行繁殖?？乖Y(jié)構(gòu)屬特異性抗原：位于胞壁的共同抗原為脂多糖，類似于革蘭陰性菌的脂蛋白-脂多糖復合物，可用補體結(jié)合試驗檢測種特異性抗原：大多數(shù)衣原體的種特異性抗原位于主要外膜蛋白（majoroutermembraneprotein,MOMP）上，可用補體結(jié)合試驗和中和試驗檢測，可鑒別不同種衣原體型特異性抗原：根據(jù)MOMP可變區(qū)氨基酸序列的不同，可將每種衣原體分為不同的血清型或生物型（biovar）抵抗力衣原體耐冷不耐熱，60℃僅能存活5～10min；在-60℃感染性可保持5年，液氮內(nèi)可保存10年以上，冷凍干燥保存30年以上仍可復蘇。對常用消毒劑敏感，紫外線照射可迅速滅活。四環(huán)素、氯霉素、強力霉素和紅霉素等抗生素有抑制衣原體繁殖的作用。致病性與免疫性致病性衣原體能產(chǎn)生類似于革蘭陰性菌內(nèi)毒素的毒性物質(zhì)，能夠抑制宿主細胞代謝，直接破壞宿主細胞。衣原體的MOMP能阻止吞噬體與溶酶體的融合，MOMP的表位容易發(fā)生變異，在體內(nèi)可以逃避特異性抗體的中和作用而繼續(xù)感染細胞熱休克蛋白（heatshockprotein,HSP）能刺激機體巨噬細胞產(chǎn)生TNF-α、IL-1、Il-6等炎癥性細胞因子免疫性產(chǎn)生特異性細胞免疫和體液免疫，以細胞免疫為主第二節(jié)、沙眼衣原體衣原體發(fā)現(xiàn)的1956年湯飛凡等首次分離培養(yǎng)出沙眼衣原體，無可爭辯地結(jié)束了半個多世紀關(guān)于沙眼病原的爭論。他是世界上發(fā)現(xiàn)重要病原體的第一個中國人生物分型沙眼生物型（Biovar

trachoma）性病淋巴肉芽腫生物型（biovarlymphogramulomavenereum,LGV）一、生物學性狀形態(tài)染色原體為圓形或橢圓形，Giemsa染色呈紫紅色。網(wǎng)狀體核質(zhì)分散，Giemsa染色為深藍或暗紫色。原體能合成糖原，故被碘溶液染成棕褐色。碘染色沙眼衣原體原體（Giemsa染色）沙眼衣原體始體（Giemsa染色）沙眼衣原體包涵體血清學分型根據(jù)MOMP表位氨基酸序列的差異，將沙眼衣原體分為19個血清型，其中沙眼生物型包括15個血清型；LGV生物型包括L1、L2、L2a和L3共4個血清型。二、致病性與免疫性所致疾病沙眼通過眼-手-眼途徑直接或間接密切接觸傳播。由A、B、Ba和C血清型引起。早期流淚、后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害，影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎嬰兒結(jié)膜炎，引起急性化膿性結(jié)膜炎（包涵體膿漏眼），不侵犯角膜，能自愈；成人結(jié)膜炎兩種，后者可經(jīng)兩性接觸、經(jīng)手至眼或污染的游泳池水感染，引起濾泡性結(jié)膜炎，又稱游泳池結(jié)膜炎，一般經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈，無后遺癥。新生兒眼結(jié)膜炎包涵體性結(jié)膜炎泌尿生殖道感染沙眼生物型D～K血清型引起男性多表現(xiàn)為非淋菌性尿道炎，并可合并附睪炎、前列腺炎、直腸炎等女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎等。嬰幼兒肺炎性病淋巴肉芽腫侵犯男性腹股溝淋巴結(jié)，引起化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會陰、肛門、直腸，引起會陰-肛門-直腸組織狹窄。衣原體性宮頸炎性病淋巴肉芽腫沙眼衣原體檢驗程序

三、微生物學檢查直接涂片鏡檢取結(jié)膜刮片，Giemsa或碘液及熒光抗體染色鏡檢，觀察上皮細胞漿內(nèi)有無包涵體。沙眼衣原體感染宮頸刮取物直接涂片

分離培養(yǎng)取感染組織的滲出液或刮取物，接種于雞胚卵黃囊或傳代細胞，再用IFA或ELISA檢測培養(yǎng)物中的衣原體。衣原體抗原與核酸組分檢測ELISA檢測沙眼衣原體LPS和MOMP抗原PCR和鏈接酶鏈反應(yīng)（LCR）等擴增技術(shù)檢測沙眼衣原體DNAMcCoy細胞培養(yǎng)的沙眼衣原體

四、防治原則預防重點是注意個人衛(wèi)生，避免直接或間接的接觸傳染。治療藥物選用強力霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等目前尚無有效的沙眼衣原體疫苗，MOMP是其主要候選抗原。由于MOMP的多型性，其疫苗不易對所有型別的沙眼衣原體都產(chǎn)生保護性，故增加了MOMP作為疫苗的難度。第三節(jié)、肺炎嗜衣原體肺炎嗜衣原體是衣原體屬的一個新種。命名最初分離的兩株病原體：1965年自一名臺灣小學生眼結(jié)膜中分離得到的一株TW-183(Taiwan-183)1983年自美國西雅圖一位急性呼吸道感染病人的咽部分離出另一株AR-39(acuterespiratory-39)，后發(fā)現(xiàn)這兩株衣原體為同一菌株，仍命名為TWAR一、生物學性狀形態(tài)染色原體直徑為0.38μm，電鏡下呈典型的梨形，并有清晰的周漿間隙，Giemsa染色呈紫紅色，該法對細胞內(nèi)包涵體的定位比碘染法敏感。細胞培養(yǎng)McCoy和HeLa細胞，但都很難用于連續(xù)傳代。目前常用HEp-2和HL細胞系，其在培養(yǎng)肺炎嗜衣原體的敏感性方面要高于前兩者。二、致病性與免疫性所致疾病易引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩慢，臨床癥狀與肺炎支原體相似，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕。肺炎嗜衣原體與冠心病、動脈粥樣硬化等慢性病的發(fā)生密切相關(guān)，但其具體機制尚待深入研究。三、微生物學檢查病原學檢查先直接涂片，觀察包涵體；以熒光或酶標記的種特異性單克隆抗體直接檢測標本中肺炎嗜衣原體抗原。血清學方法微量免疫熒光試驗（microimmunofluorescencetest，MIF），被稱為“金標準”。凡雙份血清抗體滴度增高4倍或以上，或單份血清IgM抗體滴度≥1:16，或IgG抗體滴度≥1:512，可確定為急性感染，IgG≥1:16表示為既往感染。第四節(jié)、鸚鵡熱嗜衣原體生物學性狀原體呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體呈球形或不規(guī)則形態(tài)。原體在細胞空泡中增殖，形成結(jié)構(gòu)疏松、不含糖原、碘染色呈陰性的包涵體。至少可以分為6個血清型致病性呼吸道、經(jīng)破損皮膚、黏膜或眼結(jié)膜感染臨床表現(xiàn)多為非典型性肺炎微生物檢查取患者血、痰標本或咽拭子直接涂片染色觀察包涵體。IFA或ELISA檢測特