第八章雜環(huán)類藥物的分析『本章學(xué)習(xí)要求』

1.了解本類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。

2.掌握吡啶類藥物的鑒別試驗(yàn)和特殊雜質(zhì)檢查方法。

3.掌握喹啉類藥物的鑒別試驗(yàn)和特殊雜質(zhì)檢查方法。

4.掌握托烷類藥物的鑒別試驗(yàn)和特殊雜質(zhì)檢查方法。

5.熟悉吩噻嗪類藥物的鑒別試驗(yàn)和特殊雜質(zhì)檢查方法。

6.熟悉苯并二氮雜卓類藥物的鑒別試驗(yàn)和特殊雜質(zhì)檢查方法。

7.掌握本類藥物含量測(cè)定的非水溶液滴定法、比色法和高效液相色譜法，熟悉本類藥物的其他含量測(cè)定方法。雜環(huán)化合物

指環(huán)狀有機(jī)化合物的碳環(huán)中夾雜有非碳元素原子（如O、S、N等）的化合物。

第一節(jié)

吡啶類藥物的分析異煙肼還原性縮合反應(yīng)酰胺鍵易水解，產(chǎn)生特殊雜質(zhì)－肼異煙肼結(jié)構(gòu)分析

1、弱堿性pKb＝8.8

（具生物堿的一切性質(zhì)）可與生物堿沉淀劑反應(yīng)→↓可用非水堿量法測(cè)定含量可與某些重金屬離子形成↓2、具有酰肼基的特性（1）酰肼極易水解水解產(chǎn)物為肼，有致癌作用，故需檢查特殊雜質(zhì)游離肼（2）酰肼基具有還原性可利用氧化還原反應(yīng)進(jìn)行鑒別或含量測(cè)定（3）酰肼基可與羰基發(fā)生縮合反應(yīng)生成有色產(chǎn)物，可用于鑒別或比色法含量測(cè)定3、吡啶環(huán)的特性

環(huán)上β或γ位被羰基衍生物取代時(shí)易發(fā)生開環(huán)反應(yīng)二氫吡啶類結(jié)構(gòu)主要理化性質(zhì)1、二氫吡啶環(huán)的還原性2、硝基的氧化性3、二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性4、穩(wěn)定性5、旋光性（一）吡啶環(huán)的反應(yīng)

1、開環(huán)反應(yīng)

（1）戊烯二醛反應(yīng)（K?nig反應(yīng)）

戊烯二醛衍生物＋苯胺黃～黃棕色

戊烯二醛衍生物＋聯(lián)苯胺粉紅～紅色二、鑒別試驗(yàn)?zāi)峥蓜x米Ch.P.（2010）【鑒別】（2）取本品1滴，加水50ml，搖勻，分取2ml，加溴化氰試液2ml與2.5%苯胺溶液3ml，搖勻，溶液漸顯黃色。（2）二硝基氯苯反應(yīng)（Vongerichten反應(yīng)）

在無(wú)水條件下，將吡啶與2,4－二硝基氯苯混合共熱至熔融。冷卻后，加醇制氫氧化鈉溶解，溶液成紫紅色。

『注』要將藥物氧化，或水解成羧酸。

煙酸Ch.P.（2010）【鑒別】取煙酸約4mg，加2,4－二硝基氯苯8mg，研勻，置試管中，緩緩加熱數(shù)秒，放冷，加乙醇制氫氧化鈉試液3ml，即顯紫紅色。2、二氫吡啶的解離反應(yīng)

此類藥物的丙酮或甲醇溶液與堿作用，二氫吡啶環(huán)1，4－位氫均可發(fā)生解離，形成p﹣π共軛而發(fā)生顏色變化。如：硝苯地平

3、沉淀反應(yīng)與重金屬鹽及苦味酸等沉淀劑形成沉淀。1）與氯化汞反應(yīng)異煙肼、尼可剎米與氯化汞形成白色沉淀。2）與硫酸銅反應(yīng)異煙肼、尼可剎米與硫酸銅作用，產(chǎn)生有色沉淀。3）與碘化鉍鉀反應(yīng)異煙肼可與碘化鉍鉀（酸性）反應(yīng)，生成有色沉淀；尼可剎米不與碘化鉍鉀反應(yīng)，但可與堿性碘化汞鉀反應(yīng)產(chǎn)生沉淀吡啶環(huán)的沉淀反應(yīng)

反應(yīng)試劑異煙肼尼可剎米

氯化汞白色白色

CuSO4-枸櫞酸淡綠色

----

加熱變紅棕色

CuSO4-硫氰酸鉀----淡綠色

碘化鉍鉀棕紅色

----

碘化汞鉀（堿性）----4、苯環(huán)硝基具有氧化性（1）與亞鐵鹽反應(yīng)可將氫氧化亞鐵氧化為紅棕色氫氧化鐵沉淀。如：尼莫地平（2）重氮化-偶合反應(yīng)在酸性條件下被鋅粉還原為芳伯氨基，可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別。如：硝苯地平1、與硝酸銀的反應(yīng)（還原反應(yīng)）試管壁上生成銀鏡銀鏡反應(yīng)氧化還原反應(yīng)（二）酰胺基的反應(yīng)2、縮合反應(yīng)

制備衍生物測(cè)定mp+香草醛→異煙腙↓黃縮合反應(yīng)異煙腙異煙肼香草醛（縮合）（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)1.與無(wú)水碳酸鈉或氫氧化鈉共熱，可發(fā)生脫羧降解，并有吡啶臭味逸出。2.尼可剎米與氫氧化鈉試液共熱，即發(fā)生乙二胺臭味，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)。

吡啶類藥物的紫外特征吸收鑒別法

藥物

溶劑

λmax(nm)

E

異煙肼HCl(0.01mol/L)265約420

水266378

尼可剎米H2SO4(0.05mol/L)263273NaOH(0.1mol/L)255840260860硝苯地平無(wú)水乙醇237－

333140（四）光譜特征（UV和IR）三、有關(guān)物質(zhì)檢查（一）異煙肼中游離肼的檢查檢查方法

TLC法

雜質(zhì)來(lái)源原料引入、降解產(chǎn)生雜質(zhì)對(duì)照品法（硫酸肼）主成分自身對(duì)照法

Ch.P.法取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相當(dāng)于游離肼50μg）的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取供試品溶液10μl與對(duì)照溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3∶2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)?！痢罯O棕橙色鮮黃色

雜質(zhì)來(lái)源

副產(chǎn)物

檢查方法

TLC法高低濃度對(duì)比法

（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查

*高低濃度對(duì)比法*對(duì)照品對(duì)照法②①對(duì)照液對(duì)照液高低濃度對(duì)比法主成分自身對(duì)照法對(duì)照品對(duì)照法*可比性好*需對(duì)照品*檢查己知雜質(zhì)*可比性差*不需對(duì)照品*可檢未知雜質(zhì)供試液對(duì)照液供試品對(duì)照品判斷A、規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)個(gè)數(shù)

B、供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色不

得深于對(duì)照液的主斑點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)*不需要雜質(zhì)對(duì)照品*可配成幾種限量的對(duì)照溶液缺點(diǎn)準(zhǔn)確度差、直觀性差

不同物質(zhì)、不同Rf值的比較主成分自身對(duì)照法

第二節(jié)

喹啉類藥物的分析

硫酸奎寧硫酸奎尼?。╭uininesulfate）(quinidinesulfate)典型藥物的結(jié)構(gòu)

鹽酸環(huán)丙沙星(ciprofloxacinhydrochloride)主要化學(xué)性質(zhì)

1.堿性

取代基上的氮原子具有堿性，與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽。

環(huán)丙沙星與鹽酸成鹽，奎寧和奎尼丁可與二元酸成鹽，結(jié)構(gòu)中喹核堿含脂環(huán)氮，堿性強(qiáng)，可與硫酸成鹽；而喹啉環(huán)系芳環(huán)氮，堿性較弱，不與硫酸成鹽。

2.旋光性

硫酸奎寧為左旋體，其比旋度為-237°～-224°；硫酸奎尼丁為右旋體，其比旋度為+275°～+290°；而鹽酸環(huán)丙沙星無(wú)旋光性。

3.熒光特性

硫酸奎寧和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均顯藍(lán)色熒光，而喹諾酮藥物（如：鹽酸環(huán)丙沙星）則無(wú)熒光。

（一）綠奎寧反應(yīng)（Thalleioquin）

綠奎寧反應(yīng)是奎寧和奎尼丁的特殊鑒別反應(yīng)。Ch.P.收載方法如下：

鑒別試驗(yàn)（二）光譜特征1.UVCh.P.采用本法鑒別鹽酸環(huán)丙沙星。2.熒光光譜特征硫酸奎寧和硫酸奎尼丁，在稀H2SO4中均顯藍(lán)色熒光，鹽酸環(huán)丙沙星則無(wú)熒光，可用于本類藥物的鑒別。3.IRCh.P.中硫酸奎寧、二鹽酸奎寧和鹽酸環(huán)丙沙星均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。（三）無(wú)機(jī)酸鹽硫酸奎寧硫酸奎尼丁酸性條件

BaCl2白色沉淀鹽酸環(huán)丙沙星酸性條件

AgNO3白色沉淀

（一）硫酸奎寧中有關(guān)物質(zhì)的檢查

1.酸度

主要控制藥物中酸性雜質(zhì)，用pH計(jì)測(cè)定。

2.氯仿-乙醇中不溶物

主要控制藥物制備過(guò)程中引入的醇不溶性雜質(zhì)或無(wú)機(jī)鹽類，實(shí)驗(yàn)中用垂熔坩鍋過(guò)濾。

3.其他金雞納堿

（1）TLC法主要控制硫酸奎寧中其他生物堿，因沒(méi)有合適的對(duì)照品，因此采用薄層色譜中的主成分自身對(duì)照法進(jìn)行檢查。（2）HPLC法用歸一化法進(jìn)行測(cè)定。有關(guān)物質(zhì)檢查（二）氧氟沙星中有關(guān)物質(zhì)的檢查1.溶液的澄清度與顏色:主要控制本品中水不溶性物質(zhì)和有色雜質(zhì)。（比濁、比色和吸光度測(cè)定）

2.有關(guān)物質(zhì):主要控制本品中可能引入的副產(chǎn)物和結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)，采用HPLC法中歸一化法進(jìn)行檢查，其檢查方法如下：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充柱；流動(dòng)相：醋酸銨高氯酸鈉溶液-乙腈(85:15)；檢測(cè)器：UV檢測(cè)波長(zhǎng)為294nm；系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：取氧氟沙星適量，用0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，置紫外光燈（254nm）下照射4小時(shí)以上，取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，理論板數(shù)按氧氟沙星峰計(jì)算不低于5000，緊鄰氧氟沙星峰前的雜質(zhì)峰（有關(guān)物質(zhì)E）與氧氟沙星峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定。測(cè)定方法：面積歸一化法。

第三節(jié)

托烷類藥物的分析

硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿（atropinesulfate）(copolaminehydrobromide）典型藥物的結(jié)構(gòu)主要化學(xué)性質(zhì)1.水解性

本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。以阿托品為例，水解生成莨菪醇和莨菪酸。2.堿性

阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有叔胺氮原子,具有堿性,易與酸成鹽。如阿托品的pKb1為4.35。

3.旋光性

氫溴酸東莨菪堿結(jié)構(gòu)中含有不對(duì)稱碳原子，呈左旋體，比旋度為-24ο～-27ο，而阿托品結(jié)構(gòu)中雖然也含有不對(duì)稱碳原子，但因外消旋化而為消旋體，無(wú)旋光性。利用此性質(zhì)可區(qū)別阿托品與東莨菪堿。

（一）托烷生物堿類的鑒別試驗(yàn)（Vitaili反應(yīng)）鑒別試驗(yàn)生物堿水解莨菪酸發(fā)煙硝酸三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體KOH有色的醌型產(chǎn)物（深紫色）（二）氧化反應(yīng)

本類藥物水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。其反應(yīng)式為：

苯甲醛苦杏仁臭味(三)沉淀反應(yīng)

本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉淀。如：阿托品+氯化汞醇試液

黃色沉淀

東莨菪堿+氯化汞醇試液白色沉淀（四）硫酸鹽與溴化物反應(yīng)硫酸阿托品+氯化鋇白色沉淀（不溶于鹽酸或硝酸）硫酸阿托品+醋酸鉛白色沉淀（溶于醋酸氨或氫氧化鈉溶液）氫溴酸東莨菪堿+硝酸銀黃色凝乳沉淀氨試液中微溶，硝酸中幾乎不溶加氯試液，再加氯仿，氯仿層顯黃色或紅棕色

1.酸度

東莨菪堿堿性很弱，對(duì)石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿形成的鹽，通過(guò)其5%水溶液的pH值為4.0～5.5，來(lái)控制本品中的酸性雜質(zhì)。

氫溴酸東莨菪堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查2.易氧化物

主要是檢查本品在生產(chǎn)中可能引入的雜質(zhì)阿撲東莨菪堿（脫水東莨菪堿）及其他含有不飽和雙鍵的有機(jī)物質(zhì)，此類物質(zhì)可使KMnO4溶液褪色。本品水溶液+①氨試液不混濁合格混濁存在其他生物堿+②KOH試液瞬即消失的類白色渾濁（東莨菪堿）3.其他生物堿Ch.P檢查法：BP檢查法：TLC的高低濃度對(duì)比法

第四節(jié)

吩噻嗪類藥物的分析蒽雜蒽苯吩噻嗪硫氮雜蒽類藥物的母核噻嗪并還原性UV極弱堿性‥‥210鹽酸氯丙嗪奮乃靜結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.三環(huán)共軛的大體系

硫、氮雜原子上未共用電子對(duì)與苯環(huán)形成p-

共軛，具有強(qiáng)紫外吸收204~209nm、250~265nm（強(qiáng)）、300~325nm

由于2位、10位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。硫氮雜蒽母核的硫?yàn)槎r(jià)，易氧化為砜和亞砜，其紫外吸收光譜有明顯不同，它們具有四個(gè)峰值。另外，取代基R和R’的不同，則可產(chǎn)生不同的紅外光譜2.硫元素還原性易被氧化呈色自由基型‥‥‥砜亞砜非離子型3.與金屬離子絡(luò)合呈色

本類藥物中二價(jià)硫，可與鈀離子形成配位化合物，其氧化產(chǎn)物則無(wú)此反應(yīng)。此性質(zhì)可用于鑒別和含量測(cè)定，并具有專屬性，可消除氧化產(chǎn)物的干擾。4.鹵素（一）紫外特征吸收和紅外吸收光譜

本類藥物可用UV和IR鑒別，Ch.P中UV鑒別實(shí)例如下：

藥物名稱溶劑濃度（μg/ml）λmax（nm）AE1%1cm鹽酸氯丙嗪鹽酸（9→1000）52540.46915306—

—鹽酸異丙嗪鹽酸（0.01mol/L）6249—883~937奮乃靜無(wú)水乙醇72580.65—癸氟奮乃靜乙醇10260—

—鹽酸氟奮乃靜鹽酸（9→1000）10255—553~593鹽酸三氟拉嗪鹽酸（1→20）10256—630鹽酸硫利達(dá)嗪乙醇8264與315—

—鑒別試驗(yàn)硫酸、硝酸、過(guò)氧化氫（二）顯色反應(yīng)1、氧化顯色紅色淡黃色△深紅色

2.

與鈀離子絡(luò)合顯色利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色絡(luò)合物。（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)

癸氟奮乃靜碳酸鈉及碳酸鉀F-+酸性茜素鋯試液

[ZrF6]2-配位離子，茜素游離使溶液由紅色變?yōu)辄S色。600℃熾灼助灰化劑有關(guān)物質(zhì)檢查方法TLC法高低濃度對(duì)比法(10mg/ml)(0.1mg/ml)

第五節(jié)

苯并二氮雜卓類藥物的分析苯

UV并雜二氮弱堿性卓水解后為芳伯氨基最不活潑型Cl氯氮卓（利眠寧）地西泮（安定）

(一)化學(xué)鑒別試驗(yàn)

1、沉淀反應(yīng)

氯氮卓橙紅色沉淀阿普唑侖鹽酸氟西泮＋KBiI4

也生成橙紅色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀顏色變深，

因此可以相互區(qū)別。鑒別試驗(yàn)2.水解后重氮化—偶合反應(yīng)△HClOH-△3.

硫酸-熒光反應(yīng)

本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。例如：

地西泮

黃綠色

黃色氯氮卓

黃色

紫色艾司唑侖+H2SO4

亮綠色

+稀硫酸

天藍(lán)色硝西泮

淡藍(lán)色

藍(lán)綠色奧沙西泮

淡黃綠色4.分解產(chǎn)物的反應(yīng)如：氯元素的鑒別可進(jìn)行氯化物的鑒別△吸收液NaOH（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜

藥物名稱溶劑濃度（μg/ml）λmax（nm）A

地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242約0.51282

約0.23366

氯氮卓鹽酸溶液(9→1000)7245,308

阿普唑侖鹽酸溶液(9→1000)12264

鹽酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2,284±2比值1.95～2.50362±2

氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2,307±2

奧沙西泮乙醇10229,315±2(較弱)

紅外吸收光譜:已用于地西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、鹽酸氟西泮、氯硝西泮和奧沙西泮的鑒別。（三）色譜法

TLC法和HPLC法：均需要對(duì)照品

專屬性強(qiáng)有關(guān)物質(zhì)檢查

目前，國(guó)內(nèi)外藥典多采用色譜法對(duì)此類藥物進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，如：TLC、HPLC和GC（三唑侖）等。（一）氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查1、TLC法：

硅膠薄層：USP（對(duì)照品比較法）硅膠GF254薄層：BP（對(duì)照品＋主成分自身對(duì)照法）2、HPLC法：Ph.Eur（對(duì)照品＋主成分自身對(duì)照法）3、“酸性溶液的澄清度”法：Ch.P（主要控制中間體）（二）三唑侖中有關(guān)物質(zhì)的GC檢查

面積歸一化法一、非水溶液滴定法(一)基本原理

第六節(jié)含量測(cè)定當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測(cè)定條件。(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml結(jié)果高氯酸滴定液滴定以空白試驗(yàn)校正

(三)問(wèn)題討論1.適用范圍

主要用于Kb＜10-8的有機(jī)堿鹽的含量測(cè)定。對(duì)堿性較弱的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點(diǎn)指示的方法，可使pKb為8～13的弱堿性藥物采用本法滴定。

一般來(lái)說(shuō)：

Kb為10-8～10-10時(shí)，宜選冰醋酸作為溶劑；藥物的Kb為10-10～10-12時(shí)，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液；

Kb＜10-12時(shí)，應(yīng)用醋酐作為溶劑。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測(cè)定結(jié)果。

2.酸根的影響：無(wú)機(jī)酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞減：

高氯酸＞氫溴酸＞硫酸＞鹽酸＞硝酸＞磷酸＞有機(jī)酸

消除HX干擾的方法：加Hg(Ac)2

量不足終點(diǎn)不明顯，結(jié)果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

過(guò)量(1～3倍)不影響測(cè)定結(jié)果3.滴定劑的穩(wěn)定性非水溶液滴定法所用的溶劑為醋酸，具有揮發(fā)性，膨脹系數(shù)較大，溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度。若滴定樣品與標(biāo)定HClO4溶液時(shí)的溫度不一致，溫差未超過(guò)10℃時(shí)，應(yīng)將高氯酸滴定液的濃度用下列公式加以校正：

4.終點(diǎn)指示方法

常用電位法和指示劑法。電位滴定時(shí)用玻璃電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極。常用的指示劑：結(jié)晶紫、橙黃IV、萘酚苯甲醇、喹哪啶紅、孔雀綠。5.其他干擾

大多為排除干擾進(jìn)行堿化處理，有機(jī)溶劑提取分離出游離堿后，再進(jìn)行測(cè)定。(四)應(yīng)用實(shí)例

1.游離弱堿性藥物測(cè)定

異煙肼、尼可剎米、地西泮及氯氮卓等?；谶@些藥物分子結(jié)構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測(cè)定其含量。由于這些藥物的堿性強(qiáng)弱不同，測(cè)定時(shí)所采用溶劑、指示劑及其指示終點(diǎn)的方法也不盡相同。

藥物名稱取樣量(g)溶劑指示劑終點(diǎn)顏色尼可剎米0.15冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)綠色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml結(jié)晶紫綠色氯氮卓0.3冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)色

2.氫鹵酸鹽類藥物測(cè)定

當(dāng)這些藥物溶于冰醋酸時(shí)，由于氫鹵酸在冰醋酸中酸性較強(qiáng)，對(duì)測(cè)定有干擾，必須先加入過(guò)量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成難以電離的鹵化汞，而氫鹵酸鹽藥物，則轉(zhuǎn)變成可測(cè)定的醋酸鹽。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可獲得滿意的結(jié)果。應(yīng)用示例如下：

藥物名稱取樣量(g)溶劑加入醋酸汞試液(ml)指示劑終點(diǎn)顏色鹽酸氯丙嗪0.2醋酐10ml5橙黃Ⅳ玫瑰紅色鹽酸異丙嗪0.3冰醋酸10ml4結(jié)晶紫藍(lán)色鹽酸氟奮乃靜0.3冰醋酸20ml5結(jié)晶紫藍(lán)綠色鹽酸環(huán)丙沙星0.2冰醋酸25ml5橙黃Ⅳ粉紅色氫溴酸東莨菪堿0.3冰醋酸20ml5結(jié)晶紫純藍(lán)色鹽酸硫利達(dá)嗪0.3丙酮100ml5電位滴定法

3.硫酸鹽類藥物測(cè)定

硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級(jí)解離，生成SO42-，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為HSO4-，即只供給一個(gè)H+，所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。

（1）硫酸阿托品測(cè)定：阿托品為堿性較強(qiáng)的一元堿藥物，因而硫酸阿托品的化學(xué)結(jié)構(gòu)式可以簡(jiǎn)寫為(BH+)2·SO42-，用高氯酸直接滴定時(shí)的反應(yīng)式為：(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-

可根據(jù)1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的關(guān)系計(jì)算其含量。（2）硫酸奎寧測(cè)定：奎寧為二元堿，其中喹核堿的堿性較強(qiáng)，可與硫酸生成鹽；而喹啉環(huán)的堿性極弱，不能與硫酸成鹽，而保持游離狀態(tài)。當(dāng)用高氯酸直接滴定硫酸奎寧時(shí)，1mol的硫酸奎寧消耗3mol的高氯酸。其反應(yīng)式如下：

(C20H24N2·H+)2SO4+3HClO4→(C20H24N2·2H+)·2ClO4-

+(C20H24N2·2H+)·HSO4-·ClO4-

Ch.P.和USP都采用此法測(cè)定硫酸奎寧和硫酸奎尼丁的含量。(3)硫酸奎寧片的測(cè)定：

硫酸奎寧片劑堿化處理，生成奎寧游離堿，然后再用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定。此時(shí)1摩爾的硫酸奎寧可消耗4摩爾的高氯酸，因此片劑分析的滴定度與原料藥分析的滴定度不同。4.硝酸鹽的測(cè)定

硝酸在冰醋酸介質(zhì)中酸性不強(qiáng)，滴定反應(yīng)可以進(jìn)行完全。但是硝酸具有氧化性可以破壞指示劑使其變色，使指示劑無(wú)法指示終點(diǎn)。因此采用非水溶液滴定法測(cè)定硝酸鹽時(shí)，一般不用指示劑法而用電位法指示終點(diǎn)。（一）鈰量法硝苯地平的測(cè)定

基本原理

硝苯地平的測(cè)定原理，可用下列反應(yīng)式表示：

終點(diǎn)時(shí):微過(guò)量的Ce4+將指示劑中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈淡藍(lán)色或無(wú)色，以指示終點(diǎn)的到達(dá)。二、氧化還原滴定法(一）酸性染料比色法定義：利用堿性藥物，在一定的pH條件下，可與某些酸性染料結(jié)合顯色，而進(jìn)行分光光度法測(cè)定藥物含量的方法。三、比色法1.基本原理

2.影響因素

(1)水相最佳pH值的選擇：本法中水相的pH應(yīng)使有機(jī)堿性藥物均成陽(yáng)離子(BH+)，而酸性染料應(yīng)電離足夠的陰離子(In-),陰陽(yáng)離子才能定量生成離子對(duì)，并完全溶于有機(jī)溶劑中，而過(guò)量的染料完全保留在水相中，才能保證定量的測(cè)定。

(2)酸性染料及其濃度：常用酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等。酸性染料濃度，對(duì)測(cè)定影響不大，有足夠量即可。

(3)有機(jī)溶劑的選擇：有機(jī)溶劑應(yīng)對(duì)離子對(duì)提取率高，不與水混溶，或能與離子對(duì)形成氫鍵的有機(jī)溶劑。常用的有機(jī)溶劑有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳等。(4)水分的影響：嚴(yán)防水分混入有機(jī)溶劑中，水相中過(guò)量有色酸性染料，而影響測(cè)定結(jié)果；水分的混入使氯仿混濁，而影響比色測(cè)定。一般加入脫水劑，或?yàn)V紙過(guò)濾的方法，除去混入的水分。(5)酸性染料中的有色雜質(zhì)：先用有機(jī)溶劑萃取除去有色雜質(zhì)。3.應(yīng)用示例

Ch.P.中硫酸阿托品片、氫溴酸東莨菪堿片和氫溴酸山莨菪堿片等，采用本法測(cè)定含量測(cè)定。（二）鈀離子比色法優(yōu)點(diǎn)：鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測(cè)定。max~500nm吩噻嗪類藥物

+Pd2+pH2±0.1紅色絡(luò)合物在max處測(cè)定A，以對(duì)照法定量（一）直接分光光度法供試品不需提取分離，溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲屑纯蛇M(jìn)行含量測(cè)定。

1.奧沙西泮原料的測(cè)定在229nm，采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法測(cè)定。

2.鹽酸異丙嗪片的測(cè)定在249nm，采用E1cm1%＝910測(cè)定。

3.鹽酸異丙嗪注射液的測(cè)定

測(cè)定波長(zhǎng)的選擇：注射液處方加VC作抗氧劑，可還原異丙嗪紅色氧化產(chǎn)物，從而防止異丙嗪氧化變色。VC在鹽酸異丙嗪最大吸收波長(zhǎng)254nm處有吸收，干擾測(cè)定。因此選用306nm波長(zhǎng)測(cè)定鹽酸異丙嗪注射液的含量時(shí)，維生素C在此波長(zhǎng)處則不產(chǎn)生干擾。四、紫外分光光度法(二)提取后分光光度法鹽酸異丙嗪口服液（USP）鹽酸異丙嗪氨水堿化異丙嗪CH3Cl提取氯仿層鹽酸提取鹽酸異丙嗪max298nm處測(cè)定A，同時(shí)取鹽酸異丙嗪對(duì)照品配成溶液（50ug/ml），同法測(cè)定吸光度，計(jì)算含量。？此處采用的是對(duì)照品比較法，為什么不能用吸收系數(shù)法？（三）提取-雙波長(zhǎng)分光光度法

本法是USP收載的方法，用于鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定，主要用來(lái)校正樣品中氧化物對(duì)測(cè)定的干擾。測(cè)定原理

利用氯丙嗪的最λmax為254nm，其氧化物在此波長(zhǎng)也有吸收，同時(shí)在277nm氧化物也有吸收，且其A254=A277。因此，可由兩波長(zhǎng)處測(cè)得△A計(jì)算氯丙嗪含量。（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法

鹽酸氯丙嗪注射液抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線，不干擾鹽酸氯丙嗪的測(cè)定。因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰266nm～谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量

其測(cè)定方法如下：

1.光譜繪制

測(cè)繪條件：波長(zhǎng)范圍為200nm～320nm；狹縫為12nm；紙速為120mm/min。2.線性關(guān)系

精取鹽酸氯丙嗪對(duì)照液(50μg/ml)制得標(biāo)準(zhǔn)系列，以

HCl(0.1mol/L)為空白，按光譜繪制項(xiàng)下分別測(cè)定。用尺量取不同濃度系列溶液光譜266nm～谷254nm距離（DL），并以峰谷距離為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.供試品測(cè)定

精密量取鹽酸氯丙嗪注射液2.0ml，按光譜繪制項(xiàng)下的