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文檔簡介

1.2生物組學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.簡述基因工程的基本操作程序；2.獲取目的基因的常用方法；3.基因表達(dá)載體的組成；學(xué)習(xí)重難點(diǎn)：1.學(xué)習(xí)重點(diǎn)：目的基因的獲取方法及基因表達(dá)載體的構(gòu)建；2.學(xué)習(xí)難點(diǎn)：（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程

基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的監(jiān)測與鑒定一、發(fā)現(xiàn)問題，難點(diǎn)突破難點(diǎn)突破一：目的基因的獲取從基因文庫中獲取目的基因目的基因的一段已知序列，便于合成引物利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因PCR技術(shù)——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)DNA體外復(fù)制原理：前提：■模板■原料■能量■酶■引物條件：:熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(Taq酶)過程：解鏈90—95℃退火55—60℃延伸70—75℃重、難點(diǎn)突破二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因復(fù)制原點(diǎn)1.表達(dá)載體的組成基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心區(qū)分:啟動(dòng)子、終止子與起始密碼子和終止密碼子___動(dòng)子___始密碼子終止子終止密碼子驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄驅(qū)動(dòng)翻譯終止轉(zhuǎn)錄終止翻譯名稱:位置:作用:_________結(jié)合和識(shí)別部位2.構(gòu)建表達(dá)載體的過程【動(dòng)動(dòng)手】請利用手中的目的基因和質(zhì)粒的模擬材料，動(dòng)手體會(huì)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程。已知：題目中限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓AATTC—

[小結(jié)]表達(dá)載體的構(gòu)建同種限制酶相同的黏性末端DNA連接酶【合作探究】思考:目的基因與載體連接時(shí)產(chǎn)物可能有？1.基因—基因2.質(zhì)粒—質(zhì)粒3.基因—質(zhì)粒(重組質(zhì)粒)二、針對訓(xùn)練，能力提升利用平板完成平臺(tái)發(fā)送的習(xí)題微課視頻地址：導(dǎo)

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