細菌與病毒的病原學(xué)檢查法演示文稿本文檔共14頁；當前第1頁；編輯于星期日\22點40分優(yōu)選細菌與病毒的病原學(xué)檢查法Ppt本文檔共14頁；當前第2頁；編輯于星期日\22點40分第一節(jié)細菌感染的微生物學(xué)檢查法一、細菌學(xué)診斷形態(tài)學(xué)檢查1.普通光學(xué)顯微鏡檢查法：2.暗視野顯微鏡檢查法：檢查活菌、螺旋體及其動力3.熒光顯微鏡檢查法：病原菌的分離培養(yǎng)生化試驗血清學(xué)鑒定:玻片凝集試驗動物實驗：毒力、致病性毒力檢測：LD50、ID50，毒素藥物敏感試驗：紙片擴散法本文檔共14頁；當前第3頁；編輯于星期日\22點40分二、檢測病原菌成分抗原檢測：凝集試驗、對流免疫電泳、酶免疫技術(shù)、免疫熒光技術(shù)核酸檢測：1.核酸雜交技術(shù):Southern印跡雜交、Northern印跡雜交、原位雜交2.PCR技術(shù)3.基因芯片4.16rRNA基因序列分析：編碼rRNA，保守區(qū)、可變區(qū)本文檔共14頁；當前第4頁；編輯于星期日\22點40分三、抗體的檢測（血清學(xué)診斷）凝集試驗：直接、間接、協(xié)同、冷凝集沉淀試驗：環(huán)狀、絮狀、雙向、對流電泳補體結(jié)合試驗：酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：取雙份血清，抗體效價比早期高4倍以上有意義。本文檔共14頁；當前第5頁；編輯于星期日\22點40分第二節(jié)病毒感染的微生物學(xué)檢查法本文檔共14頁；當前第6頁；編輯于星期日\22點40分一、形態(tài)學(xué)檢查1.電子顯微鏡檢查直接鏡檢法：107顆粒/ml，電鏡觀察病毒顆粒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)免疫電鏡法（IEM）：標本+特異性抗體病毒顆粒聚集電鏡觀察輪狀病毒的糞便、HAV、HBV的血清、皰疹病毒的皰疹液，可早期診斷。2.光學(xué)顯微鏡檢查痘病毒、觀察包涵體、CPE本文檔共14頁；當前第7頁；編輯于星期日\22點40分二、病毒分離培養(yǎng)的方法1、動物接種常用動物：小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猴等；接種途徑：皮下、皮內(nèi)、腦內(nèi)、腹腔、靜脈等接種；觀察：動物出現(xiàn)感染癥狀，取病變組織進一步檢查本文檔共14頁；當前第8頁；編輯于星期日\22點40分2、雞胚培養(yǎng)：孵化9～14天的雞胚接種途徑有：絨毛尿囊膜、羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊。鑒定：血凝和血凝抑制試驗?zāi)蚰仪唤臃N羊膜腔接種本文檔共14頁；當前第9頁；編輯于星期日\22點40分卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種本文檔共14頁；當前第10頁；編輯于星期日\22點40分3、組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)：單層細胞培養(yǎng)、懸浮細胞培養(yǎng)；原代細胞培養(yǎng)：由新鮮組織制備二倍體細胞：二倍體性質(zhì)，傳40~50代，人胚肺成纖維細胞傳代細胞系：由突變的二倍體細胞或腫瘤細胞建立的，HeLa細胞本文檔共14頁；當前第11頁；編輯于星期日\22點40分三、病毒在培養(yǎng)細胞中增殖的鑒定指標細胞的變化：CPE紅細胞吸附（HAd）：紅細胞凝集：病毒干擾作用：風疹病毒，?？刹《?Vero細胞。中和試驗（NT）：是病毒在活體內(nèi)或細胞培養(yǎng)中被特異性抗體中和而失去感染性的一種試驗空斑形成試驗：蝕斑形成單位（PFU），感染性病毒的滴度用PFU/ml表示。四、病毒成分的檢測病毒抗原的檢測：HIV和HBV抗原病毒核酸的檢測本文檔共14頁；當前第12頁；編輯于星期日\22點40分

ABCA：未感染的成纖維細胞。B：單純皰疹病毒感染后使細胞變圓。C：呼吸道合胞病毒感染后出現(xiàn)細胞融合。本文檔共14頁；當前第13頁；編輯于星期日\22點40分五、病毒抗體的檢測：中和試驗：陽性：可能以前有過隱性感