安徽省重點中學(xué)2023-2024學(xué)年生物高三上期末調(diào)研試題注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．為了研究線粒體RNA聚合酶的合成，科學(xué)家采用溴化乙啶（能專一性抑制線粒體DNA的轉(zhuǎn)錄）完成了下表實驗。下列相關(guān)說法錯誤的是組別實驗處理實驗結(jié)果實驗組用含溴化乙啶的培養(yǎng)基培養(yǎng)鏈孢霉鏈孢霉線粒體RNA聚合酶含量過高對照組用不含溴化乙啶的培養(yǎng)基培養(yǎng)鏈孢霉鏈孢霉線粒體RNA聚合酶含量正常A．線粒體DNA控制的性狀遺傳不遵循孟德爾的遺傳規(guī)律B．RNA聚合酶可與DNA上的特定序列結(jié)合，驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程C．由實驗可知，線粒體RNA聚合酶由線粒體DNA控制合成D．由實驗可知，線粒體DNA轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物對核基因的表達(dá)有反饋作用2．下列關(guān)于NaOH溶液在生物實驗中作用的敘述，正確的是A．探究pH對纖維素酶活性的影響時，可用不同濃度的NaOH溶液調(diào)節(jié)酸堿度B．鑒定還原糖時，向樣液中預(yù)先加入NaOH溶液可為反應(yīng)提供堿性環(huán)境C．探究酵母菌細(xì)胞呼吸方式時，讓空氣先通入NaOH溶液是為了提供堿性環(huán)境D．探究細(xì)胞大小與物質(zhì)運輸關(guān)系時，使用NaOH溶液以提高物質(zhì)運輸效率3．科學(xué)家用槍烏賊的神經(jīng)纖維進(jìn)行實驗（如圖甲，電流左進(jìn)右出為+），記錄在鈉離子溶液中神經(jīng)纖維產(chǎn)生興奮的膜電位（如圖乙），其中箭頭表示施加適宜刺激，陰影表示興奮區(qū)域。若將記錄儀的微電極均置于膜外，其他條件不變，則測量結(jié)果是A． B．C． D．4．果蠅中一對同源染色體的同源區(qū)段同時缺失的個體叫作缺失純合子，只有一條發(fā)生缺失的個體叫作缺失雜合子。已知缺失雜合子可育，而缺失純合子具有致死效應(yīng)。研究人員用一只棒眼雌果蠅和正常眼雄果蠅多次雜交，統(tǒng)計F1的性狀及比例，結(jié)果是棒眼雌果蠅︰正常眼雌果蠅︰棒眼雄果蠅=1︰1︰1。在不考慮X、Y染色體同源區(qū)段的情況下，下列有關(guān)分析錯誤的是A．親本雌果蠅發(fā)生了染色體片段缺失，且該果蠅是缺失雜合子B．正常眼是隱性性狀，且缺失發(fā)生在X染色體的特有區(qū)段上C．讓F1中雌雄果蠅自由交配，F(xiàn)2雄果蠅中棒眼︰正常眼=2︰1D．用光學(xué)顯微鏡觀察，能判斷F1中正常眼雌果蠅的染色體是否缺失了片段5．某些癌細(xì)胞中多藥耐藥（MDR）基因高度表達(dá)后，會使這些癌細(xì)胞對化療藥物的抗性增強。MDR基因表達(dá)產(chǎn)物是P—糖蛋白（P—gp），該蛋白位于細(xì)胞膜上有ATP依賴性跨膜轉(zhuǎn)運活性，可將藥物轉(zhuǎn)運至細(xì)胞外，使細(xì)胞獲得耐藥性。而P—gp低水平表達(dá)的癌細(xì)胞內(nèi)，某些化療藥物的濃度明顯升高。下列敘述正確的是A．P—gp轉(zhuǎn)運蛋白轉(zhuǎn)運物質(zhì)的方式屬于協(xié)助擴散B．P—gp是由游離在細(xì)胞質(zhì)中的核糖體合成的C．化療藥物可提高M(jìn)DR基因高度表達(dá)的癌細(xì)胞比例D．提高癌細(xì)胞P-gp的活性為癌癥治療開辟了新途徑6．下列關(guān)于健康人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)與調(diào)節(jié)的敘述，錯誤的是（）A．CO2調(diào)節(jié)呼吸頻率時存在反饋調(diào)節(jié)機制B．影響肝臟細(xì)胞糖代謝途徑的激素有多種C．某些神經(jīng)結(jié)構(gòu)能釋放激素參與體液調(diào)節(jié)D．不同的神經(jīng)中樞之間一般不會產(chǎn)生聯(lián)系二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某地為凈化生活污水建造了人工濕地，圖甲為人工濕地示意圖。污水與污泥在沿一定方向流動的過程中，主要利用人工基質(zhì)、微生物、植物等對污水進(jìn)行凈化。回答下列問題：（1）該濕地中所有生物構(gòu)成一個__________。經(jīng)過處理后的污水流入上行池，在上行池中可以養(yǎng)殖一些魚、蝦等水生動物，獲取一定的經(jīng)濟利益，這些水生動物屬于生態(tài)系統(tǒng)成分中的__________。（2）某調(diào)查小組對該生態(tài)系統(tǒng)各營養(yǎng)級的能量情況進(jìn)行了相關(guān)調(diào)查，流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量__________（填“大于”“等于”或“小于”）生產(chǎn)者固定的能量。圖乙表示部分能量流動簡圖，A、B、C、D表示該濕地生態(tài)系統(tǒng)的生物成分，數(shù)值表示其同化量，其中表示生產(chǎn)者的是__________。第二和第三營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率是__________。（3）濕地具有凈化污水的功能，這體現(xiàn)了生物多樣性的__________價值。（4）人工濕地雖可凈化污水，但對污水排放量還是要加以控制，原因是__________。8．（10分）回答下列關(guān)于光合作用的問題。生姜屬于耐陰作物，在橘子樹底下種植生姜，不僅可以充分利用果樹的立體空間為生姜提供遮陽，提高光能和土地利用率，而且還能增加單位面積的經(jīng)濟效益。下圖為這兩種植物在溫度、水分等均適宜的條件下，光合作用速率與呼吸速率的比值（P/R）隨光照強度變化的曲線圖。（1）圖中表示生姜的曲線是________。若24小時中光照與黑暗時間相等，生姜正常生長所需的光照強度應(yīng)________。光照強度為a時，B植物葉肉細(xì)胞光合作用所需CO2來自________。（2）某種植物A，經(jīng)過長期進(jìn)化形成獨特光合作用和特有的固定CO2的方式，如圖一和圖二所示（圖三表示大部分植物光合作用固定CO2的方式）。植物A在夜間開放氣孔吸收CO2，固定CO2形成蘋果酸存儲于________中，從而導(dǎo)致細(xì)胞液酸度上升：而白天氣孔關(guān)閉，蘋果酸脫羧釋放CO2用于________。這種特殊的代謝方式，有利于植物生長在___________的地區(qū)。以避免白天由于氣孔關(guān)閉而導(dǎo)致________供應(yīng)不足。9．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。10．（10分）請回答下列與生物工程有關(guān)的問題：（1）基因工程中常利用PCR技術(shù)擴增目的基因，此過程需要在________酶的作用下進(jìn)行，主要利用了_________原理。此過程的前提是要有____________序列，以便根據(jù)這一序列合成_______。（2）在基因表達(dá)載體中，______是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出_______。（3）哺乳動物核移植可以分為體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植。但實際操作中，利用體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度很大，其原因是_________________________________________。11．（15分）材料一記者從福建省三明市科技局獲悉，近日，全國首個治療性單克隆抗體中試公共服務(wù)平臺項目在三明高新區(qū)金沙園開工建設(shè)。項目建成后，將用于研發(fā)創(chuàng)新型單克隆抗體藥物，成為腫瘤治療史上一個新的里程碑。材料二在一項新的研究中，來自以色列耶路撒冷希伯來大學(xué)、美國哥倫比亞大學(xué)醫(yī)學(xué)中心和紐約干細(xì)胞基金會研究所的研究人員成功地產(chǎn)生一種新類型的胚胎干細(xì)胞，它只攜帶單拷貝人類基因組，而不是通常在正常干細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的兩個拷貝人類基因組。（1）結(jié)合材料一回答下列問題：①雜交瘤細(xì)胞的特點是既能___，又能_______________。②單克隆抗體最主要的優(yōu)點在于它的_________________________。③單克隆抗體的兩個主要用途是：__________與________________。④惡性腫瘤細(xì)胞表面存在著一些異于普通健康細(xì)胞的_______，這些成分可以作為單克隆抗體的良好靶點。（2）結(jié)合材料二回答下列問題：①胚胎干細(xì)胞在功能上，具有_____________。②ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化，對它可以進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行___________。③人類基因組計劃測定的是____條染色體上DNA的堿基序列。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

分析表格：實驗組和對照組的單一變量為是否加入溴化乙啶（專一性阻斷線粒體DNA的轉(zhuǎn)錄過程），結(jié)果加入溴化乙啶的實驗組中，鏈孢霉線粒體內(nèi)的RNA聚合酶含量過高，而沒有加入溴化乙啶的對照組中，鏈孢霉線粒體內(nèi)的RNA聚合酶含量正常，說明線粒體內(nèi)RNA聚合酶是由核基因控制合成的，且線粒體基因表達(dá)的產(chǎn)物可能對細(xì)胞核基因的表達(dá)有反饋抑制作用。據(jù)此答題?！驹斀狻緼、線粒體基因控制的性狀遺傳不遵循孟德爾遺傳規(guī)律，孟德爾遺傳定律只適用于進(jìn)行有性生殖的真核生物的細(xì)胞核基因的遺傳，A正確；B、RNA聚合酶可與DNA上的特定序列結(jié)合，即基因上游的啟動子結(jié)合，驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程，B正確；C、實驗組培養(yǎng)基中加入了溴化乙啶，線粒體DNA的轉(zhuǎn)錄被阻斷，而鏈孢霉線粒體內(nèi)的RNA聚合酶含量過高，說明線粒體內(nèi)RNA聚合酶由核基因控制合成，C錯誤；D、用不含溴化乙啶的培養(yǎng)基培養(yǎng)鏈孢霉，鏈孢霉線粒體內(nèi)的RNA聚合酶含量正常，說明線粒體基因表達(dá)的產(chǎn)物可能對細(xì)胞核基因的表達(dá)有反饋抑制作用，D正確。故選C。2、A【解析】探究pH對纖維素酶活性的影響時，可用不同濃度的NaOH溶液調(diào)節(jié)酸堿度，A正確；鑒定蛋白質(zhì)時，向樣液中預(yù)先加入NaOH溶液可為反應(yīng)提供堿性環(huán)境，B錯誤；探究酵母菌細(xì)胞呼吸方式時，讓空氣先通入NaOH溶液是為了除去空氣中的二氧化碳，避免對實驗結(jié)果的干擾，C錯誤；探究細(xì)胞大小與物質(zhì)運輸關(guān)系時，以NaOH溶液在瓊脂塊中的擴散體積比表示吸收速度，D錯誤。3、B【解析】

據(jù)圖分析，興奮在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo)可以是雙向的。圖中的電位計檢測的是兩個神經(jīng)元膜外的電位差；在靜息狀態(tài)下呈外正內(nèi)負(fù)，動作電位為外負(fù)內(nèi)正，因此電流表發(fā)生兩次相反地轉(zhuǎn)動，并且兩點是先后興奮，因此中間會由延擱。【詳解】由題干和圖解可知，電極所示是膜外電位變化，未興奮之前，兩側(cè)的電位差為0；刺激圖中箭頭處，左側(cè)電極先興奮，左側(cè)膜外變?yōu)樨?fù)電位，而右側(cè)電極處膜外仍為正電位，因此兩側(cè)的電位差為負(fù)值；由于兩點中左側(cè)先興奮，右側(cè)后興奮，并且兩點之間具有一定的距離，因此中間會出現(xiàn)延擱；當(dāng)興奮傳導(dǎo)到右側(cè)電極后，電位差與之前的相反，因此測量結(jié)果為B。故選B。4、C【解析】

根據(jù)題干信息分析，缺失一對同源染色體的同源區(qū)段的個體叫作缺失純合子，不可育；只有一條發(fā)生缺失的個體叫作缺失雜合子，可育。研究人員用一只棒眼雌果蠅和正常眼雄果蠅多次雜交，后代雌性出現(xiàn)了兩種表現(xiàn)型，比例為1：1，說明棒眼對正常眼為顯性性狀，且控制該性狀的基因位于X染色體特有的片段上；而后代雄性只有棒眼一種表現(xiàn)型，說明母本存在缺失現(xiàn)象，為缺失雜合子，即有一條X染色體上控制眼色的基因所在的片段發(fā)生了缺失?！驹斀狻扛鶕?jù)以上分析已知，母本發(fā)生了染色體片段缺失，且該果蠅是缺失雜合子，A正確；根據(jù)以上分析已知，棒眼是顯性性狀，正常眼是隱性性狀，控制該性狀的基因位于X染色體特有的片段上，且該片段發(fā)生了缺失，B正確；F1中雌果蠅中棒眼為雜合子，正常眼為缺失雜合子，因此其產(chǎn)生的棒眼基因與正常眼基因的比例為1：2，則讓F1中雌雄果蠅自由交配，F(xiàn)2雄果蠅中棒眼︰正常眼=1︰2，C錯誤；根據(jù)以上分析可知，F(xiàn)1中正常眼雌果蠅的染色體應(yīng)該發(fā)生了缺失，屬于染色體結(jié)構(gòu)的變異，可以在光學(xué)顯微鏡下觀察到，D正確。5、C【解析】

糖蛋白的合成需要附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和線粒體的協(xié)調(diào)配合。P—糖蛋白（P—gp）位于細(xì)胞膜上有ATP依賴性跨膜轉(zhuǎn)運活性，說明此蛋白的運輸需要消耗能量?！驹斀狻縋—gp轉(zhuǎn)運蛋白轉(zhuǎn)運藥物消耗ATP，不屬于協(xié)助擴散，A錯誤；P—gp轉(zhuǎn)運蛋白是由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成的，B錯誤；化療藥物會對癌細(xì)胞起選擇作用，P-gp轉(zhuǎn)運蛋白基因高度表達(dá)的癌細(xì)胞的抗藥性強，生存下來的比例高，C正確；提高癌細(xì)胞P—gp轉(zhuǎn)運蛋白的活性即提高了癌細(xì)胞的抗藥性，不利于癌癥的治療，D錯誤；因此，本題答案選C?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是看清題干中相關(guān)信息“MDR基因表達(dá)產(chǎn)物是P—糖蛋白（P—gp），該蛋白位于細(xì)胞膜上有ATP依賴性跨膜轉(zhuǎn)運活性”，再根據(jù)題意作答。6、D【解析】

1、胰島素是由胰島B細(xì)胞分泌，其作用分為兩個方面：促進(jìn)血糖氧化分解、合成糖原、轉(zhuǎn)化成非糖類物質(zhì)；抑制肝糖原的分解和非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化；胰高血糖素和腎上腺素都能促進(jìn)肝糖原的水解，使血糖濃度升高。2、神經(jīng)調(diào)節(jié)與體液調(diào)節(jié)之間的關(guān)系：一方面大多數(shù)內(nèi)分泌腺都受中樞神經(jīng)系統(tǒng)的控制；另一方面內(nèi)分泌腺分泌的激素也可以影響神經(jīng)系統(tǒng)的功能?！驹斀狻緼、人體代謝產(chǎn)生的CO2可調(diào)節(jié)呼吸頻率，這體現(xiàn)反饋調(diào)節(jié)機制，A正確；B、肝臟細(xì)胞中胰島素可促進(jìn)血糖合成肝糖原，胰高血糖素和腎上腺素可促進(jìn)肝糖原分解，肝細(xì)胞中糖代謝途徑受多種激素影響，B正確；C、神經(jīng)系統(tǒng)的某些結(jié)構(gòu)也能釋放激素，如下丘腦的神經(jīng)分泌細(xì)胞能分泌抗利尿激素和促激素釋放激素，C正確；D、神經(jīng)中樞之間低級中樞受腦中相應(yīng)的高級中樞調(diào)控，D錯誤。故選D?！军c睛】本題考查神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)相關(guān)知識，對神經(jīng)調(diào)節(jié)過程、體液調(diào)節(jié)過程、神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)關(guān)系的識記和掌握，結(jié)合題干分析判斷，做出選擇。二、綜合題：本大題共4小題7、群落消費者大于A18%間接生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力是有限的【解析】

分析圖甲可知，人工濕地中的植物一般選擇具有一定凈化污水能力的，并且宜選用本地物種，避免外來物種入侵，導(dǎo)致對當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)生物生存造成威脅。分析圖乙，根據(jù)能量流動方向和各成分的能量大小可以判斷，其中A表示生產(chǎn)者，B表示分解者，C表示次級消費者，D表示初級消費者?！驹斀狻浚?）該濕地中所有生物構(gòu)成群落（在一定時間內(nèi)一定空間內(nèi)上的分布各物種的種群集合）。水生動物以生產(chǎn)者為食，屬于生態(tài)系統(tǒng)成分中的消費者；（2）流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量等于生產(chǎn)者固定的能量+污水中有機物的能量，因此流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量大于生產(chǎn)者固定的能量。A所含能量最多，表示生產(chǎn)者，B表示分解者，C表示次級消費者，D表示初級消費者。能量在第二、三營養(yǎng)級之間的傳遞效率為第三營養(yǎng)級同化的能量÷第二營養(yǎng)級同化的能量×100%＝2.7×105÷（1.5×106）×100%＝18%；（3）濕地凈化污水的作用體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)具有生態(tài)功能，屬于生物多樣性的間接價值；（4）人工濕地雖可凈化污水，但生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力是有限的，因此要對污水排放量加以控制?！军c睛】本題以人工濕地為素材，考查了生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、功能、穩(wěn)定性以及人工濕地的作用等知識，意在考查考生能從題干中獲取有效信息的能力；能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力，難度適中。8、B大于a細(xì)胞呼吸和外界環(huán)境液泡光合作用的暗反應(yīng)干旱、炎熱地區(qū)CO2【解析】

分析坐標(biāo)圖，A是陽生植物，B是陰生植物，圖中表示生姜（耐陰作物）的曲線是B。

分析下圖：植物A在夜間開放氣孔吸收CO2，形成蘋果酸存儲于液泡中，以避免白天由于氣孔關(guān)閉而導(dǎo)致二氧化碳供應(yīng)不足。【詳解】（1）由于生姜屬于耐陰作物，在橘子樹底下種植生姜，上圖中P/R=1時的光照強度為光補償點，達(dá)到最大值所需要的最小光照強度為光飽和點，據(jù)圖可知B曲線的光補償點和飽和點均較低，故B曲線表示生姜。a點時B植物的P/R接近1，若光照與黑暗時間相等，由于生姜正常生長需要保證光合速率大于呼吸速率，且一晝夜中有有機物的積累，故所需的光照強度應(yīng)大于a。光照強度為a時，可以認(rèn)為對于生姜整個植株而言，光合速率=呼吸速率，而對于葉肉細(xì)胞來說，光合速率大于呼吸速率，故葉肉細(xì)胞光合作用所需的二氧化碳一部分來自線粒體的呼吸作用，一部分來自于外界環(huán)境。

（2）由圖可知：植物A在夜間開放氣孔吸收CO2，固定CO2形成蘋果酸存儲于液泡中。白天氣孔關(guān)閉，蘋果酸脫羧釋放CO2用于暗反應(yīng)CO2的固定，這種特殊的代謝方式，以避免白天由于氣孔關(guān)閉而導(dǎo)致CO2供應(yīng)不足，有利于植物生長在干旱、炎熱的地區(qū)?！军c睛】本題主要考查光合作用的相關(guān)知識，意在考查考生對圖形的分析與理解，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。9、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠?！军c睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。10、熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）DNA雙鏈復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸引物啟動子mRNA動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難【解析】

PCR技術(shù)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！驹斀狻浚?）基因工程中常利用PCR技術(shù)擴增目的基因，此過程需要在熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）酶的作用下進(jìn)行，主要利用了DNA雙鏈復(fù)制原理。此過程的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。（2）在基因表達(dá)載體中，啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，并驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。（3）由于體細(xì)胞分化程度高，不容易恢復(fù)全能性，因此體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度