美羅培南方法學(xué)研究演示文稿本文檔共26頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分（優(yōu)選）美羅培南方法學(xué)研究本文檔共26頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分美羅培南(meropenem)簡介美羅培南：非腸道的注射用抗生素對陽性和陰性革蘭氏病原體有抗菌作用；加熱時分解，得到開環(huán)物。Meropenem(300mg)USPRetailPrice:$189.00本文檔共26頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分美羅培南簡介條件試驗(yàn)方法學(xué)有關(guān)物質(zhì)檢查與含量測定本文檔共26頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分實(shí)驗(yàn)儀器及工作條件

1、儀器Agilent1100高效液相色譜儀50ul微量注射器pH計，砂芯漏斗，針孔過濾器2、試劑乙腈（色譜專用）三乙胺（A.R.）濃磷酸（A.R.）美羅培南試樣本文檔共26頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分3、HPLC分析條件色譜柱:ZORBAXEclipseXDB-C84.6×150mm,5μm(Agilent)柱溫：室溫流動相：0.3%三乙胺(用磷酸調(diào)節(jié)pH=5.0)的水溶液和乙腈(體積比100∶7)；也可以簡化用純水和乙腈(體積比100∶7)作流動相檢測器：DAD檢測波長：220nm進(jìn)樣體積：20μl定量環(huán)，實(shí)際每次注射40μl可不是件容易事啊！實(shí)驗(yàn)儀器及工作條件

本文檔共26頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分美羅培南簡介條件試驗(yàn)方法學(xué)有關(guān)物質(zhì)檢查與含量測定本文檔共26頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分方法學(xué)研究1、空白試驗(yàn)2、美羅培南與BP及開環(huán)物的分離3、美羅培南檢測限、定量限4、破壞性試驗(yàn)5、溶液穩(wěn)定性6、工作曲線7、樣品的有關(guān)物質(zhì)檢測和含量測定本文檔共26頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分1、空白試驗(yàn)空針進(jìn)樣：基線是否穩(wěn)定流動相進(jìn)樣：是否有雜質(zhì)影響注意縱軸本文檔共26頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分色譜法中的信噪比上：199nm

N

=

4mAU中：228nmN=0.35mAU下：275nmN=0.02mAUDEP為例,典型UV吸收光譜較小波長處：信號和噪聲均大常識大本文檔共26頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分色譜法中的信噪比199nm

S

=

58.8

mAUS/N=14.7228nmS=18.3mAUS/N=52.3275nmS=2.18mAUS/N=1091.5

mg/L的DEP本文檔共26頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分使用緩沖溶液不使用緩沖溶液緩沖溶液對峰形的改善原因分析：本文檔共26頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分2、美羅培南與BP及開環(huán)物的分離美羅培南與中間產(chǎn)物BP分離BP美羅培南BP流動相改用50%乙腈：50%純水折騰好幾天啊本文檔共26頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分美羅培南與BP光譜比較多波長檢測+化學(xué)計量學(xué)本文檔共26頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分美羅培南與開環(huán)物分離計算分離度，理論塔板數(shù)本文檔共26頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分3、美羅培南測出限、測定限測出限(LOD:S/N=3)

測定限(LOQ:S/N=10)LOD：0.19mg/LLOQ：0.62mg/ml稀釋多次減少污染本文檔共26頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分4、破壞性試驗(yàn)(1)

25mg美羅培南，加0.1mol/LHCl5ml，室溫振搖溶解后反應(yīng)液用0.1mol/LNaOH中和至中性進(jìn)樣主峰84%酸破壞本文檔共26頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分4、破壞性試驗(yàn)(2)25mg美羅培南，加0.01mol/LNaOH5ml，振搖溶解，室溫放置34min后反應(yīng)液用0.01mol/LHCl中和至中性進(jìn)樣。主峰95.5%堿破壞本文檔共26頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分4、破壞性試驗(yàn)(3)25mg美羅培南，加1％雙氧水1ml，振搖，室溫放置14min，加熱分解剩余的雙氧水，加流動相至5ml過濾后進(jìn)樣。主峰83.33%氧化破壞本文檔共26頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分4、破壞性試驗(yàn)(4，5，6)高溫破壞高濕破壞光照破壞主峰98.08%主峰98.50%主峰96.59%高溫/光照/高濕今天網(wǎng)絡(luò)討論：為什么要破壞性試驗(yàn)？本文檔共26頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分5、溶液穩(wěn)定性溶液室溫放置6h，過程中取樣測試穩(wěn)定性0.5mg/ml5mg/ml時間/min面積百分比時間/min面積百分比試驗(yàn)溶液要現(xiàn)配現(xiàn)做，尤其是濃溶液！稀溶液較穩(wěn)定本文檔共26頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分6、工作曲線美羅培南（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0）mg/ml主峰面積作圖R要求0.999好高的要求,稱得要準(zhǔn)阿!本文檔共26頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分7、樣品有關(guān)物質(zhì)檢測和含量測定有關(guān)物質(zhì)檢測粗品、040901-1、040901-2、040901-3、041001、041002、041003含量測定041001、041002、041003先以USP對照品標(biāo)定040901-3批以后都以040901-3為對照品

USP好貴啊！本文檔共26頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分美羅培南簡介條件試驗(yàn)方法學(xué)有關(guān)物質(zhì)檢查與含量測定本文檔共26頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期二\19點(diǎn)1分有關(guān)物質(zhì)檢查和含量測定1、方法步驟

A有關(guān)物質(zhì)檢測供試品溶液：5mg/ml，用流動相溶解。對照溶液：將供試品溶液用流動相稀釋制成25μg/ml（1：200）。記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3