關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體終極版第1頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體第2頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三一、動(dòng)物細(xì)胞融合（別名：細(xì)胞雜交）1.概念：

是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。

融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。第3頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.過(guò)程：、動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理是什么？、動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方式是什么？與植物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方式有什么不同？第4頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞融合有絲分裂兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞滅活的病毒？這是什么？？用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程2.過(guò)程：第5頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三⑴.原理：與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，即細(xì)胞膜的流動(dòng)性。⑵.誘導(dǎo)方式：物理法：電激、振動(dòng)、離心化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）生物法：滅活的病毒例如：仙臺(tái)病毒第6頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；重要用途：制備單克隆抗體。3.意義和應(yīng)用：第7頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三三、單克隆抗體1、抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）2、抗體是如何產(chǎn)生的？B淋巴細(xì)胞抗原增殖分化成漿細(xì)胞3、一種漿細(xì)胞能產(chǎn)生幾種抗體？一種知識(shí)回顧第8頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三思考：1、傳統(tǒng)的方法得到的抗體具有什么特點(diǎn)？特異性差、產(chǎn)量和純度都很低。第9頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三二、單克隆抗體1.概念：

由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。

特點(diǎn)：

特異性強(qiáng)、靈敏度高

第10頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三思考：1、在體外培養(yǎng)的條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞有沒(méi)有可能無(wú)限增殖？不可能2、我們學(xué)過(guò)的什么細(xì)胞具有這樣的能力？癌細(xì)胞3、你認(rèn)為有什么辦法讓B淋巴細(xì)胞也具有這樣的能力？細(xì)胞融合第11頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞）能無(wú)限增殖雜種細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)２、實(shí)驗(yàn)原理：動(dòng)物細(xì)胞融合創(chuàng)始人：米爾斯坦單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖柯勒第12頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.制備過(guò)程：誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)注射抗原的目的是什么為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，多次篩選大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法第13頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三第14頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三考考你！1.在制備單克隆抗體的過(guò)程中，選用哪兩種細(xì)胞進(jìn)行融合？為什么選擇這兩種細(xì)胞？漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生單一抗體。第15頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三考考你！2、在這過(guò)程中進(jìn)行了幾次篩選？分別在哪個(gè)步驟進(jìn)行篩選？?jī)纱魏Y選。第一次在B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合以后篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。第16頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三三、單克隆抗體的應(yīng)用請(qǐng)同學(xué)們根據(jù)自己所收集的資料，談?wù)剢慰寺】贵w的應(yīng)用。１、可用于作為診斷試劑２、可用于疾病治療３、可用于運(yùn)載藥物（作為運(yùn)載對(duì)應(yīng)疾病的藥物的“生物導(dǎo)彈“。）“生物導(dǎo)彈”＝單克隆抗體＋藥物第17頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三小結(jié)第18頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三

細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合

漿篩選

瘤細(xì)胞

雜交細(xì)胞培養(yǎng)選出能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群繼續(xù)培養(yǎng)體外培養(yǎng)

體內(nèi)培養(yǎng)從培養(yǎng)液或小鼠腹水中取出

單克隆抗體第19頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：1、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是（）A、融合的原理B、融合的優(yōu)點(diǎn)C、融合的誘導(dǎo)手段D、融合的過(guò)程第20頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：2、動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是（）A、克服遠(yuǎn)緣雜交不親和B、制備單克隆抗體C、培育新物種D、生產(chǎn)雜種細(xì)胞第21頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：3、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A、經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞B、不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞C、經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D、不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞第22頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：4.單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融

合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞

⑤雜交瘤細(xì)胞

A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③第23頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：5、(2006，廣雅中學(xué)考題)研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（）A．利用單克隆抗體特異性地對(duì)抗癌細(xì)胞B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C．抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合第24頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：6．只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法（）A．PEG

B．滅活的病毒C．電刺激D．離心7、“生物導(dǎo)彈”是指（）A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單抗上連接抗癌藥物第25頁(yè)，講稿共27頁(yè)，2023年5月2日，星期三練習(xí)：8、（多選）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是（）A．B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般不

需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B．融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又