風濕免疫科業(yè)務學習自身免疫性肝病相關自身抗體譜自身免疫性肝病相關自身抗體譜自身免疫性肝?。ˋILD）與自身免疫密切相關以肝、膽損傷為主三種疾病AIH

PBC

PSC其診斷和治療完全不同于一般慢性病毒性肝炎AIH：西歐和

北美患病率

0.1-1.9

/

10

萬人

占所有

慢性肝炎的

20%左右PBC：西方

國家患病率

為10-20/10萬人自身免疫性肝病相關自身抗體譜AILD發(fā)病情況一般認為,

AILD好發(fā)于歐美白人，亞洲黃種人較少PSC：歐美地區(qū)患病率至少為2-7/

10萬人，

其中70%左右合并有潰瘍性結(jié)腸炎遺傳背景：主要的易感基因與HLA

DR2、DR3、DR4

、DRw8、

DR8相關自身免疫性肝病相關自身抗體譜近年的調(diào)查結(jié)果抗體譜篩查的譜及在各個國家的診斷不斷增加醫(yī)生認識能力的提高環(huán)境因素的惡化自身免疫性肝病相關自身抗體譜AILD臨床診斷存在的困難AILD患者發(fā)病隱匿?重疊綜合征大量存在“金標準”

組織病理的局限性缺乏診斷特異性自身抗體對疾病的認識有限The

epidemiology

of

primary

biliary

cirrhosis.

Clin

Liver

Dis.

2003自身免疫性肝病相關自身抗體譜原發(fā)性硬化性膽管炎(Primary

sclerosing

cholangitis，PSC)自身免疫性肝病相關自身抗體譜原發(fā)性硬化性膽管炎,PSCPSC-病因不明的慢性綜合征特征-是肝外和/或肝內(nèi)膽管彌漫性炎癥、纖維化所引起的慢性膽汁淤積癥合并IBD、UC70%自身免疫性肝病相關自身抗體譜診斷影Text像學in診here斷pANCA80%ANA

SMA20%-50%自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗中性粒細胞胞漿抗體（pANCA）陽性主要靶抗原MPO、人白細胞彈性蛋白酶（HLE）、乳鐵蛋白（LF）、組織蛋白酶G（CG）、溶菌酶（LYS）、天青殺素（AZU）、α-烯醇化酶、β-葡萄糖醛酸酶、BPI自身免疫性肝病相關自身抗體譜自身免疫性肝炎Autoimmune

hepatitis，AIH自身免疫性肝病相關自身抗體譜自身免疫性肝炎AIHAIH:伴循環(huán)自身抗體和高免疫球蛋白血癥，病因未明，呈慢性炎性壞死的肝臟疾病Waldenstrom于1950年發(fā)現(xiàn)一種特殊類型的慢性肝炎

女性多見，伴有黃疸、丙種球蛋白明顯升高和閉經(jīng)后期常發(fā)展成肝硬化以往稱之為“狼瘡樣肝炎”（lupoid

hepatitis）：常伴有ANA及

SMA陽性，特別是部分病人可見LE細胞慢性進行性發(fā)展，病理變化呈慢性活動性肝炎改變，伴有自身免疫現(xiàn)象自身免疫性肝病相關自身抗體譜肝臟病理活檢肝內(nèi)膽小管顯示散在肝細胞壞死自身免疫性肝病相關自身抗體譜2010年AIH最新診斷指南Hepatology.

2010

Jun;51(6):2193-213自身免疫性肝病相關自身抗體譜AIH的自身抗體譜包括器官非特異性和器官（肝）特異性自身抗體：Ⅰ型AIH：即經(jīng)典的AIH

最常見，約占80%可檢出

ANA、ASMA

Ⅱ型AIH：少見，兒童多見僅抗-LKM

1陽性，而ANA及SMA均為陰性Ⅲ型AIH：僅見抗可溶性肝細胞漿抗原（SLA）自身抗體Ⅳ型AIH：自身抗體陰性

(~20%)自身免疫性肝病相關自身抗體譜AIH的自身抗體譜抗核抗體（ANA）抗組蛋白抗體

抗DNA抗體抗平滑肌抗體（SMA）抗肝-腎微粒體抗體（抗LKM1）

抗去唾液酸受體抗體（抗ASGPR）

抗可溶性肝抗原抗體（抗SLA）

抗肝細胞質(zhì)抗原I型（抗LC1）

抗肝膜抗原抗體（抗LMA抗體）

抗肝特異性蛋白抗體（抗LSP抗體）

抗膽管、膽小管抗體抗胃壁細胞抗體（PCA）抗線粒體抗體（AMA）：抗中性粒細胞胞漿抗體（pANCA）

抗板層素抗體（A/C）自身免疫性肝病相關自身抗體譜AIH中的抗核抗體（ANA）以抗組蛋白抗體、

抗DNA抗體多見—ANA均質(zhì)型自身免疫性肝病相關自身抗體譜AIH中的抗核抗體（ANA）AIH最常見的自身抗體之一，Ⅰ型AIH

75%陽性不具有診斷特異性ANA常與ASMA同時出現(xiàn)（85%-90%）靶抗原：以DNA（單鏈和雙鏈）和組蛋白（H3亞單位及核小體）為主抗單鏈DNA抗體在AIH中的陽性率為85%

抗雙鏈DNA抗體在AIH中的陽性率為34%自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗雙鏈DNA抗體常見于AIH與PBC的重疊征Am

J

Gastroenterol

2009自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗

平

滑

肌

抗

體

SMA自身免疫性肝病相關自身抗體譜與ARA鑒別自身免疫性肝病相關自身抗體譜SMA概況1965年Johnson等應用IIF法（底物：大鼠胃組

織），在慢性活動性肝炎（CAH

）中發(fā)現(xiàn)SMA無器官及種屬特異性，主要為IgG和IgM高滴度的SMA為I型AIH高敏感性自身抗體，但非AIH特異性自身抗體抗F-

actin抗體對I型AIH有重要診斷意義自身免疫性肝病相關自身抗體譜SMA的靶抗原靶抗原種類豐富，主要為多種細胞骨架成分,可分為肌動蛋白（actin）和非肌動蛋白兩大類Actin：單體/G及聚合體/F

微絲(mirofilaments)

抗F-actin（46KDa）F－actin與AIH關系密切G－actin與酒精性肝硬化有關

nonactin：

vimentin

結(jié)蛋白微管蛋白

原肌球蛋白肌球蛋白

肌鈣蛋白—與感染性疾病、系統(tǒng)性自身免疫性疾病等有關檢測方法：臨床常規(guī)檢測方法為IIF自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗平滑肌抗體（SMA）臨床意義見于多種肝臟疾病及非肝臟疾病，無診斷特異性對I型AIH診斷有重要意義高滴度SMA（1:160）診斷敏感性高達90％以F－肌動蛋白為靶抗原的SMA為AIH特異性抗體，在AIH中陽性率高達97％低滴度的靶抗原為非肌動蛋白的SMA（以IgM為主）可非特異性出現(xiàn)于多種疾病中（1:80）自身免疫性肝病相關自身抗體譜SMA疾病譜及靶抗原、抗體特點相關疾病靶抗原抗體種類抗體滴度AIHF-actinIgG為主高滴度AIH-PBC重疊癥

F-actinIgG和IgM為主高滴度酒精性肝硬化

G-actinIgM低滴度病毒性肝炎

vimentinIgM低滴度藥物性肝炎

troponinIgM低滴度SLE，RA，SS

vimentinIgM低滴度炎癥性腸病

vimentinIgM低滴度白塞氏綜合征

vimentinIgM低滴度心肌炎desminIgM低滴度傳染性單核細胞增多癥

tubulinIgM低滴度自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗F-actin抗體檢測

IB法－46KDaANA檢測HEp-2細胞底物－敏感性？

抗F-actin抗體ELISA試劑盒自身免疫性肝病相關自身抗體譜Actin自身免疫性肝病相關自身抗體譜TropomyosinVimentin自身免疫性肝病相關自身抗體譜Vinculin自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗肝/腎微粒體抗體（抗LKM1抗體）自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗肝/腎微粒體抗體（抗LKM1抗體）靶抗原：細胞色素P450IID6，為50KD蛋白主要為IgG1

型抗體檢測方法：篩選→

IIF

確認→ELISA、IB

臨床意義:

II型AIH血清特異性抗體HCV患者中約2-10%陽性

HCV感染的PBC中高達21.4%

檢測LKM-1抗體ELISA為主自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗LKM抗體與HCV感染的PBC相關Am

J

Gastroenterol.

2003

Dec;98(12):2757-62.自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗可溶性肝抗原抗體（抗SLA抗體）靶抗原：肝細胞角蛋白（cytokeratins）8，18谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶.分子量55

KD、45

KD，可能是肝細胞溶質(zhì)成分，肝臟、腎臟濃度最高檢測方法：IB、ELISA，IIF檢測效果不佳臨床意義：3型AIH的血清學標志（約11-25%），原因不明肝炎約14%13230n10814928403932181424自身免疫性肝炎,

巴西自身免疫性肝炎,

日本自身免疫性肝炎,

德國血清自身免疫性肝炎,

美國AIH

(競爭抑制性實驗陽性)AIH

(抗

LKM-1

抗體陽性)原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)乙型肝炎病毒感染丙型肝炎病毒感染肝中毒損傷非酒精性脂肪肝自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗SLA/LP抗體的陽性率抗

SLA/LP

抗體陽性23

(17.4%)2

(

6.7%)21

(19.4%)23

(15.4%)23

(82.1%)01

(

3.1%)0000健康的獻血者2000自身免疫性肝病相關自身抗體譜臨床中存在的問題抗SLA抗體的陽性率極低即使AIH患者中抗SLA抗體的陽性率也極低抗SLA抗體陽性的患者很多并不是AIH抗SLA陽性率？AIH患者抗SLA陽性率？

抗SLA陽性患者疾病分布？

抗SLA抗體的臨床意義？自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗SLA/LP抗體在中國AIH人群中陽性率低自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗SLA抗體檢測的臨床意義SLA總體陽性率(0.4%

)

M2(8%)

SLA

在中國人群AIH中的陽性率5%。

SLA對中國人群AIH的特異性極差抗SLA檢測在中國人群中的臨床意義較小49例SLA陽性患者疾病分布自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗SLA/LP抗體在亞洲人群中陽性率低Journal

of

Autoimmunity

21

(2003)

77–82自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗肝細胞胞漿抗原1型抗體（抗LC1抗體）自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗肝細胞胞漿抗原1型抗體（抗LC1抗體）抗原特征：為58-62KD的肝細胞胞液多肽蛋白，為肝臟特異性細胞溶質(zhì)，亞胺（代）甲基轉(zhuǎn)移酶－環(huán)化脫氨酶(1999)檢測方法：

IIF、ID、IB（62KD）等臨床意義：為2型AIH的血清特異性抗（56-72%），常與抗LKM-1抗體同時存在（73%），與疾病活動性具有相關性自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗去非唾液糖蛋白受體（抗ASGP-R抗體）抗原特征：位于肝細胞膜表面肝特異性蛋白成分一種跨膜蛋白，每個肝細胞膜表面大約有50萬個ASGP-R分子檢測方法：ELISA、RIA臨床意義：AIH（50-88%），但也見于慢性乙型和丙型肝炎，酒精性肝病，PBC等，陽性率10%左右。抗體與炎癥活動性密切相關，可用于療效觀察自身免疫性肝病相關自身抗體譜原發(fā)性膽汁性肝硬化(Primary

biliary

cirrhosis，PBC)自身免疫性肝病相關自身抗體譜研究概況

發(fā)病人數(shù)不斷增加1851描述環(huán)境因醫(yī)生認抗體篩素惡化識提高查普及遺傳因素作用明顯同卵雙生PBC共發(fā)率為60％（第二位）病因不清環(huán)境因素作用于具有遺傳易感性個體病原體感染和化學物質(zhì)等自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC發(fā)病機制通過分子模擬機制

，使機體免疫耐受瓦解產(chǎn)生針對正常肝臟細胞蛋白成分的自身抗體Minocycline-Induced

Autoimmune

Hepatitis

with

Subsequent

Cirrhosis.J

Pediatr

Gastroenterol

Nutr，2006.Primary

biliary

cirrhosis

in

monozygotic

and

dizygotic

twins:

genetics,

epigenetics,

and

environment.

Gastroenterology,

2004.自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC分期膽管炎期膽管增生期瘢痕期肝硬化期以往多采用LUDWIG

和

SCHEUER提出病理分期自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC分期－目前失代臨床償期亞臨期臨床前期6年發(fā)展為PBC床期無癥狀，但有肝功

能異?；颊?年內(nèi)5%

出

現(xiàn)癥狀，20年內(nèi)

95%出現(xiàn)癥狀，中

位生存年齡15年自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC診斷現(xiàn)狀

診斷仍不完美膽汁淤積性疾病在人群中的發(fā)生率非常高?37%現(xiàn)有的手段對于PBC的診治有很多局限性完全準確把PBC區(qū)分出來非常重要但又困難依靠病理、血清抗體檢查僅能診斷部分患者The

epidemiology

of

primary

biliary

cirrhosis.

Clin

Liver

Dis.

2003自身免疫性肝病相關自身抗體譜原發(fā)性膽汁性肝硬化的自身抗體譜AMA：M2M4M8M9抗GP210抗體抗SP100抗體抗板層素抗體目前在PBC患者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)60多種抗體自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC自身抗體非常復雜PBC患者中存在60多種自身抗體World

J

Gastroenterol,

2010.

16(29):

p.

3616-29.自身免疫性肝病相關自身抗體譜AMA是PBC最常用的抗體AMA的發(fā)現(xiàn)診斷里程碑1965年Walker應用IIF法發(fā)AMA是PBC診斷的里程碑現(xiàn)PBC血清中存在AMAPBC敏感性

>90%

AMA亞型AMA亞型的意義80年代后期研究:

AMA存在

若干亞型（M1—M9）PBC相關（M2、M4、M8、M9）

梅毒

(M1),

心血管病

(M7).藥物性紊亂：藥物性狼瘡

(M3)，異丙異煙肼

性肝炎(M6)M2并不是PBC特異性的抗體(SS,PM/DM,HCV)

有10-20％M2出現(xiàn)常規(guī)檢測中M2強陽性者僅1/3能診斷為PBC自身免疫性肝病相關自身抗體譜AMA在PBC中的意義AMA可在臨床癥狀出現(xiàn)前10年出現(xiàn)于PBC患者YouMetcalf等對M2陽性,無臨床表現(xiàn)的患者進行肝臟穿研究，93%患者提示或符合PBC，經(jīng)隨訪76%患者在兩年內(nèi)出現(xiàn)PBC臨床表現(xiàn)，發(fā)展成典型PBC患者Natural

history

of

early

primary

biliary

cirrhosis.

Lancet自身免疫性肝病相關自身抗體譜自身抗體可以在AID臨床發(fā)病前檢測到PBC患者任何臨床癥狀前10年可檢測到AMA自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗線粒體抗體（AMA）陽性自身免疫性肝病相關自身抗體譜AMA-M2靶抗原:線粒體呼吸鏈上2-酮酸脫氫酶(2-OADH)復合物5個不同的抗原決定簇76KD、56KD、51KD、45KD、

36KD,包括：支鏈2-酮酸脫氫酶E2亞基（BCOADH-E2）酮酸脫氫酶E2亞基（PDH-E2）2-酮戊二酸脫氫酶E2亞基（OGDH-E2）PDH-E1t亞基E3結(jié)合蛋白檢測方法：ELISA、IB臨床意義：PBC敏感的抗體，陽性率>90%，AMA滴度與PBC疾病分期無關CD8+

T

159–167B

167–186CD4+

T

163-176自身免疫性肝病相關自身抗體譜目前PBC患者AMA相關的研究進展AMA自身免疫性肝病相關自身抗體譜AMA陰性PBC臨床表現(xiàn)治療反應AMA陰性PBC？肝功能指標疾病過程肝臟病理現(xiàn)有檢測技術-AMA陰性PBC?自身免疫性肝病相關自身抗體譜Clin

Exp

Immunol

2004;135:154–158C

hip

Q

C自身免疫性肝病相關自身抗體譜12×4×25×32＝38400點97.6

%

of

the

proteins

detectableCorrelation

coefficient

of

(B

arcode:

2000114461)duplicate

spots:

0.978A

芯片實物照B芯片雜交圖全貌自身免疫性肝病相關自身抗體譜15M2+/6M2‐P<0.011

proteinsP<0.0544

proteinsM2？自身免疫性肝病相關自身抗體譜AMA并不特異SS,SLE,HCV,

10-20%

M2陽性AMA的產(chǎn)生并不是PBC特有PBC中的AMA不同于HCV和急性肝損傷自身免疫性肝病相關自身抗體譜發(fā)現(xiàn)臨床問題

病

例X某，女，36，08年7月感染HCV

ALF患者AMA陽性率40.3%自身免疫性肝病相關自身抗體譜急性肝功能損傷的患者存在高比例的AMAHEPATOLOGY,

Vol.

46,

No.

5,

2007自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC患者線粒體水平與治療無關Clin

Dev

Immunol

2004

Jun自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗Sp100抗體兩種核點（nuclear

dots,ND）型熒光染色模型：a

few

nuclear

dots：抗p80螺旋蛋白抗體multiple

nuclear

dots，MND：抗Sp100抗體抗Sp100抗體:靶抗原為53KD的可溶性酸性磷酸化核蛋白（Sp100）PBC特異性抗體PBC中陽性率為10-30%，其他肝病患者均為陰性對AMA陰性的PBC患者的診斷具有重要意義AMA陰性PBC中陽性率（50%）顯著高于AMA陽性者

（20%）該抗體可見于反復尿路感染的婦女自身免疫性肝病相關自身抗體譜HEp-2

細胞

/

靈長類肝臟:

核點型核少點核多點自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗Sp100抗體對PBC并不特異Hepatology.

1992

Jul;16(1):127-31.自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗Sp100抗體對PBC并不特異Scand

J

Gastroenterol

2003自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗Sp100抗體可見于反復尿路感染的婦女Dig

Liver

Dis

2003

Nov自身免疫性肝病相關自身抗體譜臨床問題病例趙某，女，37，2009年入院。臨床診斷PBC。自身免疫性肝病相關自身抗體譜臨床問題重新認識ASCA的臨床意義ASCA并不是IBD特異性自身抗體，在PBC患者有較高的陽性率，且以IgA亞型為主ASCA-IgA與PBC患者肝功能損傷指標和免疫活動指標改變有關。自身免疫性肝病相關自身抗體譜PBC患者與HIV自身免疫性肝病相關自身抗體譜Scand.

J.

Immunol.

36,

555-564,

1992自身免疫性肝病相關自身抗體譜核包膜蛋白自身抗體抗板層素抗體（

anti-lamin

antibody）anti

-lamin

A/C：（PBC

/AIH）CAHanti

-lamin

B：

SLE（2.2-8.5%）與APS相關抗核孔復合物抗體（anti-nuclear

pore

complex

antibody）抗Gp210抗體：診斷PBC特異性為88%，敏感性25%抗p62抗體：PBC高特異性自身抗體，敏感性為32%抗板層相關多肽（LAPs）抗體：10-30%伴anti

-lamin抗核板素受體（LBR）抗體：

PBC

（1%）自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗gp210抗體靶抗原：位于核孔復合物上的210KD跨膜糖蛋白

gp210羧基末端上的15個氨基酸殘基PBC特異性抗體（88

%

），敏感性為25%約1/4與AMA同時出現(xiàn)，也存在于20%~47%

AMA陰性

PBC中對于臨床、生化和組織學表現(xiàn)疑診PBC而AMA陰性的患

者，抗gp210抗體檢測有重要價值可作為PBC患者預后指標，抗體陽性提示預后不良自身免疫性肝病相關自身抗體譜抗板層素抗體抗原特征：核板是一中間絲狀結(jié)構(gòu)，與核內(nèi)膜的內(nèi)面連結(jié)，組成板層結(jié)構(gòu)的蛋白，分子量60KD、68KD、74

KD檢測方法：IIF、IB

、

ELISA臨床意義：多見于PBC、CHA（慢活肝）、慢性疲勞綜合征（c