流行性乙型腦炎病毒黃病毒科黃病毒屬病毒01病毒簡介致病性微生物學(xué)診斷生物學(xué)性狀免疫性特異防治目錄030502040607防治原則各地情況監(jiān)測目錄0908基本信息流行性乙型腦炎病毒簡稱乙腦病毒。流行性乙型腦炎的病原體。呈球狀，核酸為單鏈RNA，外層具包膜，包膜表面有血凝素。低溫條件下，能自下而上較長時(shí)間，在動(dòng)物、雞胚及組織培養(yǎng)細(xì)胞中均能增殖。幼豬是乙腦病毒的主要傳染源和中間宿主，蚊子是乙腦病毒的傳播媒介。當(dāng)人受帶病毒的蚊子叮咬后，乙腦病毒進(jìn)入人體，在血管內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴結(jié)、肝、脾等吞噬細(xì)胞內(nèi)增殖，并經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)腦部而引起炎癥。病毒簡介病毒簡介流行性乙型腦炎病毒簡稱乙腦病毒，屬于蟲媒病毒黃病毒科黃病毒屬。主要癥狀為高熱、頭痛、嘔吐、昏睡、痙攣等。重癥者可周身高燒、抽痙不止、腦水腫、呼吸或循環(huán)衰竭而死亡，部分患者留有后遺癥。消滅蚊子孳生地，并撲滅越冬蚊和新生成蚊是預(yù)防乙腦的關(guān)鍵。豬是乙腦病毒的主要中間宿主和傳染源，在乙腦流行季節(jié)前，應(yīng)對豬進(jìn)行預(yù)防注射，可有效地降低乙腦發(fā)病率。人體接種疫苗可提高對乙腦病毒感染的抵抗力，對預(yù)防乙腦也有良好效果。乙腦尚無特效治療方法。早期住院對癥治療，可以大大提高治愈率，減少后遺癥。1935日本學(xué)者首先從因腦炎死亡病人的腦組織中分離到該病毒，故國際上又稱日本腦炎病毒（Japaneseencephalitisvirus,JEV）

，所致疾病在日本稱日本乙型腦炎（JVE）。1950年以來，中國對該病進(jìn)行了大量病原學(xué)和流行病學(xué)研究，為了與甲型腦炎相區(qū)別，定名為流行性乙型腦炎，簡稱乙腦，是中國夏秋季流行的主要傳染病之一，除新疆、西藏、青海外，全國各地均有病例發(fā)生，年發(fā)病人數(shù)2.5萬，病死率10%，大約15%的患者留有不同程度的后遺癥。生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀形態(tài)與結(jié)構(gòu)乙腦病毒為球形，直徑50nm

，內(nèi)有衣殼蛋白（C）與核酸構(gòu)成的核心，外披以含脂質(zhì)的囊膜，表面有囊膜糖蛋白（E）刺突，即病毒血凝素，囊膜內(nèi)尚有內(nèi)膜蛋白（M），參與病毒的裝配。病毒基因組為單股正鏈RNA，全長11kb，自5′至3′端依次編碼結(jié)構(gòu)蛋白C、M、E以及非結(jié)構(gòu)蛋白NS1—NS5，病毒RNA在細(xì)胞漿內(nèi)直接起mRNA作用，翻譯出結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，在胞漿粗面內(nèi)質(zhì)裝配成熟，出芽釋放。敏感動(dòng)物與細(xì)胞乳鼠是常用的敏感動(dòng)物，腦內(nèi)接種乙腦病毒后3～4天發(fā)病，一周左右死亡，腦組織內(nèi)含大量感染性病毒，是分離病毒、大量制備抗原的可靠方法。BHK細(xì)胞系、C6/36細(xì)胞系及雞胚成纖維細(xì)胞是常用的敏感細(xì)胞，病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞圓縮、顆粒增多、細(xì)胞脫落等CPE。在培養(yǎng)上清中含有傳染性病毒，胞漿內(nèi)胞膜上可檢出特異性抗原。細(xì)胞培養(yǎng)增殖病毒簡便易行，已取代動(dòng)物培養(yǎng)用物制備疫苗、診斷抗原，以及研究病毒復(fù)制機(jī)理、篩選抗病毒藥物等?？乖匦砸夷X病毒抗原性穩(wěn)定，在同一地區(qū)不同年代分離的毒株之間未發(fā)現(xiàn)明顯的抗原變異。致病性致病性流行性乙型腦炎病毒感染的自然循環(huán)中國乙腦病毒的傳播媒介主要為三帶喙庫蚊。蚊感染病毒后，中腸細(xì)胞為最初復(fù)制部位，經(jīng)病毒血癥侵犯唾液腺和神經(jīng)組織，并再次復(fù)制，終身帶毒并可經(jīng)卵傳代，成為傳播媒介和貯存宿主。在熱帶和亞熱帶，蚊終年存在，蚊和動(dòng)物宿主之間構(gòu)成病毒持久循環(huán)。在溫帶，鳥類是自然界中的重要貯存宿主。病毒每年或通過候鳥的遷棲而傳入，或病毒在流行區(qū)存活過冬。有關(guān)病毒越冬的方式可為：①越冬蚊再感染鳥類，建立新的鳥—蚊—鳥循環(huán)；②病毒可在鳥、哺乳動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物體潛伏越冬。實(shí)驗(yàn)表明，自然界中蚊與蝙蝠息息相關(guān)，蚊將乙腦病毒傳給蝙蝠，受染蝙蝠在10℃，不產(chǎn)生病毒血癥，可持續(xù)存在達(dá)3個(gè)月之外，當(dāng)蝙蝠返回室溫環(huán)境3天后，出現(xiàn)病毒血癥，構(gòu)成蚊—蝙蝠—蚊的循環(huán)；③冷血脊椎動(dòng)物為冬季貯存宿主（如蛇、蛙、蜥蜴等），可分離出病毒。家畜和家禽在流行季節(jié)感染乙腦病毒，一般為隱性感染，但病毒在其體內(nèi)可增殖，侵入血流，引起短暫的病毒血癥，成為乙腦病毒的暫時(shí)貯存宿主，經(jīng)蚊叮咬反復(fù)傳播，成為人類的傳染源。特別是當(dāng)年生仔豬最為重要，對乙腦病毒易感，構(gòu)成豬—蚊—豬的傳播環(huán)節(jié)，故在人群流行前檢查豬的病毒血癥和蚊帶毒率，可預(yù)測當(dāng)年人群的流行程度，并通過豬的免疫預(yù)防，可控制本病在豬及人群中的流行。當(dāng)帶毒雌蚊叮咬人時(shí)，病毒隨蚊蟲唾液傳入人體皮下。先在毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及局部淋巴結(jié)等處的細(xì)胞中增殖，隨后有少量病毒進(jìn)入血流成為短暫的第一次病毒血癥，此時(shí)病毒隨血循環(huán)散布到肝、脾等處的細(xì)胞中繼續(xù)增殖，一般不出現(xiàn)明顯癥狀或只發(fā)生輕微的前驅(qū)癥狀。免疫性免疫性人受乙腦病毒感染后，大多數(shù)為隱性感染及部分頓挫感染，僅少數(shù)發(fā)生腦炎（0.01%），這與病毒的毒力，侵入機(jī)體內(nèi)數(shù)量及感染者的免疫力有關(guān)。流行區(qū)成人大多數(shù)都有一定免疫力，多為隱性感染，10歲以下兒童及非流行區(qū)成人缺乏免疫力，感染后容易發(fā)病。本病病后4～5天可出現(xiàn)血凝抑制抗體，2～4周達(dá)高峰，可維持一年左右。補(bǔ)體給合抗體在發(fā)病2～3周后方可檢出，約存在半年。中和抗體約在病后1周出現(xiàn)，于5年內(nèi)維持高水平，甚至維持終生。流行區(qū)人群每年不斷受到帶病毒的蚊叮咬，逐漸增強(qiáng)免疫力，抗體陽性率常隨年齡而增高，例如北京市20歲以上成年人90%血清中含有中和抗體。因此本病多見于10歲以下的兒童，但近些年來乙腦發(fā)病年齡有增高趨勢，值得重視。微生物學(xué)診斷微生物學(xué)診斷乙腦早期快速診斷通常采集性期患者血清或腦脊液特異性lgM，也可做RT—PCR檢測標(biāo)本中的病毒核酸片段，一般6個(gè)小時(shí)內(nèi)可初步報(bào)告結(jié)果。常規(guī)血清學(xué)試驗(yàn)，（H1、CF、NT）需取雙份血清，同時(shí)做對比試驗(yàn)，當(dāng)恢復(fù)期血清抗體滴度比急性期≥4倍時(shí)，有輔助診斷意義，可用于臨床回顧性診斷。由于乙腦患者病毒血癥期短，直接檢出病毒抗原或分離病毒陽性率低，較少用于診斷試驗(yàn)。特異性lgM檢測乙腦病毒感染發(fā)病早期即產(chǎn)生特異性lgM，病后2～3周達(dá)到高峰，故單份血清可做出早期診斷?？墒褂茫孩賚gM捕捉ELISA法（見23章）；②2ME—NI法，血凝抑制抗體存在于lgM及l(fā)gG中，將早期單份血清分成二份，一份用2巰基乙醇（2ME）處理，以破壞lgM，另一份不處理，然后同時(shí)做HI試驗(yàn)，若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍，則為lgM陽性；③微量間接免疫熒光法，用熒光素標(biāo)記的抗u鏈血清，檢測已與細(xì)胞抗原片結(jié)合的lgM，根據(jù)特異性熒光顆粒，判斷血清標(biāo)本中的lgM存在。常規(guī)血清學(xué)試驗(yàn)乙腦的臨床癥狀與病毒相應(yīng)抗體的關(guān)系1.血凝抑制試驗(yàn)對乙腦診斷而言，本法特異性較低，但敏感性高，簡便易行。常用于病毒的初步鑒定，確定有無乙腦病毒存在。檢測血清標(biāo)本中的HI抗體，多采用2ME—HI法。2.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合抗體僅存在于lgG中，病后出現(xiàn)遲，消失快，適用于診斷感染。特異防治特異治療特異預(yù)防特異防治特異預(yù)防現(xiàn)用的乙腦滅活疫苗是用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)增殖，甲醛滅活制成，初次免疫時(shí)，皮下注射2～3次，間隔7-10天，以后每年加強(qiáng)注射一次，免疫力維持半年左右，保護(hù)率達(dá)66-90%。中國已篩選出乙腦病毒減毒株，用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)制成減毒活疫苗，只需皮下注射一次，安全有效，正作現(xiàn)場觀察。疫苗接種對象是10歲以下兒童和來自非疫區(qū)的軍民。流行區(qū)飼養(yǎng)的仔豬接種乙腦疫苗，以杜絕傳染來源，也可使豬健康成長。防蚊滅蚊是預(yù)防本病的有效措施。特異治療乙腦治療仍采用對癥處理及支持療法，有報(bào)道用病毒唑、干擾素、恢復(fù)期血清等治療，可能減輕病勢，但已出現(xiàn)腦炎癥狀者，則無治療效果。中國采用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，制備出高中和活性乙腦單克隆抗體，經(jīng)系統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)治療證明安全有效，95年經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)進(jìn)入Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)，是一種特異免疫治療制劑。防治原則防治原則防蚊、滅蚊和易感人群的預(yù)防接種是預(yù)防本病的關(guān)鍵。尚無有效的藥物可以治療流行性乙型腦炎。防蚊、滅蚊和動(dòng)物接種通過清除蚊蟲孳生場所，開展宣傳教育，改善環(huán)境衛(wèi)生條件等方式控制蚊蟲等傳播媒介的數(shù)量。由于流行性乙型腦炎病毒的傳播主要是在蚊—豬循環(huán)中進(jìn)行，人是偶發(fā)感染宿主。所以在流行季節(jié)前，通過提前對豬等家畜進(jìn)行疫苗接種，中止病毒的自然傳播循環(huán)，可有效降低人群的發(fā)病率。預(yù)防接種中國主要使用由地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)制備的流行性乙型腦炎病毒P3株滅活疫苗。通常在病毒感染開始流行前1個(gè)月進(jìn)行疫苗接種，重點(diǎn)接種對象是10歲以下兒童和來自非流行區(qū)的易感人群；主要采用皮下注射2次（間隔7～10天），次年加強(qiáng)注射1次的方式進(jìn)行；預(yù)防接種后人群保護(hù)率可以達(dá)到76%～90%。但是，由于死疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體的持續(xù)時(shí)間短、需要多次接種等缺點(diǎn)，減毒活疫苗的研究受到重視。主要根據(jù)病毒吸附和形成蝕斑能力的差異來選育有效的減毒活疫苗，中國已經(jīng)選育出的SA14-14-2和SA14-2-8株減毒活疫苗，對易感人群以及豬和馬等家畜進(jìn)行免疫接種后的抗體陽性率可達(dá)到90%以上，并且抗體產(chǎn)生的持續(xù)時(shí)間較長。監(jiān)測監(jiān)測乙腦的流行規(guī)律尚不十分清楚，因此尚無理想的監(jiān)測方法。下面介紹幾種監(jiān)測方法提供參考（一）媒介蚊的強(qiáng)度和出現(xiàn)早晚：定期、定地點(diǎn)、定時(shí)間、定量捕捉蚊子，特別是定地點(diǎn)最好在牲畜棚（特別是豬圈）內(nèi)，定時(shí)間最好是黃昏7-8點(diǎn)蚊子吸血高峰時(shí)，觀察三帶喙庫蚊的出現(xiàn)時(shí)間及其在蚊中所占比例。（二）豬抗體的監(jiān)測：豬群抗體陽性率調(diào)查及豬抗體50%陽轉(zhuǎn)日出現(xiàn)時(shí)間（提前或后延）在一定程度上反映三帶喙庫蚊的強(qiáng)度和出現(xiàn)早晚。查豬抗體時(shí)要注意母體抗體或既往感染對結(jié)果的影響，最好是4-5月齡的仔豬，其母體抗體已消失，用這樣的豬觀察抗體比較可靠。（三）人群抗體水平的監(jiān)測：有人報(bào)道隱性感染高的地區(qū)，人群血凝抑制抗體陽性率達(dá)78%，乙腦的發(fā)病率就低，僅為2.6/10萬；而隱性感染低的地區(qū)，血凝抑制抗體陽性率僅為10%，則乙腦的發(fā)病率高達(dá)38.3/10萬。（四）氣象因素：特別是氣溫和雨量很重要，氣溫高不僅有利于蚊蟲的孳生，而且能提高病毒在蚊體內(nèi)的毒力和數(shù)量。晴天和雨天交替最有