尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展第一章

干化學(xué)檢測尿液

有形成分質(zhì)控

2尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展檢測化學(xué)項(xiàng)目多、速度快；檢測是紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的化學(xué)成分；質(zhì)控物為化學(xué)物質(zhì)，不是真實(shí)形態(tài)學(xué)成分；現(xiàn)狀3尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展干化學(xué)的問題特異性不夠好；干擾物質(zhì)的影響不能質(zhì)控；許多有形成分不能檢測；本底干擾檢測結(jié)果：本底+尿液顏色干擾；尿液漏滴造成漏檢；干化學(xué)方法自身不能證實(shí)檢測的真實(shí)性；不符合ISO15189；只能是過篩檢測；問題4尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展例：干化學(xué)對白細(xì)胞檢測的局限性檢測粒細(xì)胞的酯酶淋巴細(xì)胞不能檢測干擾物質(zhì)：慶大、先鋒、甲醛、膽紅質(zhì)等5尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展對策鏡檢證實(shí)和檢測不能檢測的有形成分；使用特異性檢測方法檢測化學(xué)成分；改進(jìn)方法，減少本底干擾和漏檢；6尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展第二章

有形成分檢測儀器的質(zhì)控

7尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展有形成分檢測儀器技術(shù)不同質(zhì)控不同流式：質(zhì)控物為特制顆粒物；機(jī)器視覺技術(shù)：紅細(xì)胞沒有質(zhì)控物的儀器現(xiàn)狀8尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展

第一節(jié)

流式技術(shù)儀器

9尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展質(zhì)控依據(jù)是血液分析質(zhì)控物為特制顆粒，不是尿液有形成分，為替代品，與實(shí)際檢測無系統(tǒng)屬性；干擾物影響無法質(zhì)控和檢測；檢測錯(cuò)誤時(shí)檢測者無法獲悉；分類計(jì)數(shù)無意義；實(shí)際意義是質(zhì)控計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性；質(zhì)控依據(jù)和問題流式10尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展特制顆粒質(zhì)控物，實(shí)際檢測無系統(tǒng)屬性流式11尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展無法質(zhì)控干擾錯(cuò)誤結(jié)晶、酵母菌誤識別為紅細(xì)胞流式標(biāo)記物紅細(xì)胞儀器不能審核真菌結(jié)晶12尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展檢測錯(cuò)誤時(shí)儀器無法知道流式13尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展優(yōu)勢和不足優(yōu)勢：

1、流式+圖像：實(shí)現(xiàn)儀器檢測驗(yàn)證功能；2、圖像更直觀、可信；不足1、因?yàn)榕牟坏角逦鷪D片，所有圖像按相似性處理獲得，由儀器內(nèi)圖庫提供單一成分的圖片；2、拍不到清晰圖片，識別極易出錯(cuò)，驗(yàn)證功能打折扣；3、驗(yàn)證錯(cuò)誤導(dǎo)致提供圖片錯(cuò)誤，結(jié)果不正確；結(jié)論仍然不能代替鏡檢數(shù)字圖像流式14尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展（CLSI原NCCLS)尿液分析操作指南（第三版）GP16-A3(2009)15尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展Number4GP16-A3

24?ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Allrightsreserved.

10.1.2UrineParticleAnalyzers64-68Automatedurineanalyzersusevarioustechnologiestoclassifyandenumerateparticlesinurine.Dependingontheinstrument,thetechnologiesincorporatedcanincludeimpedance,

digitalimagingflowcytometry,

flowcytometry,

lightscatter,dyes,fluorescence,orsomecombinationthereof.Particleswithlikecharacteristicsarethengroupedandclassified.TheelementsthataretypicallyidentifiedincludeRBC,WBC,epithelialcells(squamousandnonsquamous),casts(benignandpathologic),bacteria,sperm,mucus,crystals,andsmallroundcells.Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,arethenreviewedmicroscopicallybyatechnologist.Negativesamplesmayobviatetheneedformanualmicroscopy.16尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展國際標(biāo)準(zhǔn)（GP16-A32009年）給出的解決對策1、數(shù)字圖像流式細(xì)胞儀、流式細(xì)胞儀等標(biāo)本不論是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)為或儀器檢測異常時(shí)（Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,）必須用人工鏡檢方法重新檢測確認(rèn)。2、陰性結(jié)果可以免除鏡檢確認(rèn)。17尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展國際標(biāo)準(zhǔn)的參考文獻(xiàn)64DelangheJ.Newscreeningdiagnostictechniquesinurinalysis.ActaClinBelg.2007;62:155-161.65OttigerC,HuberAR.Quantitativeurineparticleanalysis:integrativeapproachfortheoptimalcombinationofautomationwithUF-100andmicroscopicreviewwithKOVAcellchamber.ClinChem.2003;49:617-623.66DelangheJR,KouriTT,HuberAR,etal.Theroleofautomatedurineparticleflowcytometryinclinicalpractice.ClinChimActa.2000;301:1-18.67RoggemanS,ZamanZ.Safelyreducingmanualurinemicroscopyanalysesbycombiningurineflowcytometerandstripresults.AmJClinPathol.2001;116:872-878.68ShayanfarN,ToblerU,vonEckardsteinA,BestmannL.Automatedurinalysis:firstexperiencesandacomparisonbetweentheIrisiQ200urinemicroscopysystem,theSysmexUF-100flowcytometerandmanualmicroscopicparticlecounting.ClinChemLabMed.2007;45:1251-1256.18尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展

第二節(jié)

機(jī)器視覺技術(shù)儀器

19尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展質(zhì)控依據(jù)機(jī)器視覺方法學(xué)：顯微鏡鏡檢與人工顯微鏡鏡檢區(qū)別：操作自動化前期儀器能智能識別計(jì)數(shù)尿液有形成分國際標(biāo)準(zhǔn)：ISLH

RecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)20尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展ISLH主要內(nèi)容1、不離心尿液直接檢測，計(jì)數(shù)池體積達(dá)到6.4ul2、低倍鏡

觀察計(jì)數(shù)大型有形成分（上皮細(xì)胞、管型）；高倍鏡

觀察計(jì)數(shù)小型有形成分（細(xì)胞、真菌、結(jié)晶等）3、結(jié)果以“個(gè)/ul”報(bào)告。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)精度

低倍：（管型和上皮）至少計(jì)數(shù)50個(gè)

CV<14%；

高倍：（紅、白細(xì)胞等）至少計(jì)數(shù)200個(gè)，

CV<7%；21尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展一、標(biāo)準(zhǔn)鏡檢參考方法的檢測特點(diǎn)不離心尿液直接鏡檢改變離心尿液沉渣鏡檢檢測體積：最大體積6.4ul(不是1ul)

目的：提高靈敏度，確保檢測準(zhǔn)確性

原因：不離心尿液直接鏡檢極易漏檢報(bào)告：個(gè)/ul22尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展機(jī)器視覺技術(shù)采取的方法檢測：不離心尿液直接檢測檢測體積：大于6.4ul（通過低倍鏡大面積掃描定位。高倍鏡跟蹤識別而實(shí)現(xiàn)）實(shí)現(xiàn)：低濃度不漏檢靈敏度達(dá)到：1個(gè)細(xì)胞/ul檢測報(bào)告：個(gè)/ul23尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展采用兩個(gè)鏡頭：高倍鏡和低倍鏡檢測方式完全按照顯微鏡鏡檢方法機(jī)器視覺技術(shù)采取的方法25尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展儀器工作流程

完全參照人工鏡檢標(biāo)準(zhǔn)參考方法進(jìn)樣充池低倍過篩（視野數(shù)可設(shè)置）低倍定位分類計(jì)數(shù)（管型、上皮）高倍識別分類計(jì)數(shù)報(bào)告清洗陰性陽性人工輔判26尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展統(tǒng)計(jì)學(xué)精度低倍：（管型和上皮）至少計(jì)數(shù)50個(gè)CV<14%；高倍：（紅、白細(xì)胞等）至少計(jì)數(shù)200個(gè)，

CV<7%；這是在有形成分濃度不低時(shí)候的理想統(tǒng)計(jì)學(xué)精度三、標(biāo)準(zhǔn)鏡檢參考方法的理想精密度27尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展通過低倍鏡：大面積掃描定位。高倍鏡：跟蹤識別而實(shí)現(xiàn)

上海檢驗(yàn)中心檢測認(rèn)證：CV為4%臨界濃度：分布不均勻，檢測體積過大；機(jī)器視覺技術(shù)采取的方法28尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展機(jī)器視覺目前質(zhì)控的不足：質(zhì)控物只有單一紅細(xì)胞；其他有形成分暫時(shí)沒有質(zhì)控商品，期待；所有的有形成分智能分類計(jì)數(shù)水平有提升空間，在此期間人工審核不能少；標(biāo)準(zhǔn)圖庫建立和指導(dǎo)意義大，需要增加和加強(qiáng)；實(shí)際意義：質(zhì)控計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性；分類計(jì)數(shù)在人工審核后才具有意義；29尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展第三節(jié)

數(shù)字圖像自動化儀器

如何達(dá)到人工鏡檢標(biāo)準(zhǔn)

30尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展自動化數(shù)字圖像儀器=人工鏡檢條件是否符合ISLH（2003年）的國際標(biāo)準(zhǔn)條件；是否是使用的具有高、低倍鏡的顯微鏡;拍攝圖像是否是真實(shí)顯微鏡下的實(shí)景？圖像經(jīng)過處理否？檢測靈敏度能否達(dá)到:3-10個(gè)細(xì)胞/ul;結(jié)果有人工審核；審核人員專業(yè)知識、經(jīng)驗(yàn)、能力、責(zé)任心；31尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展儀器技術(shù)原因：主要是檢測靈敏度達(dá)不到要求，不能質(zhì)控；識別能力不理想，無法質(zhì)控；單鏡頭的局限性，雖有圖像，小的看不清，全局面不夠；檢測體積達(dá)不到國際標(biāo)準(zhǔn)要求，精確度較差；問題無質(zhì)控品的儀器32尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展第四節(jié)

如何能是尿液檢測標(biāo)準(zhǔn)和正確

33尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展如何能是尿液檢測標(biāo)準(zhǔn)和正確按國際標(biāo)準(zhǔn)文件ISLH（2003）和GP16-A3執(zhí)行，不折扣；尿液檢驗(yàn)必須包括：理想、化學(xué)和鏡檢；任何儀器檢測結(jié)果必須與人工鏡檢相符合；總原則34尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控進(jìn)展非形態(tài)學(xué)自動化儀器檢測的陽性結(jié)果必須鏡檢復(fù)檢（按GP16-A3）；非形態(tài)學(xué)自動化儀器干擾成分必須鏡檢區(qū)分；自動化儀器靈敏度必須達(dá)到：3-10個(gè)細(xì)胞/ul干化學(xué)和流式結(jié)合再次過篩不科學(xué)；如何能是尿液檢測標(biāo)準(zhǔn)和正確流式35尿液