仿制藥分析方法的驗(yàn)證和藥品穩(wěn)定性的研究譚海松PhDNov27,2011仿制藥分析方法的驗(yàn)證和藥品穩(wěn)定性的研究譚海松PhD主要內(nèi)容仿制藥的GMP要求仿制藥分析方法的驗(yàn)證仿制藥穩(wěn)定性的研究主要內(nèi)容仿制藥的GMP要求FDA官員來制藥公司檢查時(shí)的留言我們并不期望在檢查過程中所有事情都是完美無缺的,但是我們的確希望所檢查到的東西全在你們的有效控制之中.FDA官員來制藥公司檢查時(shí)的留言我們并不期望在檢查過程中所有藥檢局對(duì)仿制藥的要求仿制藥品系指仿制國家已批準(zhǔn)正式生產(chǎn)并收載于國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的品種.仿制藥與被仿制藥應(yīng)具有相同的劑型,劑量,質(zhì)量,用途,用法,效果和安全度.藥檢局對(duì)仿制藥的要求仿制藥品系指仿制國家已批準(zhǔn)正式生產(chǎn)并收載仿制藥的質(zhì)量控制藥品測(cè)試分析方法分析方法驗(yàn)證科學(xué)性(理論正確)藥品質(zhì)量可靠性(避免人為和儀器誤差)準(zhǔn)確性(正確反映真實(shí)值)仿制藥的質(zhì)量控制藥品測(cè)試分析方法分析方法驗(yàn)證科學(xué)性藥品質(zhì)量可分析方法驗(yàn)證的前提:GMP標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物和試劑儀器操作人員分析方法驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序

(SOP)實(shí)驗(yàn)室……分析方法驗(yàn)證的前提:GMP標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物和試劑儀器操作人員分析方標(biāo)準(zhǔn)物和試劑的SOP要求包裝上注明生產(chǎn)廠家,批號(hào)和有效期如生產(chǎn)廠家沒有提供有效期,SOP要規(guī)定有效期實(shí)驗(yàn)記錄要有所用到的標(biāo)準(zhǔn)物和試劑的生產(chǎn)廠家,批號(hào)和有效期標(biāo)準(zhǔn)物和試劑的SOP要求包裝上注明生產(chǎn)廠家,批號(hào)和有效期分析儀器的SOP要求所有分析儀器都要有使用記錄分析儀器在使用前要用標(biāo)準(zhǔn)物校準(zhǔn)分析儀器每半年進(jìn)行一次儀器校準(zhǔn)分析儀器的SOP要求所有分析儀器都要有使用記錄HPLC在使用前用標(biāo)準(zhǔn)物校準(zhǔn)舉例溶劑空白定量限或分離效率檢查標(biāo)準(zhǔn)物溶液-1(注射3次)標(biāo)準(zhǔn)物溶液-2(注射3次)樣品溶液(每隔10個(gè)樣品注射標(biāo)準(zhǔn)物溶液-1,2)

. .標(biāo)準(zhǔn)物溶液-1標(biāo)準(zhǔn)物溶液-2定量限或分離效率檢查溶劑空白HPLC在使用前用標(biāo)準(zhǔn)物校準(zhǔn)舉例溶劑空白實(shí)驗(yàn)室的SOP要求所有儀器都要有校準(zhǔn)日期或相應(yīng)的注釋所有樣品和溶液都要有批號(hào),有效期和來源實(shí)驗(yàn)室中的工作人員要有必要的安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室要保持整潔實(shí)驗(yàn)室的SOP要求所有儀器都要有校準(zhǔn)日期或相應(yīng)的注釋工作人員的SOP要求每個(gè)工作人員都要有相關(guān)SOP的培訓(xùn)記錄工作人員每年至少參加一次GMP培訓(xùn)工作人員的SOP要求每個(gè)工作人員都要有相關(guān)SOP的培訓(xùn)記錄主要內(nèi)容仿制藥的GMP要求仿制藥分析方法的驗(yàn)證仿制藥穩(wěn)定性的研究主要內(nèi)容仿制藥的GMP要求仿制藥的研發(fā)過程找到原料藥穩(wěn)定性的研究專利保護(hù)將失效或?qū)＠魬?zhàn)生物等效性臨床試驗(yàn)簡化新藥(ANDA)申請(qǐng)分析方法的研究和驗(yàn)證配方和生產(chǎn)工藝的研究

仿制藥的研發(fā)過程找到原料藥穩(wěn)定性的研究專利保護(hù)將失效或?qū)＠舫善匪幤治鰳悠返闹苽鋵?shí)例把10片藥品放于500毫升容量瓶中,加入400毫升溶劑,以200rpm搖30分鐘,然后加入溶劑到刻度.搖勻后,以8,000rpm高速離心10分鐘,取上清液用高壓液相色譜(HPLC)進(jìn)行分析.分析方法的驗(yàn)證API全部溶于溶劑HPLC正確分析出樣品溶液的濃度分析結(jié)果的可靠性成品藥片分析樣品的制備實(shí)例把10片藥品放于500毫升容量瓶中分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容API全部溶于溶劑 準(zhǔn)確度,精密度正確分析出樣品溶液的濃度 專屬性,線性,范圍,檢測(cè)限,定量限分析結(jié)果可靠性

耐用性,精密度分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容API全部溶于溶劑分析方法驗(yàn)證內(nèi)容專屬性線性準(zhǔn)確度精密度范圍檢測(cè)限,定量限耐用性樣品溶液穩(wěn)定性分析方法驗(yàn)證內(nèi)容專屬性分析方法驗(yàn)證-專屬性專屬性的定義

在其它成分可能存在下,分析方法能夠正確檢測(cè)出被分析物的特性.專屬性的測(cè)定舉例:高壓液相色譜分析方法驗(yàn)證-專屬性專屬性的定義高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的容量因子:1<k<20色譜峰分辨率:R>=1.5色譜峰的拖尾系數(shù):T<2.0主要成分色譜峰純度:>=99.9%(LC/MS,DAD,UV)高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的容量因子:1<k<20高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的容量因子:k=t/tM-1色譜峰分辨率:R=2(t2-t1)/(W1+W2)高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的容量因子:k=t/tM-1高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的拖尾系數(shù):T=W0.05/(2f)高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的拖尾系數(shù):T=W0.05/高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰分辨率:2.0色譜峰的拖尾系數(shù):1.0高壓液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰分辨率:2.0分析方法驗(yàn)證-線性線性的定義

在測(cè)定范圍內(nèi),檢測(cè)結(jié)果與被分析物濃度呈線性關(guān)系的程度.線性的測(cè)定 在被分析物濃度20%-150%內(nèi),至少測(cè)5個(gè)濃度.例如20%,80%,100%,120%,150%

最小二乘法線性回歸,R>=0.999分析方法驗(yàn)證-線性線性的定義線性舉例-HPLC線性舉例-HPLC線性舉例-HPLC線性舉例-HPLC分析方法驗(yàn)證-準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度的定義

測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值之間的接近程度.向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行回收率測(cè)定來驗(yàn)證.

準(zhǔn)確度的測(cè)定 在3個(gè)濃度(80%,100%,120%)中,每個(gè)濃度制備3個(gè)樣品.每個(gè)濃度3個(gè)樣品的平均回收率必須在98-102%.分析方法驗(yàn)證-準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度的定義分析方法驗(yàn)證-精密度精密度的定義

同一樣品多次取樣測(cè)試結(jié)果的接近程度

精密度的測(cè)定:%RSD<=2%(6個(gè)樣品) 重復(fù)性:同一分析人所得結(jié)果的精密度 中間精密度:同一實(shí)驗(yàn)室,不同的日期,設(shè)備和人員所得結(jié)果的精密度 重現(xiàn)性:不同實(shí)驗(yàn)室,不同人員所得結(jié)果的精密度分析方法驗(yàn)證-精密度精密度的定義分析方法驗(yàn)證-范圍范圍的定義

分析藥品達(dá)到一定準(zhǔn)確度,精密度和線性的區(qū)間.范圍的要求 含量測(cè)定:80-120%

含量均勻度測(cè)定:70-130% 溶出度:50-150%

雜質(zhì)測(cè)定:規(guī)定限度±20%分析方法驗(yàn)證-范圍范圍的定義分析方法驗(yàn)證-檢測(cè)限和定量限

檢測(cè)限:試樣中被分析物能被檢測(cè)到的最低量,一般定義為信噪比大于3:1定量限:試樣中被分析物能被定量測(cè)定的最低量,一般定義為信噪比大于10:1

分析方法驗(yàn)證-檢測(cè)限和定量限檢測(cè)限:試樣中被分析物能被檢檢測(cè)限和定量限信噪比的測(cè)量檢測(cè)限和定量限信噪比的測(cè)量分析方法驗(yàn)證-耐用性

耐用性的定義

測(cè)定條件發(fā)生小的變動(dòng)時(shí),測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度

耐用性測(cè)定的舉例:高壓液相色譜 流動(dòng)相:組成,pH值,流速的變動(dòng)

色譜柱:廠家,批號(hào),柱溫的變動(dòng)

分析方法驗(yàn)證-耐用性耐用性的定義分析方法驗(yàn)證-樣品溶液穩(wěn)定性

樣品溶液穩(wěn)定性的定義

樣品溶液在一定儲(chǔ)藏條件下可被重復(fù)使用的時(shí)間樣品溶液穩(wěn)定性的測(cè)定 樣品溶液穩(wěn)定性測(cè)定結(jié)果是初始結(jié)果98.5-101.5%.

分析方法驗(yàn)證-樣品溶液穩(wěn)定性樣品溶液穩(wěn)定性的定義仿制藥分析方法的來源中國藥典美國藥典（USP）歐洲藥典（EP）日本藥典（JP）原料藥廠家文獻(xiàn)仿制藥分析方法的來源中國藥典分析方法驗(yàn)證的參考文獻(xiàn)ICHQ2-ValidationofAnalyticalProcedures美國藥典（USP）分析方法驗(yàn)證的參考文獻(xiàn)ICHQ2-Validation主要內(nèi)容仿制藥的GMP要求仿制藥分析方法的驗(yàn)證仿制藥穩(wěn)定性的研究主要內(nèi)容仿制藥的GMP要求穩(wěn)定性測(cè)試目的考察原料藥或制劑的性質(zhì)在溫度,濕度,光線等條件的影響下隨時(shí)間變化的規(guī)律.為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運(yùn)輸條件和有效期的確定提供科學(xué)依據(jù),以保證臨床用藥安全有效.穩(wěn)定性測(cè)試目的考察原料藥或制劑的性質(zhì)在溫度,濕度,光線等條穩(wěn)定性測(cè)試的趨勢(shì)包括更多的貯藏條件以使臨床實(shí)驗(yàn)可在不同國家進(jìn)行提早開始穩(wěn)定性研究來附和不同國家藥檢局的要求穩(wěn)定性測(cè)試的趨勢(shì)包括更多的貯藏條件以使臨床實(shí)驗(yàn)可在不同國家進(jìn)穩(wěn)定性測(cè)試需要控制的條件測(cè)試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)貯存條件

測(cè)試頻率測(cè)試完成時(shí)間穩(wěn)定性測(cè)試需要控制的條件測(cè)試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)原料藥的測(cè)試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)外觀變化:顏色物理性質(zhì)變化:晶型,熔點(diǎn),熱失重,水含量主要成分含量:97-103%雜質(zhì)含量：<0.15%原料藥的測(cè)試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)外觀變化:顏色仿制藥對(duì)原料藥的要求與被仿制藥品的原料藥具有相同的物理化學(xué)性質(zhì):如鹽,晶型和異構(gòu)體(對(duì)映體)原料藥的雜質(zhì)限度原料藥雜質(zhì)的含量應(yīng)低于質(zhì)控限度雜質(zhì)的種類和含量與被仿制藥相同如雜質(zhì)的含量明顯高于質(zhì)控限度且與被仿制藥不同,應(yīng)做必要的安全性研究原料藥中基因毒性雜質(zhì)要被有效控制仿制藥對(duì)原料藥的要求與被仿制藥品的原料藥具有相同的物理化學(xué)性原料藥的雜質(zhì)限度最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度質(zhì)控限度<=2g0.05%0.10%或1.0mg0.15%或1.0mg>2g0.03%0.05%0.05%原料藥的雜質(zhì)限度最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度質(zhì)控限度<=2原料藥中基因毒性雜質(zhì)的控制基因毒性雜質(zhì)舉例alkylatingelectrophiliccenter,unstableepoxide,aromaticamines,aromaticnitro,azo-structure,N-nitroso-group基因毒性雜質(zhì)的控制限<1.5ug/day原料藥中基因毒性雜質(zhì)的控制基因毒性雜質(zhì)舉例藥物制劑的測(cè)試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)外觀變化:顏色主要成分含量：變化小于5%降解產(chǎn)物:<0.2%溶出度:>70%at45min物理性質(zhì):水含量,顆粒度藥物制劑的測(cè)試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)外觀變化:顏色制劑的雜質(zhì)限度最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度質(zhì)控限度<1mg0.1%1.0%,5ug1.0%,50ug1-10mg0.1%0.5%,20ug1.0%,50ug10-100mg0.1%0.2%,2mg0.5%,200ug100mg-1g0.1%0.2%,2mg0.2%,3mg1g-2g0.05%0.2%,2mg0.2%,3mg>2g0.05%0.1%0.15%制劑的雜質(zhì)限度最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度質(zhì)控限度<1mg0溶出度測(cè)定模擬人體的消化過程溶出度測(cè)定模擬人體的消化過程溶出度測(cè)定的重要性控制藥物制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)決定藥物制劑穩(wěn)定性的一個(gè)重要依據(jù)用來評(píng)價(jià)藥物制劑質(zhì)量是否受原料藥,配方,生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)地變化的影響

溶出度測(cè)定的重要性控制藥物制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)USP1:轉(zhuǎn)籃法溶出度測(cè)試過程中,藥品滯留在轉(zhuǎn)籃里可以調(diào)節(jié)緩沖液的值而不影響籃里的藥品適用于片劑,膠囊等USP1:轉(zhuǎn)籃法溶出度測(cè)試過程中,藥品滯留在轉(zhuǎn)籃里USP2:槳法溶出度測(cè)試過程中,藥品留在容器底部的中間適用于片劑,膠囊和懸浮液等USP2:槳法溶出度測(cè)試過程中,藥品留在容器底部的中間USPII

溶出度測(cè)定儀器USPII溶出度測(cè)定儀器USPII溶出度測(cè)定舉例USPII溶出度測(cè)定舉例USP3:往復(fù)式圓筒法藥品隨圓筒在溶液中做上下運(yùn)動(dòng)不同緩沖液可放在不同容器中適用于片劑,膠囊和緩釋藥等USP3:往復(fù)式圓筒法藥品隨圓筒在溶液中做上下運(yùn)動(dòng)USPIII

溶出度測(cè)定儀器USPIII溶出度測(cè)定儀器52USPIII溶出度測(cè)定舉例52USPIII溶出度測(cè)定舉例USPIII溶出度測(cè)定舉例USPIII溶出度測(cè)定舉例溶出度測(cè)定方法的要素選擇適當(dāng)緩沖液(pH):API在緩沖液中的溶解度是藥品100%釋放的5-10倍.設(shè)定適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速(USPI,USPII):50rpm,75rpm,100rpm使用適當(dāng)?shù)姆治龇椒?UV,HPLC

溶出度測(cè)定方法的要素選擇適當(dāng)緩沖液(pH):API在緩沖液海南華益泰康藥業(yè)有限公司成立于2010年6月，?？谑幸M(jìn)的重大科技項(xiàng)目，總投資1億元人民幣。以新藥研發(fā)為主，集生產(chǎn)、銷售于一體的綜合性國際化醫(yī)藥企業(yè)。公司關(guān)鍵核心研發(fā)人員均來自美國，有10年以上在美國著名制藥醫(yī)藥公司藥物制劑開發(fā)和技術(shù)管理的經(jīng)驗(yàn)。海南華益泰康藥業(yè)有限公司成立于2010年6月，?？谑幸M(jìn)的重海南華益泰康藥業(yè)有限公司公司總建筑面積達(dá)1萬多平方米，4000平米的制劑研發(fā)和生產(chǎn)車間，2500平米的分析研發(fā)和質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室。生產(chǎn)車間及研發(fā)實(shí)驗(yàn)室完全按照美國GMP要求標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，并引入國外藥廠的現(xiàn)代化設(shè)計(jì)和管理理念為產(chǎn)品把關(guān)。目前有近十個(gè)項(xiàng)目處于研發(fā)階段，大部分是緩釋和腸溶等復(fù)雜劑型。海南華益泰康藥業(yè)有限公司公司總建筑面積達(dá)1萬多平方米，400分析實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備液相色譜：安捷倫1260和1100型氣相色譜：安捷倫7890加頂空自動(dòng)進(jìn)樣紫外可見：安捷倫8453加自動(dòng)進(jìn)樣器溶出儀：安捷倫708加自動(dòng)進(jìn)樣器溶出儀USPIII：安捷倫(Varian)Bio-Dis傅里葉紅外：島津Prestige分析實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備液相色譜：安捷倫1260和1100型

穩(wěn)定性測(cè)試的貯存條件氣候帶溫度(OC)濕度(%RH)溫帶2145地中海氣候,亞熱帶2560干熱帶3025濕熱帶3070國際氣候帶

穩(wěn)定性測(cè)試的貯存條件氣候帶溫度(OC)濕度(%RH)溫帶2

穩(wěn)定性測(cè)試的貯存條件貯存條件最短時(shí)間(月)長期試驗(yàn)25°C/60%RHor30°C/65%RH12加速試驗(yàn)40°C/75%RH6

穩(wěn)定性測(cè)試的貯存條件貯存條件最短時(shí)間(月)長期試驗(yàn)25°穩(wěn)定性測(cè)試的儲(chǔ)存條件貯存條件最短時(shí)間(月)長期試驗(yàn)5°C±3°C12加速試驗(yàn)25°C/60%RH6穩(wěn)定性測(cè)試的儲(chǔ)存條件貯存條件最短時(shí)間(月)長期試驗(yàn)5°C穩(wěn)定性測(cè)試的儲(chǔ)存條件貯存條件最短時(shí)間(月)長期貯存-20°C±5°C12穩(wěn)定性測(cè)試的儲(chǔ)存條件貯存條件最短時(shí)間(月)長期貯存-20°光照穩(wěn)定性的測(cè)試總光照：1.2millionluxhours光強(qiáng)：200watthours/㎡實(shí)驗(yàn)要求：裸露在光源下放在包裝中光照穩(wěn)定性的測(cè)試總光照：1.2millionluxho成品藥有效期的確定穩(wěn)定性好的藥品一般以長期試驗(yàn)結(jié)果來確定有效期綜合加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析如三批統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果差別較小,取平均值為有效期如統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果差別較大,取最短的為有效期成品藥有效期的確定穩(wěn)定性好的藥品一般以長期試驗(yàn)結(jié)果來確定有效穩(wěn)定性的測(cè)試頻率

長期試驗(yàn)第一年:每三個(gè)月測(cè)一次第二年:每六個(gè)月測(cè)一次第二年以后:每年測(cè)一次加速試驗(yàn)六個(gè)月時(shí)間:至少測(cè)三次,包括起始點(diǎn)和第六個(gè)月的點(diǎn).穩(wěn)定性的測(cè)試頻率長期試驗(yàn)穩(wěn)定性的測(cè)試時(shí)間和有效期貯存條件(°C/%RH)測(cè)試時(shí)間(月)13691218每年結(jié)束5

T

T

T30/65or25/60

TTTTTTT40/75(T)TT

50TT

光照試驗(yàn)T

有效期61212182430+12結(jié)束穩(wěn)定性的測(cè)試時(shí)間和有效期貯存條件測(cè)試時(shí)間(月)136912

測(cè)試完成時(shí)間測(cè)試時(shí)間(月)完成時(shí)間(天)<1141-321>328測(cè)試完成時(shí)間測(cè)試時(shí)間(月)完成時(shí)間(天)<1141穩(wěn)定性測(cè)試樣品的選擇最少采用三批樣品采用一定規(guī)模生產(chǎn)的樣品能夠代表大規(guī)模生產(chǎn)條件下的產(chǎn)品質(zhì)量合成路線配方包裝

穩(wěn)定性測(cè)試樣品的選擇最少采用三批樣品穩(wěn)定性測(cè)試樣品生產(chǎn)規(guī)模的要求口服固體制劑:片劑,膠囊等10000個(gè)制劑單位大體積包裝的制劑:靜脈輸液穩(wěn)定性試驗(yàn)所需總量的10倍以上穩(wěn)定性測(cè)試樣品生產(chǎn)規(guī)模的要求口服固體制劑:片劑,膠囊等哪些變化需要重測(cè)原料藥的穩(wěn)定性改變合成路線改變合成過程中最后的純化步驟改變大規(guī)模生產(chǎn)的步驟改變分析方法和規(guī)格要求哪些變化需要重測(cè)原料藥的穩(wěn)定性改變合成路線哪些變化需要重測(cè)成品藥的穩(wěn)定性不同的制劑和配方改變主要添加劑的比例改變生產(chǎn)步驟,生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)地改變藥品的包裝哪些變化需要重測(cè)成品藥的穩(wěn)定性不同的制劑和配方穩(wěn)定性研究的特點(diǎn)周期長樣品選擇較嚴(yán)格重測(cè)率高成本較高穩(wěn)定性研究的特點(diǎn)周期長穩(wěn)定性研究的參考文獻(xiàn)ICHQ1A-StabilityTestingofNewDrugSubstancesandProductsICHQ1B-StabilityTesting:PhotostabilityTestingofNewDrugSubstancesandProductsICHQ3-Impurities穩(wěn)定性研究的參考文獻(xiàn)ICHQ1A-StabilityTFDA483舉例YourfirminvalidatedanalyticaldatawithoutanyscientificjustificationYourinvestigationattributesanunknownpeaktoinjectorcontaminationbutthispeakwasnotpresentinprevioussystemsuitabilityorsampleinjectionsYourcorrectiveactionaddressesproductdispositionbutdoesnotaddresshowtopreventreoccurrenceoftheOOSresultFDA483舉例YourfirminvalidateFDA483舉例Stabilityfailureswereattributedtoine