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基因工程概論第1頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月基因工程概論5

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重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念基因工程所需的基本條件基因工程的操作過(guò)程目的基因的克隆與基因文庫(kù)的構(gòu)建大腸桿菌的基因工程酵母的基因工程第2頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月A重組DNA技術(shù)的基本定義1重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念

重組DNA技術(shù)是指將一種生物體(供體)的基因與載體在體外進(jìn)行拼接重組,然后轉(zhuǎn)入另一種生物體(受體)內(nèi),使之按照人們的意愿穩(wěn)定遺傳并表達(dá)出新產(chǎn)物或新性狀的DNA體外操作程序,也稱為分子克隆技術(shù)。因此,供體、受體、載體是重組DNA技術(shù)的三大基本元件。第3頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月B基因工程的基本定義1重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念

基因工程是指重組DNA技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化設(shè)計(jì)與應(yīng)用,包括上游技術(shù)和下游技術(shù)兩大組成部分。上游技術(shù)指的是基因重組、克隆和表達(dá)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建(即重組DNA技術(shù));而下游技術(shù)則涉及到基因工程菌或細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)以及基因產(chǎn)物的分離純化過(guò)程。第4頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月C重組DNA技術(shù)與基因工程的基本用途1重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念分離、擴(kuò)增、鑒定、研究、整理基因信息資源規(guī)?;a(chǎn)生物活性物質(zhì)設(shè)計(jì)、構(gòu)建生物的新性狀甚至新物種第5頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月大規(guī)模生產(chǎn)生物活性物質(zhì)工程細(xì)胞基因工程蛋白質(zhì)工程途徑工程發(fā)酵工程細(xì)胞工程分離工程酶酶工程分離工程普通細(xì)胞普通細(xì)胞生物活性物質(zhì)第6頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月設(shè)計(jì)構(gòu)建生物的新性狀甚至新物種突變細(xì)胞基因敲除天然細(xì)胞野生動(dòng)物基因敲除突變動(dòng)物天然物質(zhì)或合成物質(zhì)高通量篩選第7頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月D基因工程的基本形式1重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念第一代基因工程蛋白多肽基因的高效表達(dá)經(jīng)典基因工程第二代基因工程蛋白編碼基因的定向誘變蛋白質(zhì)工程第三代基因工程代謝信息途徑的修飾重構(gòu)代謝途徑工程

第四代基因工程全基因組或染色體的轉(zhuǎn)移基因組工程第8頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月E重組DNA技術(shù)的理論基礎(chǔ)1

重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念19世紀(jì)中

孟德?tīng)?/p>

豌豆雜交試驗(yàn)

遺傳因子20世紀(jì)初

摩爾根

果蠅雜交實(shí)驗(yàn)

基因1944年

艾弗瑞

肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)

遺傳物質(zhì)DNA1973年

伯格-杰克森-考恩-鮑耶

DNA分子體外拼接分子遺傳學(xué)1953年

沃森-克瑞克

DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)基因工程經(jīng)典遺傳學(xué)基因?qū)W分子生物學(xué)第9頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月基因的分子生物學(xué)第10頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月F基因工程的基本原理1

重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念提高外源基因的劑量:分子遺傳學(xué)原理篩選修飾重組基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件:分子生物學(xué)原理

如:?jiǎn)?dòng)子、增強(qiáng)子、操作子、終止子、上游調(diào)控序列等如:SD序列、mRNA非編碼區(qū)、密碼子等修飾構(gòu)建蛋白質(zhì)生物合成的翻譯調(diào)控元件:分子生物學(xué)原理

工程菌(微型生物反應(yīng)器)的增殖及穩(wěn)定生產(chǎn):生化工程學(xué)原理第11頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月G基因工程的支撐技術(shù)1

重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念核酸凝膠電泳技術(shù)核酸分子雜交技術(shù)細(xì)菌轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)染技術(shù)DNA序列分析技術(shù)寡核苷酸合成技術(shù)基因定點(diǎn)突變技術(shù)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)第12頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月核酸凝膠電泳技術(shù)凝膠板第13頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月核酸分子雜交技術(shù)ACCGTAGCTAGGGTTCACACAAATGGCCCGTACAAGTGTGTTT第14頁(yè),課件共15頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月D基因工程的基本形式1重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念C重組DNA技術(shù)與基因工程的基本用途B基因

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