124-《川產(chǎn)道地中藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程黃連》（征求意見稿）編制說明目錄TOC\o"1-1"\h\u一、 工作簡況 -2-二、 標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要內(nèi)容 -5-三、 主要試驗(yàn)(或驗(yàn)證)的分析、綜述報(bào)告 -7-四、 采用國際標(biāo)準(zhǔn)和國外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的程度 -33-五、 與有關(guān)的現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系； -34-六、 重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù) -34-七、 作為強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)或推薦性標(biāo)準(zhǔn)的建議 -34-八、 實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的要求和措施建議 -34-九、 廢止現(xiàn)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建議 -34-十、 其他應(yīng)予說明的事項(xiàng) -34-工作簡況（一）任務(wù)來源根據(jù)四川省市場(chǎng)監(jiān)督管理局2022年6月7日發(fā)出的《關(guān)于下達(dá)2022年度地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目立項(xiàng)計(jì)劃的通知》（川市監(jiān)函〔2022〕295號(hào)），批準(zhǔn)由西南交通大學(xué)牽頭起草地方標(biāo)準(zhǔn)《川產(chǎn)道地中藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-黃連》。（二）目的意義黃連是四川著名的道地藥材之一，具有歷史悠久，質(zhì)量及產(chǎn)量佳，目前，黃連優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)種植技術(shù)方法不盡相同，沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，在種植技術(shù)缺乏可操作性標(biāo)準(zhǔn)。并且由于缺乏規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)，目前通過人工種植(養(yǎng)殖)的藥材品種不到藥材總量的2%。由于栽培品種較少，栽培歷史不長，中藥材生產(chǎn)技術(shù)落后、栽培管理粗放，種植技術(shù)還停留在只求成活、不講產(chǎn)量與質(zhì)量的低水平上，與一般的糧食作物和經(jīng)濟(jì)作物相比，中藥材生產(chǎn)技術(shù)至少落后10-20年。另一方面，現(xiàn)有生產(chǎn)技術(shù)科技含量較低，不完善配套，規(guī)范化程度低，一些技術(shù)難點(diǎn)長期沒有突破。根據(jù)《中華人民共和國中醫(yī)藥法》和《四川省中醫(yī)藥條例》中指出，國家鼓勵(lì)發(fā)展中藥材規(guī)范化種植，鼓勵(lì)建立道地中藥材評(píng)價(jià)體系，扶持道地中藥材生產(chǎn)基地建設(shè)，保護(hù)道地中藥材，省人民政府有關(guān)部門應(yīng)當(dāng)建立川產(chǎn)道地藥材保護(hù)和質(zhì)量體系，制定并發(fā)布川產(chǎn)道地藥材省級(jí)中藥材標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)，《四川省中藥材產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃（2018-2025年）》指出以中藥材產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)體系為抓手，以道地、大宗藥材產(chǎn)業(yè)發(fā)展為重點(diǎn)，推進(jìn)我省中藥材產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。故本標(biāo)準(zhǔn)從黃連高產(chǎn)關(guān)鍵問題入手，采取自主創(chuàng)新和積極引進(jìn)并重的原則，結(jié)合黃連生產(chǎn)特點(diǎn)，針對(duì)企業(yè)人力資源、前提方案、關(guān)鍵過程控制、產(chǎn)品檢測(cè)等，根據(jù)中藥材安全、有效、高產(chǎn)的要求，旨在提高中藥材質(zhì)量穩(wěn)定性和安全性，保障人民身體健康。工作過程成立起草小組2021年12月，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組向四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局遞交了《川產(chǎn)道地中藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-黃連》的申報(bào)書，2022年06月獲批準(zhǔn)立項(xiàng)。2021年12月成立了標(biāo)準(zhǔn)起草小組，標(biāo)準(zhǔn)起草工作組就標(biāo)準(zhǔn)的基本框架及內(nèi)容進(jìn)行了充分討論，研究了標(biāo)準(zhǔn)的編寫工作并對(duì)工作組成員分工、工作進(jìn)度及時(shí)限要求作了具體安排。起草階段2022年01月-2022年02月，標(biāo)準(zhǔn)起草小組展開調(diào)研，對(duì)黃連高產(chǎn)栽培技術(shù)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行研究并進(jìn)行野外調(diào)查取樣。2022年03月-2022年05月，標(biāo)準(zhǔn)起草小組對(duì)各地道地與非道地藥材栽培技術(shù)進(jìn)行比較。2022年06月-2022年07月，擬定標(biāo)準(zhǔn)編制提綱，起草標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)起草小組收集國內(nèi)外有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)資料，進(jìn)行分析比較，同時(shí)根據(jù)各地合作種植基地的試驗(yàn)結(jié)果，確定標(biāo)準(zhǔn)的范圍及主要技術(shù)內(nèi)容，提出標(biāo)準(zhǔn)編制提綱。根據(jù)GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》編制原則，編制標(biāo)準(zhǔn)初稿。征求意見階段2022年07月-2022年08月，形成征求意見稿。經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)主要起草成員的充分討論及多次修改和完善，在主產(chǎn)區(qū)瓦屋山、峨眉山、樂山等地黃連生產(chǎn)合作社及種植戶、相關(guān)合作藥業(yè)單位以及重慶市中藥研究院等中廣泛征求意見，并獲得標(biāo)準(zhǔn)征求意見反饋建議，經(jīng)過修改和完善，最終形成了《川產(chǎn)道地中藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-黃連》（征求意見稿）。主要起草單位及人員分工主要起草單位單位名稱牽頭/協(xié)作單位主要工作任務(wù)西南交通大學(xué)牽頭單位總負(fù)責(zé)和組織，標(biāo)準(zhǔn)起草與完善重慶市中藥研究院協(xié)作單位標(biāo)準(zhǔn)起草及完善瓦屋山藥業(yè)協(xié)作單位標(biāo)準(zhǔn)起草、黃連生產(chǎn)與試驗(yàn)沙灣合作社協(xié)作單位標(biāo)準(zhǔn)起草、黃連生產(chǎn)與試驗(yàn)眉山市彭山區(qū)衛(wèi)生局協(xié)作單位標(biāo)準(zhǔn)起草、黃連生產(chǎn)與試驗(yàn)樂山市犍為縣衛(wèi)生計(jì)生局協(xié)作單位標(biāo)準(zhǔn)起草、黃連生產(chǎn)與試驗(yàn)樂山市犍為縣中醫(yī)院協(xié)作單位標(biāo)準(zhǔn)起草、黃連生產(chǎn)與試驗(yàn)主要起草人員姓名工作單位任務(wù)分工備注譚睿西南交通大學(xué)統(tǒng)籌協(xié)調(diào)、制定標(biāo)準(zhǔn)制訂方案瞿顯友重慶市中藥研究院資源參與標(biāo)準(zhǔn)起草、檢索、編制及資料復(fù)核任瑤瑤西南交通大學(xué)參與標(biāo)準(zhǔn)起草劉洋西南交通大學(xué)參與標(biāo)準(zhǔn)起草冷沁潔西南交通大學(xué)參與標(biāo)準(zhǔn)起草吳曉青西南交通大學(xué)參與標(biāo)準(zhǔn)起草顧健西南民族大學(xué)參與標(biāo)準(zhǔn)起草嚴(yán)光玉洪雅縣瓦屋山藥業(yè)參與標(biāo)準(zhǔn)起草楊鈺樂山市沙灣區(qū)沙灣鎮(zhèn)農(nóng)場(chǎng)村經(jīng)濟(jì)合作社參與標(biāo)準(zhǔn)起草標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要內(nèi)容（一）編制原則本標(biāo)準(zhǔn)的編制遵循以下原則：科學(xué)性原則本標(biāo)準(zhǔn)的制定應(yīng)充分考慮特色栽培及加工技術(shù)與道地藥材生物學(xué)特性、產(chǎn)地環(huán)境與的內(nèi)在關(guān)系，注意揭示所提煉特色技術(shù)的科學(xué)內(nèi)涵。實(shí)用性原則本標(biāo)準(zhǔn)的制定應(yīng)根據(jù)道地藥材產(chǎn)區(qū)實(shí)際生產(chǎn)情況確定標(biāo)準(zhǔn)中相關(guān)技術(shù)及技術(shù)方法，防止脫離實(shí)際，標(biāo)準(zhǔn)的制定應(yīng)具有用于指導(dǎo)道地藥材生產(chǎn)加工的針對(duì)性、實(shí)用性和應(yīng)用價(jià)值。先進(jìn)性原則本標(biāo)準(zhǔn)的制定應(yīng)在突出傳統(tǒng)特色技術(shù)同時(shí)，積極推薦具有道地產(chǎn)區(qū)已經(jīng)在應(yīng)用的現(xiàn)代技術(shù)。（二）主要內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容如下：1.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了川黃連道地藥材高產(chǎn)栽培技術(shù)的術(shù)語和定義、產(chǎn)地環(huán)境、栽培、采收加工、標(biāo)識(shí)、包裝、貯存、病蟲害防治等技術(shù)要求。2.通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)中的條款。凡注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本文件。3.標(biāo)準(zhǔn)中黃連為毛茛科植物黃連CoptischinensisFranch.、三角葉黃連CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao或云連CoptisteetaWall.的干燥根莖。以上三種分別習(xí)稱“味連”、“雅連"、“云連”。本標(biāo)準(zhǔn)中涉及的為味連。黃連（味連）具有喜濕潤忌干旱，怕強(qiáng)光喜弱光忌高溫，在霜雪下葉片能保持常綠不枯，在零下18℃的低溫條件下，可正常越冬的生物遺傳學(xué)特性。4.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定栽培黃連（味連）的產(chǎn)地環(huán)境，如生態(tài)環(huán)境，包括海拔、無霜期、平均氣溫、光照、水分、土壤、地形地勢(shì)，產(chǎn)地環(huán)境質(zhì)量等技術(shù)參數(shù)。5.標(biāo)準(zhǔn)的選地原則是在栽培黃連（味連）的生態(tài)環(huán)境基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代栽培技術(shù)對(duì)種植地的具體要求，是川黃連道地藥材的主要成因之一。6.整地：包括熏土、翻土、開溝作廂等。7.大田搭棚與移栽定植其中搭棚是黃連（味連）栽培生產(chǎn)中避免陽光直射植株，保證生長旺盛，發(fā)育均一的關(guān)鍵技術(shù)之一，也是栽培黃連（味連）維系道地藥材質(zhì)量的成因之一，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了搭棚技術(shù)參數(shù)、移栽定植時(shí)間、行株距等技術(shù)參數(shù)。8.田間管理：培土與施肥是黃連（味連）栽培生產(chǎn)中關(guān)鍵技術(shù)之一，培土促進(jìn)植株側(cè)芽和根莖的發(fā)育，施肥保障植株生長旺盛，是增加產(chǎn)量和保證質(zhì)量的，本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了補(bǔ)苗、除草、培土與施肥、蔭棚管理等技術(shù)參數(shù)。9.病蟲害防治:規(guī)定了黃連（味連）主要病蟲害的農(nóng)業(yè)防治與化學(xué)防治方法。主要試驗(yàn)(或驗(yàn)證)的分析、綜述報(bào)告（一）不同產(chǎn)地的黃連的生態(tài)分析1.1黃連樣點(diǎn)空間分布格局分析根據(jù)數(shù)據(jù)庫、文獻(xiàn)及本課題組的實(shí)際調(diào)查發(fā)現(xiàn)，黃連生長最適宜區(qū)主要分布在四川洪雅、重慶石柱、武隆、巫溪、湖北利川、恩施等地。海拔、9月降水量以及2月降水量等7個(gè)生態(tài)因子是影響黃連生長的主要生態(tài)因子，相關(guān)分析結(jié)果顯示，在一定范圍內(nèi)，降水量與海拔的升高有利于黃連中總生物堿含量的積累。本研究采用高效液相色譜法同時(shí)對(duì)三種黃連藥材中7種生物堿成分進(jìn)行了含量測(cè)定研究;以各生物堿及總生物堿的含量為指標(biāo)按省份分組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,初步確定了最優(yōu)黃連產(chǎn)區(qū)為四川洪雅、湖北恩施、利川以及重慶等地。同時(shí)在生態(tài)位模型理論的指導(dǎo)下,利用最大信息熵模型對(duì)黃連進(jìn)行適生性的研究,結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)理論知識(shí)對(duì)采樣點(diǎn)的生境適宜度值進(jìn)行分等,并以ArcGIS軟件輸出黃連生長適宜性等級(jí)圖,結(jié)果表明,生境適宜度范圍為[0-1],值大于0.7798的區(qū)域?yàn)辄S連的最適宜生長區(qū)域,從數(shù)據(jù)以及圖形中可以看出,這些區(qū)域包括四川洪雅、湖北恩施、利川等。生態(tài)因子常常影響著藥材有效成分的積累,本研究在利用最大信息熵模型進(jìn)行適生區(qū)域研究的同時(shí),將獲取的影響黃連生長的主要生態(tài)因子與黃連的質(zhì)量信息進(jìn)行了相關(guān)性分析,明確了黃連總生物堿與生態(tài)因子之間的關(guān)系,并從中選取了海拔、2月降水量、9月降水量、等溫性4個(gè)關(guān)鍵因子做品質(zhì)等級(jí)劃分,并利用軟件進(jìn)行品質(zhì)影響分析,得到每個(gè)因子的品質(zhì)等級(jí)圖和因子等級(jí)疊加圖以及最終三種黃連品質(zhì)區(qū)劃等級(jí)圖。1.2生態(tài)因子分析雅連分布的生態(tài)因子范圍：年有效積溫3419.6℃，最冷季均溫為-3.3-15.6℃，最熱季均溫為22.5-38.7℃，年均溫為8-10℃，年均降水量為1000-1800mm，年均日照為1161h，土壤類型主要為富含腐殖質(zhì)的黃棕壤、紅壤，土壤質(zhì)地宜為輕壤土或壤土等。結(jié)合分布點(diǎn)的生態(tài)因子及氣候劃分來說，主要分布于亞熱帶濕潤氣候，氣候溫和，雨量充沛，四季分明，雨熱同季，夏無酷熱，冬無嚴(yán)寒。味連分布的生態(tài)因子范圍：年有效積溫3419.6℃，最冷季均溫為-3.6-16.6℃，最熱季均溫為21.5-37.7℃，年均溫為14.4℃，年均降水量為2000mm，年均日照為1140h左右，土壤類型主要為富含腐殖質(zhì)的黃棕壤、紅壤，土壤質(zhì)地宜為輕壤土或壤土等。結(jié)合分布點(diǎn)的生態(tài)因子及氣候劃分來說，主要分布于亞熱帶濕潤氣候，氣候溫和，雨量充沛，四季分明，雨熱同季，夏無酷熱，冬無嚴(yán)寒。從各項(xiàng)生態(tài)因子來看，味連、雅連各生態(tài)因子差異不顯著，水平分布上無明顯的分界。從生態(tài)因子變異系數(shù)來看，味連和雅連中的生物堿成分與氣候及土壤等生態(tài)因子之間存在較好的相關(guān)性。與各生物堿相關(guān)的主要?dú)夂蛞蜃邮侨照諘r(shí)數(shù)、極端最高溫、極端最低溫；主要土壤因子是水解性氮、有機(jī)質(zhì)、速效磷及海拔高度。1.3全球最大生態(tài)相似度區(qū)域分析黃連為著名的四川道地藥材，目前黃連的主產(chǎn)區(qū)為四川省的峨眉山市、洪雅縣、彭州市、崇州市、重慶石柱及湖北利川等地，并且其周圍縣市也有種植。1.4與生物堿相關(guān)的生態(tài)因子分析黃連中的化學(xué)成分與其生長的環(huán)境的日照時(shí)數(shù)、海拔高度、氣溫、年降雨量及土壤的有機(jī)質(zhì)、水解性氮、速效磷、速效鉀、pH等生態(tài)因子之間存在較好的相關(guān)性，他們不同程度的影響著黃連中化學(xué)成分的積累，其中，與藥根堿相關(guān)的生態(tài)因子主要是日照時(shí)數(shù)、極端最高最低溫、水解性氮及海拔高度與速效磷;與非洲防己堿相關(guān)的主要是日照時(shí)數(shù)、最高溫、有機(jī)質(zhì)及海拔高度。與表小聚堿相關(guān)的主要是日照時(shí)數(shù)、有機(jī)質(zhì)、極端最低最高溫及海拔高度。與黃連堿相關(guān)的主要是日照時(shí)數(shù)、年均溫、最高溫、及海拔高度。與巴馬汀相關(guān)的主要是日照時(shí)數(shù)、最高溫、有機(jī)質(zhì)。與小璧堿相關(guān)的主要是日照時(shí)數(shù)、極端最高最低溫、海拔高度。與六種生物堿總和相關(guān)的主要是日照時(shí)數(shù)、有機(jī)質(zhì)、極端最高最低溫及海拔高度與水解性氮。（二）黃連種苗分等標(biāo)準(zhǔn)研究表2.1黃連種苗各指標(biāo)測(cè)量編號(hào)株高(cm)葉數(shù)葉柄長(cm)葉長(cm)葉寬(cm)葉重(g)總重(g)根莖及須根重(g)1141.082.40.76217.8710.57.061.082.290.5831496.75.450.972.280.93412.5118.25.363.436.512.12510.567.833.21.594.512.36612.3137.1450.561.290.4771397.6651.263.161.15812.588.6540.772.040.8914.2691.480.471013.101023.072.13119.7065.13.440.411.381.3129.00144.33.330.681.291.211310.100.461.241.141412.2076.844.80.631.461.18159.201062.982.091697544.20.351.130.91711.67654.20.731.871.64187.8125.843.80.782.191.91911.542.071.92均值11.7898.6846.8424.5264.4470.9572.3491.318方差2.3982.4511.5901.0130.7930.6711.3220.613從表2.1可以看出種苗以株高及葉數(shù)的方差較大，說明這二者指標(biāo)變異范圍大。表2.2黃連種苗根莖及須根與其它指標(biāo)相關(guān)性相關(guān)系數(shù)株高葉數(shù)葉柄長葉長葉寬葉重總重根莖及須根p值株高1-0.28140.81830.78570.71840.23470.1386-0.45690.0493葉數(shù)1-0.3329-0.1330-0.10050.15010.08730.06250.7994葉柄長10.67230.61820.39880.3475-0.22710.3499葉長10.71280.30110.2218-0.34000.1543葉寬10.45180.2994-0.24790.3062葉重10.95000.43790.0608總重10.61070.0055從表2.2可以看出，黃連須根及根莖與總重和葉重呈正相關(guān)，與株高、葉柄長負(fù)相關(guān)，說明種苗不是越高越好。種苗與總重的相關(guān)性顯著，與株高呈顯著性的負(fù)相關(guān)。而葉重與葉寬、葉柄長、葉長、株高、葉數(shù)成正相關(guān)。表2.3黃連種苗的基本統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)指標(biāo)樣本數(shù)最小值最大值均值標(biāo)準(zhǔn)差株高8191.120.512.649452.332021葉數(shù)8193256.9462762.38004葉柄8054821.275526葉長8705741.056671葉寬81926.83.5371180.755673由表2.3可以看出，種苗株高均在12cm以上，葉數(shù)為6片以上。表2.4種苗動(dòng)態(tài)聚類結(jié)果分組樣本數(shù)株高葉數(shù)葉柄長葉長葉寬所占比例第1組169個(gè)14.30595.71017.42785.85443.72642.2%第2組157個(gè)10.68415.92365.79554.53183.204539.3%第3組74個(gè)13.41359.71626.5775.21083.797318.5%由表2.4可以看出，總體上種苗聚類成三類，第三組可定為Ⅰ級(jí)苗，第三組為Ⅱ級(jí)苗，第三組為Ⅲ級(jí)苗，所占的比例也較為合適。表2.5黃連種苗分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分項(xiàng)Ⅰ級(jí)Ⅱ級(jí)Ⅲ級(jí)指標(biāo)葉數(shù)株高葉數(shù)株高葉數(shù)株高均值9.71621613.413515.92356710.684085.71005914.30592方差1.689921.3346241.0539391.0485211.0838151.212224臨界值8.04.613.1調(diào)整8126946由以上數(shù)據(jù)可得出種苗分級(jí)的初步標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ級(jí)種苗：葉數(shù)≥8片，株高≥12cm；Ⅱ級(jí)種苗：葉數(shù)≥5片，株高≥9cm；Ⅲ級(jí)種苗與Ⅱ級(jí)苗的葉數(shù)相近，在生產(chǎn)中難以區(qū)分，因而把Ⅱ級(jí)種苗的葉數(shù)調(diào)整為6，Ⅲ級(jí)葉數(shù)降為4，株高降為6，Ⅲ級(jí)種苗：葉數(shù)≥4，株高≥6cm。等外級(jí)以下種苗需留床培育。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，種苗分級(jí)不能單從葉片數(shù)目及株高兩方面進(jìn)行劃分，后續(xù)還需對(duì)更多的因素進(jìn)行考察，以完善種苗分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。（三）黃連種植生產(chǎn)研究3.1種植資源研究3.1.1研究方法黃連為著名的四川道地藥材，目前黃連的主產(chǎn)區(qū)為四川省的洪雅縣、大邑、彭州市、汶川縣、安縣等地，并且其周圍縣市也有種植。洪雅縣地處四川盆地西南邊緣，地理坐標(biāo)為東經(jīng)102°49'-103°32'，北緯29°24'-30°00'，位于成都、樂山、雅安三角地帶，東接夾江縣、峨眉山市，南靠漢源縣、金口河區(qū)，西臨雅安雨城區(qū)、滎經(jīng)縣，北界名山縣、丹棱縣，距成都147公里、樂山55公里、眉山50公里、雅安62公里。幅員面積1896.49平方公里。洪雅縣屬中亞熱帶濕潤氣候，年降雨量1435.5毫米，日照1006.1小時(shí)，年無霜期307天，年平均氣溫16.6℃，屬中亞熱帶濕潤氣候。洪雅縣地形由西南向東北高低梯次變化形成高山、深丘、淺丘、臺(tái)地、河谷、壩，地貌以山地丘陵為主，河谷平壩分布在青衣江、花溪河兩岸，素有"七山二水一分田"之稱。全縣呈南北兩端寬，中間狹窄，形狀如啞鈴。南北長64km，北部寬46km，中間僅15km，境內(nèi)有瓦屋山、玉屏山、金舟山、八面山、九龍山、隱蒙山等。洪雅縣有大小河流330條。青衣江洪雅段總長58.3公里。漢王湖屬青衣江水系一支流--香樟河。漢王湖集雨面積達(dá)28平方公里，水域面2067700平方米，湖長15公里，水均深17.1米，主湖灣有10條，長約7公里。湖中有170余座青山環(huán)抱，有九灣18坳之稱。洪雅縣有桫欏、珙桐、銀杏、箭竹、紅豆木、楨楠等植物近4000種，其中一類植物有桫欏、珙桐;有大熊貓、扭角羚、小熊貓、麝鹿、金錢豹、紅腹角雉等野生動(dòng)物400余種，其中一類保護(hù)動(dòng)物有大熊貓、扭角羚、金錢豹。中草藥種類達(dá)2000余種，常用的有280余種，其中杜仲、黃連、厚樸、紅豆杉、薯蕷等規(guī)模較大。該縣氣候溫和濕潤,環(huán)境無污染,發(fā)展無公害農(nóng)業(yè)特別是藥材種植具有得天獨(dú)厚的條件，同時(shí)當(dāng)?shù)鼐用窬哂薪?0年的黃連種植經(jīng)驗(yàn)。2018年，總?cè)丝?5.2萬，其中：農(nóng)村人口25.3萬、城鎮(zhèn)人口9.9萬。是典型的山區(qū)農(nóng)業(yè)縣,農(nóng)民收入主要來源于種、養(yǎng)殖業(yè)和務(wù)工收入。樂山市沙灣區(qū)范店鄉(xiāng)四川省樂山市沙灣區(qū)一個(gè)典型的山區(qū)鄉(xiāng)。面積54.377平方公里。轄10個(gè)村委會(huì)，60個(gè)村民小組和1個(gè)社區(qū)。總戶數(shù)1473戶4745人。東臨龔嘴沙灣兩鎮(zhèn)，南面與峨邊縣五渡鎮(zhèn)隔河相望，西靠峨嵋山市龍門鄉(xiāng)，北連峨嵋山市和沙灣鎮(zhèn)。2006年已通過省級(jí)中藥材基地驗(yàn)收。是遠(yuǎn)近聞名的中藥材之鄉(xiāng)。耕地面積4780.62畝。地理坐標(biāo)介于東經(jīng)103°25′13″至103°30′15″和北緯29°17′25″至29°23′20″之間。境域輪廓呈鍋邊形，周邊相鄰3個(gè)縣(市、區(qū))，平均海拔1094米，最高點(diǎn)為畜豐村3組筍子山，海拔1740米。鄉(xiāng)人民政府駐地海拔530米左右，距沙灣城區(qū)18.38公里。范店鄉(xiāng)屬中亞熱帶濕潤季風(fēng)氣候，為低山溫和中高山秋冬季霧照區(qū)。年日照為1010小時(shí)左右，日照百分率為20%--30%。最高氣溫為35℃，最低氣溫-3.5℃，全年無霜期天數(shù)為300--315天，常年降雨量1500--1700毫米。最高海拔1740米，最低海拔528米。范店鄉(xiāng)黨委政府以黃連、白術(shù)、林竹、干果、茶葉為支柱產(chǎn)業(yè)，走出了一條有范店特色的農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化道路，全鄉(xiāng)黃連、白術(shù)等中藥材種植面積已達(dá)到一萬畝，林竹發(fā)展已初具規(guī)模，現(xiàn)擁有林竹面積5.5萬畝，木材蓄積量達(dá)15萬立方米。綜合環(huán)境因素調(diào)查分析表明,洪雅縣和樂山市沙灣區(qū)范店鄉(xiāng)中高山地帶生態(tài)環(huán)境特別有利于川黃連生長。中藥材種植業(yè)的發(fā)展有利于合理利用時(shí)間、空間和土地資源,有效保護(hù)洪雅道地藥材的種質(zhì)資源,對(duì)鞏固退耕還林成果,增加農(nóng)民收入,致富一方農(nóng)民具有極為重要的作用。近年來,縣委、縣政府立足資源優(yōu)勢(shì),切實(shí)加強(qiáng)對(duì)中藥材種植業(yè)的經(jīng)費(fèi)支持,縣農(nóng)業(yè)技術(shù)部門制定了切實(shí)可行的發(fā)展規(guī)劃、實(shí)施方案和具體措施,并不斷加強(qiáng)中藥材種植技術(shù)的培訓(xùn)推廣,各中藥材發(fā)展的主要鄉(xiāng)鎮(zhèn),也紛紛提出了切合各鄉(xiāng)鎮(zhèn)實(shí)際的發(fā)展措施,最終確認(rèn)洪雅縣和樂山市沙灣區(qū)范店鄉(xiāng)為黃連種植示范區(qū)。3.1.2研究過程黃連種植主要是采取林間套作、零散種植、規(guī)模化承包三種模式，保留優(yōu)良種植模式不變，提升合理密植。在雅安洪雅地區(qū)，由于雅連為無性繁殖，且生長海拔將高，栽培極為困難，課題組聯(lián)合企業(yè)，克服重重困難，將雅連種植面積由50畝增加至200畝。在樂山市沙灣區(qū)范店鄉(xiāng)，味連種植面積達(dá)到一萬畝以上。建立黃連GAP藥源基地及制訂生產(chǎn)SOP從源頭上保障臨床有關(guān)于黃連基本藥物品種的質(zhì)量與產(chǎn)量制定生產(chǎn)SOP，加強(qiáng)黃連藥材的生產(chǎn)建設(shè)，提高產(chǎn)量，從而實(shí)現(xiàn)資源的可持續(xù)性發(fā)展由于世界對(duì)中醫(yī)藥的逐漸接受和任可的原因，我國過去那種以不規(guī)范的藥材種植老路已經(jīng)行不通了，為了規(guī)范黃連種植加工，使黃連生產(chǎn)達(dá)到優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)無公害的標(biāo)準(zhǔn)，與國際接軌，使中藥走向世界。通過對(duì)黃連產(chǎn)區(qū)的種植歷史、生態(tài)環(huán)境、種質(zhì)資源、良種選育、黃連指標(biāo)性成分及活性成分的檢測(cè)。最終改善產(chǎn)區(qū)傳統(tǒng)生產(chǎn)中存在的不足，形成黃連規(guī)范化種植規(guī)程種子采收及育苗——栽培管理——田間管理——病蟲害防治——采收加工——運(yùn)輸儲(chǔ)存，完善的黃連現(xiàn)代農(nóng)業(yè)下SOP制定。通過規(guī)范化種植生產(chǎn)出來的黃連具有優(yōu)良的品質(zhì)，保證從源頭做到標(biāo)準(zhǔn)化、現(xiàn)代化。為中藥黃連品質(zhì)從源頭把關(guān)。3.1.3實(shí)地考察圖3.1洪雅縣黃連種植項(xiàng)目組成員多次到洪雅進(jìn)行實(shí)地考察，考察不同季節(jié)，不同生長年限的黃連生長情況，加工采收情況。圖3.2味連種植基地圖3.3雅連種植基地項(xiàng)目組成員多次到樂山市沙灣區(qū)范店鄉(xiāng)進(jìn)行實(shí)地考察，考察不同季節(jié)，不同生長年限的黃連生長情況，加工采收情況。圖3.4范店鄉(xiāng)味連種植基地項(xiàng)目組成員多次到大邑進(jìn)行實(shí)地考察，考察不同季節(jié)，不同生長年限的黃連生長情況，加工采收情況。圖3.5大邑黃連春夏圖3.6大邑黃連秋冬項(xiàng)目組成員多次到安縣高川鄉(xiāng)黃連進(jìn)行實(shí)地考察，考察不同季節(jié)，不同生長年限的黃連生長情況，加工采收情況。圖3.7安縣高川鄉(xiāng)黃連（四）黃連生物堿成分含量測(cè)定色譜條件研究中國黃連C.chinensis根莖中含小檗堿(berberine)、黃連堿(coptisine)、表小檗堿(epiberberine)、甲基黃連堿(worenine)、掌葉防己堿（巴馬?。?palmatine)、藥根堿(jatrorrhizine)、非洲防己堿(columbamine)、小檗紅堿(berberrubine)、木蘭花堿(magnoflorine)、groenlandicine等。三角葉黃連C.deltoidea的根莖中也含小檗堿、黃連堿、掌葉防己堿（巴馬?。⒈硇￠迚A、甲基黃連堿、藥根堿、groenlandicine、木蘭花堿等。李佳川等通過建立胰島素抵抗細(xì)胞模型，觀察黃連“藥材－部位－生物堿”成分對(duì)胰島素抵抗模型細(xì)胞培養(yǎng)液中葡萄糖消耗的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃連生物堿能明顯改善胰島素抵抗，這對(duì)防治與胰島素抵抗相關(guān)的代謝綜合癥或并發(fā)癥具有一定臨床意義。同時(shí)也說明了黃連生物堿部位為黃連發(fā)揮降糖作用的主要部位，因此本研究建立了黃連中7種小檗型生物堿的含量測(cè)定方法，通過主要的7種異喹啉類主要生物堿含量的差異來評(píng)價(jià)不同種川黃連的品質(zhì)，為研究其降糖藥效差異奠定基礎(chǔ)。4.1儀器與材料Angilent1260-II型高效液相色譜儀；BS-110S電子分析天平（北京賽多利斯電子天平有限公司）；超聲波清潔器（昆山市超聲儀器有限公司）。groenlandicine、表小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬汀購于成都普思生物生物科技有限公司（批號(hào)分別為PS161130-03、PS161130-01、PS161124-01、PS161201-01、PS161130-02，含量≥98%）非洲防己堿購于成都曼斯特生物科技有限公司（批號(hào)為MUST-14072213，含量≥98%）、鹽酸小檗堿購于中檢院（批號(hào)為110713-200911，含量≥98%）。甲醇、乙腈（色譜純，sigma）；三乙胺、磷酸、十二烷基苯磺酸鈉、磷酸二氫鉀均為分析純。4.2藥材來源本研究收集黃連藥材15批，包括味連6批，雅連6批，鳳尾連3批，均由西南交通大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院宋良科教授鑒定。詳細(xì)產(chǎn)地及編號(hào)見表4-1。表4.1黃連產(chǎn)地及編號(hào)編號(hào)品種產(chǎn)地1味連四川省洪雅縣瓦屋山藥業(yè)2味連四川省洪雅縣瓦屋山藥業(yè)3味連四川省洪雅縣瓦屋山黃連種植基地4味連四川省荷花池藥材市場(chǎng)5味連四川省樂山市麻子壩6味連四川省樂山市麻子壩7雅連四川省洪雅縣瓦屋山藥業(yè)8雅連四川省洪雅縣瓦屋山藥業(yè)9雅連四川省洪雅縣瓦屋山藥業(yè)10雅連四川省洪雅縣瓦屋山黃連種植基地11雅連四川省洪雅縣瓦屋山黃連種植基地12雅連四川省峨眉山黃灣鄉(xiāng)13鳳尾連四川省洪雅縣瓦屋山14鳳尾連四川省洪雅縣瓦屋山15鳳尾連四川省洪雅縣瓦屋山4.3色譜條件4.3.1波長選擇groenlandicine、表小檗堿、非洲防己堿、藥根堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿紫外吸收?qǐng)D譜如圖4.1所示。7種黃連生物堿的紫外吸收在270、345nm附近出較為接近，因此根據(jù)文獻(xiàn)選擇345nm作為檢測(cè)波長。圖4.17種生物堿紫外吸收?qǐng)D4.3.2流動(dòng)相pH的選擇以乙腈-0.4%的磷酸二氫鉀（含0.4%SDS，分別用磷酸、三乙胺調(diào)節(jié)pH2.03.0、4.0、6.0、9.0）34：66為流動(dòng)相，流速：1ml/min，柱溫：35℃，檢測(cè)波長：345nm，分別進(jìn)樣，測(cè)得的色譜圖如圖4.2所示。pH2.0pH4.0pH2.0pH4.0pH6.0pH9.0pH6.0pH9.0圖4.2不同pH選擇的色譜圖從結(jié)果可以看出，在pH2.0時(shí)，表小檗堿和藥根堿峰完全重合；在pH4.0時(shí)，表小檗堿和藥根堿略有分開；在pH6.0時(shí)，表小檗堿和藥根堿的分離度分別為0.94和1.34。在pH9.0時(shí)，表小檗堿和藥根堿的分離度分別為11.59、4.63。所以選擇磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH9.0。4.3.3緩沖鹽的選擇分別以乙腈-0.05mmol/L磷酸二氫鉀（含有0.4%SDS，pH9.0）（34:66）、乙腈-0.05mmol/L醋酸銨（含有0.4%SDS，pH9.0）（34:66）、乙腈-0.05mmol/L碳酸氫銨（含有0.4%SDS，pH9.0）（34:66）為流動(dòng)相，流速：1.0ml/min，柱溫：35℃，檢測(cè)波長：345nm，分別進(jìn)樣，測(cè)得的色譜圖如圖4.3所示。圖4.3不同緩沖鹽選擇的色譜圖從結(jié)果可以看出，以醋酸銨和碳酸氫銨為流動(dòng)相，groenlandicine、表小檗堿、非洲防己堿、藥根堿等峰均出現(xiàn)特別嚴(yán)重的拖尾和變形，峰形不佳。而以磷酸二氫鉀為流動(dòng)相，groenlandicine、表小檗堿、非洲防己堿各峰稍有拖尾，峰形較佳，因此選擇磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相。4.3.4流動(dòng)相比例的選擇分別以乙腈-0.05mmol/L磷酸二氫鉀（含有0.4%SDS，pH9.0）（34:66）、（32:68）、（30:70）為流動(dòng)相，流速：1.0ml/min，柱溫：35℃，檢測(cè)波長：345nm，分別進(jìn)樣，測(cè)得的色譜圖如圖4.4所示。圖4.4不同流動(dòng)相比例色譜圖從結(jié)果可以看出，流動(dòng)相比例30:70，整個(gè)分析周期時(shí)間為75min；流動(dòng)相比例32:68，整個(gè)分析周期時(shí)間為55min；流動(dòng)相比例（34:66），整個(gè)分析周期時(shí)間為45min。因此選擇流動(dòng)相比例為34:66。4.3.5色譜條件色譜柱AngilentEclipseXDB-C18(250mm×4.6mm，5μm)，流動(dòng)相為乙腈-0.4%磷酸二氫鉀（含有0.4%SDS，0.6%三乙胺，磷酸調(diào)節(jié)PH9.0）（34:66），流速1.0mL·min-1，柱溫35℃，檢測(cè)波長345nm，進(jìn)樣量10μL。4.3.6對(duì)照品溶液的制備分別精密稱定7種對(duì)照品適量，鹽酸甲醇（1:100）溶解制得每1mL含有1mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密吸取各對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，配制成每1mL分別含groenlandicine、表小檗堿、非洲防己堿、藥根堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿、為0.026、0.043、0.030、0.031、0.019、0.029、0.067mg/mL的混合對(duì)照品溶液。4.3.7供試品溶液的制備取黃連粉末約0.1g(過三號(hào)篩），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25mL鹽酸甲醇（1：100），密塞，稱定重量，超聲提取45min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，放置，取上清液，過0.45μm微孔濾膜，即得供試品溶液。（五）不同地區(qū)的味連、雅連、鳳尾連生物堿成分的含量我們研究測(cè)定了6批味連、6批雅連、3批鳳尾連的生物堿含量。結(jié)果顯示，總生物堿含量：味連>鳳尾連>雅連，小檗堿含量：味連>鳳尾連>雅連，巴馬汀含量：味連>雅連>鳳尾連，黃連堿：味連>鳳尾連>雅連，表小檗堿含量：味連>雅連>鳳尾連，非洲防己堿含量：味連>鳳尾連>雅連，藥根堿含量：雅連>鳳尾連>味連；groenlandicine含量：雅連>鳳尾連>味連。雅連、味連和鳳尾連中含量最高的都是小檗堿，其7種生物堿分別的含量大小具有一定的規(guī)律性。味連：小檗堿>黃連堿>巴馬汀>表小檗堿>藥根堿>非洲防己堿>groenlandicine，不同批次間之間差異較小；雅連：小檗堿>黃連堿>巴馬汀>藥根堿>groenlandicine>表小檗堿>非洲防己堿，不同批次之間差別較?。圾P尾連：小檗堿>黃連堿>藥根堿>巴馬汀>groenlandicine>非洲防己堿>表小檗堿，批次之間藥根堿和巴馬汀含量差別較大不穩(wěn)定，其他差別較小。因此，推測(cè)3種黃連7種生物堿的大小順序具有一定穩(wěn)定性和規(guī)律性，且3種黃連7種生物堿的大小順序不同，可以運(yùn)用7種生物堿含量大小順序來鑒定不同種的黃連。為黃連質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供依據(jù)。精密稱取過二號(hào)篩的黃連粉末0.1g，按2.5項(xiàng)方法制備供試品溶液，將供試品溶液和對(duì)照品溶液各10μL進(jìn)樣分析，分別測(cè)定3批不同品種黃連的生物堿含量，6批味連（S1-S6，S0為黃連生物堿混合對(duì)照品）的含量測(cè)定色譜圖如圖5.1所示，6批雅連（S7-S12，S0為黃連生物堿混合對(duì)照品）的含量測(cè)定色譜圖如圖5.2所示，3批鳳尾連（S13-S15，S0為黃連生物堿混合對(duì)照品）的含量測(cè)定色譜圖如圖5.3所示。1.groenlandicine2.jatrorrhizine3.columbamine4.epberberine5.coptisine6.palmatine7.berberine圖5.16批味藥材生物堿含量測(cè)定色譜疊加圖1.groenlandicine2.jatrorrhizine3.columbamine4.epberberine5.coptisine6.palmatine7.berberine圖5.26批雅連藥材生物堿含量測(cè)定色譜疊加圖1.groenlandicine2.jatrorrhizine3.columbamine4.epberberine5.coptisine6.palmatine7.berberine圖5.33批鳳尾連藥材生物堿含量測(cè)定色譜疊加圖（五）黃連的采收與加工研究5.1黃連的采收研究結(jié)果黃連通常在移栽后第五年收獲。據(jù)試驗(yàn)，黃連栽后生長滿5年收獲的，較4年收獲的單產(chǎn)增加54.61%；第六年收獲的，一般比第五年收獲可增產(chǎn)10%～15%。因此不宜提前收獲，但也不宜超過6年，因過分延長生長期則黃連生長勢(shì)減弱，根莖易腐爛，品質(zhì)差，產(chǎn)量下降。黃連收獲一般于10-11月進(jìn)行，收獲過早，根莖水分多，不充實(shí)，折干率低，但又不宜過遲，如遲至翌年春季雪化后收獲，植株已抽薹開花，養(yǎng)分被消耗，根莖中空，產(chǎn)量降低，品質(zhì)差。黃連宜選晴天先拆除蔭棚，然后用二齒耙挖出全株，敲落根部附土，齊根基部剪去須根，齊芽苞剪去葉片，即得鮮黃連。分別收集根莖、須根及葉片，運(yùn)回加工。5.2黃連的加工研究結(jié)果5.2.1產(chǎn)地加工研究結(jié)果性狀味連多集聚成簇，常彎曲，形如雞爪，單枝根莖長3～6cm，直徑0.3～0.8cm。表面灰黃色或黃褐色，粗糙，有不規(guī)則結(jié)節(jié)狀隆起、須根及須根殘基，有的節(jié)間表面平滑如莖稈，習(xí)稱“過橋”。上部多殘留褐色鱗葉，頂端常留有殘余的莖或葉柄。質(zhì)硬，斷面不整齊，皮部橙紅色或暗棕色，木部鮮黃色或橙黃色，呈放射狀排列，髓部有的中空。氣微，味極苦。雅連多為單枝，略呈圓柱形，微彎曲，長4～8cm，直徑0.5～lcm?！斑^橋”較長。頂端有少許殘莖。黃連分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)一等品：根條粗壯肥實(shí)，以根條無“過橋”，外表無糊黑焦?fàn)€、折斷、須根，根莖頭部無“青樁”（即葉柄殘基），斷面內(nèi)心金黃色。二等品：根條稍細(xì)小，兩端或一端有“過江枝”，肉身較枯瘦，有少數(shù)青樁，須根未完全去凈，干燥。三等品：根莖細(xì)小，枯瘦和短小，并有“青樁”存在，有須根及“過江枝”摻雜。5.2.2炮制加工研究結(jié)果味連(1)凈制：取原藥材，除去雜質(zhì)，搶水洗凈，潤透，切薄片，晾干。或用時(shí)搗碎。(2)酒黃連：取黃連片，用黃酒拌勻，悶潤至酒被吸盡，置炒藥鍋內(nèi)，用文火加熱，炒干，取出放涼。黃連片每100千克用黃酒12.5千克(3)姜黃連：取黃連片，用姜汁拌勻，悶潤至姜汁被吸盡，置炒藥鍋內(nèi)，用文火加熱，炒干，取出放涼。黃連片每100千克，用生姜12.5千克搗汁或干姜4千克煎汁。(4)萸黃連：取凈吳茱萸，加水適量，煎煮半小時(shí)，去渣取汁拌入黃連片中，悶潤至吳茱萸汁被吸盡，置炒藥鍋內(nèi)，用文火加熱，炒干，取出放涼。黃連片每100千克用吳茱萸1