抗體的免疫反應(yīng)是現(xiàn)今已知的最精妙復(fù)雜的身體抵御外部物質(zhì)的系統(tǒng)。入侵物稱作抗原，由于蛋白質(zhì)和糖類等任何物質(zhì)都可以成為抗原，抗原的形式是無限的?？贵w的免疫反應(yīng)是現(xiàn)今已知的最精妙復(fù)雜的身體抵御外部物質(zhì)的系統(tǒng)1抗體可與抗原選擇性的反應(yīng)，由于DNA中的遺傳信息控制蛋白質(zhì)合成，一個生物體有必要包含所有抗體的信息嗎?是否是由幾十億條遺傳信息合成幾十億種抗體來抵抗幾十億種抗原?人類僅有幾萬基因，容不下如此巨大的數(shù)量?？贵w可與抗原選擇性的反應(yīng)，由于DNA中的遺傳信息控制蛋白質(zhì)合2與抗體有關(guān)的諾貝爾獎獲得者1901vonBering血清治療1908Ehrlich&Metchnikoff抗體生成、吞噬1972Edelman&Poter抗體分子結(jié)構(gòu)1977Yalow放射免疫測定1984Koler,Milstein&Jerne單克隆抗體1987TonegawaIg基因結(jié)構(gòu)與抗體有關(guān)的諾貝爾獎獲得者1901vonBering血清治3抗體（Antibody）抗體4第一節(jié)

免疫球蛋白與抗體第一節(jié)

免疫球蛋白與抗體5抗體是B細(xì)胞受抗原刺激后,增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的一種能與相應(yīng)抗原結(jié)合、具有免疫功能的球蛋白。1、抗體（antibody,Ab)免疫學(xué)教研室1、抗體（antibody,Ab)免疫學(xué)教研室62、免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)是指存在于人和動物血液（血清）組織液及其它分泌液中的一類具有相似結(jié)構(gòu)的球蛋白。依據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原性的差異，免疫球蛋白可分為IgG、IgM、IgA、IgE和IgD免疫學(xué)教研室2、免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)是指存7電泳分為四個部分:白蛋白(albumin)、

α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白。

電泳分為四個部分:8

免疫球蛋白是化學(xué)結(jié)構(gòu)上的概念抗體是生物學(xué)功能上的概念抗體都是免疫球蛋白并非所有的免疫球蛋白都是抗體(比如membranesurfaceimmunoglobulin,SmIg)3.Ab與Ig的區(qū)別免疫學(xué)教研室免疫球蛋白是化學(xué)結(jié)構(gòu)上的概念3.Ab與Ig的區(qū)別免疫學(xué)9第二節(jié)

免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)

免疫學(xué)教研室第二節(jié)

免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)免疫學(xué)教研室10一、基本結(jié)構(gòu)

所有種類免疫球蛋白的單體分子結(jié)構(gòu)都是相似的，即是由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈四條肽鏈經(jīng)二硫鍵連接構(gòu)成的‘‘Ｙ’’字形分子。免疫學(xué)教研室一、基本結(jié)構(gòu)所有種類免疫球蛋白的單體分子結(jié)構(gòu)都是相11動物免疫學(xué)-抗體ppt課件12(一)重鏈與輕鏈重鏈（heavychain)

簡稱H鏈：分子量55～75ku，由420-440個氨基酸組成。根據(jù)重鏈抗原性的不同，可將其分為α、γ、μ、δ、ε五種，據(jù)此將免疫球蛋白分為五類，分別為：IgA、IgG、IgM、IgD、IgE。免疫學(xué)教研室(一)重鏈與輕鏈重鏈（heavychain)簡稱H鏈：13(一)重鏈與輕鏈輕鏈（lightchain）簡稱L鏈：分子量22.5ku，由213-214個氨基酸組成?？煞譃棣舒溂唉随渻煞N。天然Ig分子中，重鏈同類，輕鏈同型，因此我們可以將Ig分為五類十型。免疫學(xué)教研室(一)重鏈與輕鏈輕鏈（lightchain）簡稱L鏈：分14(二)可變區(qū)與恒定區(qū)可變區(qū)（variableregion）簡稱V區(qū)，位于L鏈靠近N端的1/2和H鏈的1/4，這個區(qū)段的氨基酸組成及排列順序是可以變化的。恒定區(qū)（Constantregion）簡稱C區(qū)，位于L鏈靠近C端的1/2和H鏈靠近C端的3/4區(qū)域，這一區(qū)域的氨基酸組成和排列順序比較穩(wěn)定，所以叫恒定區(qū)。免疫學(xué)教研室(二)可變區(qū)與恒定區(qū)可變區(qū)（variableregion）15動物免疫學(xué)-抗體ppt課件16(三)高變區(qū)與骨架區(qū)高變區(qū)（hypervariableregion）簡稱HVR或HR，是V區(qū)中氨基酸的組成和排列順序變化頻率更高的區(qū)域，也是抗體與抗原特異性結(jié)合的部位，又稱為決定簇互補區(qū)（CDR），又是Ig分子獨特型決定簇主要存在的部位。

其中重鏈有4個高變區(qū)，輕鏈有3個高變區(qū)。

免疫學(xué)教研室(三)高變區(qū)與骨架區(qū)高變區(qū)（hypervariabler17(三)高變區(qū)與骨架區(qū)重鏈：31－37，51－58，84－91，101－110輕鏈：26－32，48－55，90－95

免疫學(xué)教研室(三)高變區(qū)與骨架區(qū)重鏈：31－37，51－58，8418動物免疫學(xué)-抗體ppt課件19(三)高變區(qū)與骨架區(qū)骨架區(qū)（frameworkregion,Fr）：V區(qū)以外的部位，穩(wěn)定HVR的結(jié)構(gòu)。免疫學(xué)教研室(三)高變區(qū)與骨架區(qū)免疫學(xué)教研室20(四)鉸鏈區(qū)絞鏈區(qū)（Hingeregion

）位于CH1與CH2之間，含有豐富的脯氨酸，具有很好的彈性，可以自由展開至180度。易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。免疫學(xué)教研室(四)鉸鏈區(qū)免疫學(xué)教研室21動物免疫學(xué)-抗體ppt課件22二、功能區(qū)

Ig分子的H鏈和L鏈可通過鏈內(nèi)二硫鍵折疊成若干個球形結(jié)構(gòu)，每一個球形結(jié)構(gòu)由110個氨基酸組成，具有一定的生理功能，稱為功能區(qū)二、功能區(qū)Ig分子的H鏈和L鏈可通過鏈內(nèi)二硫鍵折疊成若23動物免疫學(xué)-抗體ppt課件24二、功能區(qū)Ig分子的H鏈和L鏈可通過鏈內(nèi)二硫鍵折疊成若干個球形結(jié)構(gòu)，每一個球形結(jié)構(gòu)由110個氨基酸組成，具有一定的生理功能，稱為功能區(qū)免疫學(xué)教研室二、功能區(qū)免疫學(xué)教研室25二、功能區(qū)IgG,IgA,IgD:Lchain:VL,CLHchain:VH,CH1,CH2,CH3IgM,IgE:Lchain:VL,CLHchain:VH,CH1,CH2,CH3,CH4免疫學(xué)教研室二、功能區(qū)免疫學(xué)教研室26動物免疫學(xué)-抗體ppt課件27二、功能區(qū)VL,VH:高變區(qū):與抗原特異性結(jié)合部位CL和CH1:同種異型的遺傳標(biāo)記CH2,CH3(IgM):補體C1q結(jié)合點，激活補體IgGCH2:通過胎盤IgGCH3:與單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞、B細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合。免疫學(xué)教研室二、功能區(qū)免疫學(xué)教研室28二、功能區(qū)VL,VH:高變區(qū):與抗原特異性結(jié)合部位IgECH2和CH3：與肥大細(xì)胞和嗜堿性性粒細(xì)胞表面的IgEFc結(jié)合鉸鏈區(qū)：適于V區(qū)同抗原的結(jié)合。含大量脯氨酸，富有彈性和伸展性，能使Ab與不同距離的抗原決定簇結(jié)合，也利于暴露補體結(jié)合位點。免疫學(xué)教研室二、功能區(qū)免疫學(xué)教研室29三、水解片段與生物活性三、水解片段與生物活性30動物免疫學(xué)-抗體ppt課件31三、水解片段與生物活性（一）經(jīng)木瓜蛋白酶(Papain)水解后形成兩個相同的F(ab)和１個Fc兩個片段。F(ab)—結(jié)合抗原Fc——有多種生物學(xué)活性，結(jié)合補體、固定細(xì)胞、通過胎盤等。免疫學(xué)教研室三、水解片段與生物活性（一）經(jīng)木瓜蛋白酶(Papain)水解32動物免疫學(xué)-抗體ppt課件33三、水解片段與生物活性（二）胃蛋白酶(Pepsin)作用于絞鏈區(qū)的第一個二硫鍵的下方酶解后形成F(ab’)2及pFc’兩個片段。F(ab’)2——具有雙價抗體活性,與抗原結(jié)合后能形成沉淀或凝集。pFc’——小分子多肽碎片，不具有任何生物學(xué)活性。免疫學(xué)教研室三、水解片段與生物活性（二）胃蛋白酶(Pepsin)作用于34免疫學(xué)教研室免疫學(xué)教研室35動物免疫學(xué)-抗體ppt課件36四、免疫球蛋白的特殊分子結(jié)構(gòu)(一)連接鏈（Joiningchain，

J鏈）由漿細(xì)胞合成的一種糖蛋白。IgA和IgM含有J鏈可穩(wěn)定Ig多聚體的成份免疫學(xué)教研室四、免疫球蛋白的特殊分子結(jié)構(gòu)(一)連接鏈（Joining37四、免疫球蛋白的特殊分子結(jié)構(gòu)（2）分泌片(secretorycomponent)是分泌型IgA(sIgA）的一個輔助成分，由粘膜上皮細(xì)胞合成和分泌。保護sIgA的鉸鏈區(qū)免受蛋白酶的水解破壞介導(dǎo)IgA二聚體的轉(zhuǎn)運免疫學(xué)教研室四、免疫球蛋白的特殊分子結(jié)構(gòu)（2）分泌片(secretory38第三節(jié)

免疫球蛋白的種類和抗原性第三節(jié)

免疫球蛋白的種類和抗原性391、免疫球蛋白的種類：免疫球蛋白可分為類、亞類、型、亞型及亞群等。1、免疫球蛋白的種類：免疫球蛋白可分為類、亞類、型、亞型及亞40分類：根據(jù)CH上同種型決定簇的不同，將Ig分為IgG、IgM、IgA、IgD、IgE五類亞類：IgG:G1、G2、G3、G4IgA:A1、A2IgM:IgM1和IgM2分型：根據(jù)CL上同種型決定簇的不同：和型亞型：1、2、3、4分類：根據(jù)CH上同種型決定簇的不同，將Ig分為412、免疫球蛋白的抗原性

同種型：指同一物種內(nèi)所有個體共有的Ig的抗原特異性結(jié)構(gòu)。同種型抗原決定簇存在于Ig的CH、CL區(qū)。

同種異型：指同一物種內(nèi)不同個體間的Ig在抗原性上的差異。同種異型抗原決定簇存在于Ig的CH1、CL區(qū)的特定部位。獨特型：同一個體內(nèi)不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的IgV區(qū)的抗原特異性各不相同，其超變區(qū)各自具備的獨特抗原決定簇結(jié)構(gòu)，稱為抗體的獨特型。獨特型決定簇存在于Ig的高變區(qū)2、免疫球蛋白的抗原性同種型：指同一物種內(nèi)所有個體共有42第四節(jié)

各類免疫球蛋白的主要特性與功能第四節(jié)

各類免疫球蛋白的主要特性與功能43動物免疫學(xué)-抗體ppt課件441．IgG：（單體）（1）分4個亞類（2）血清含量最高，持續(xù)時間長，主力免疫（3）出生后3月開始合成，半衰期長21天左右（4）唯一通過胎盤的Ig（5）丙種球蛋白的主要成分（6）抗感染、抗腫瘤、超敏反應(yīng)1．IgG：（單體）452．IgM：（五聚體或單體）（1）分子量最大（2）合成最早、但持續(xù)時間短，早期抗感染免疫（3）具有強大的調(diào)理、激活補體及殺菌作用（4）血型抗體主要為IgM（5）參與自身免疫、超敏反應(yīng)單體IgM：SmIgM為B細(xì)胞最早出現(xiàn)的重要表面標(biāo)志

2．IgM：（五聚體或單體）463.IgA：血清型IgA：單體，存在于血清中，免疫作用弱分泌型IgA：雙體、三體及多體（1）粘膜免疫：存在于乳汁、唾液及外分泌液中（2）局部免疫、激活補體（替代途徑）、ADCC3.IgA：474．IgD：（1）血清含量極低，極不穩(wěn)定，易降解（2）B細(xì)胞的重要表面標(biāo)志，與免疫記憶有關(guān)（3）防止免疫耐受的發(fā)生4．IgD：485．IgE：（1）正常時含量極低（0.002%）（2）抗寄生蟲免疫，參與超敏反應(yīng)5．IgE：49第五節(jié)抗體的制備第五節(jié)抗體的制備50一、人工制備抗體的種類多克隆抗體：采用傳統(tǒng)的免疫方法，將抗原物質(zhì)經(jīng)不同的途徑進(jìn)入動物體內(nèi)，經(jīng)數(shù)次免疫后采取動物血液，分離出血清，由此獲得的抗血清即為多克隆抗體。單克隆抗體：由一個B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的抗體，稱單克隆抗體由一個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生。識別一種抗原表位。高度均一（結(jié)構(gòu)、特異性）。雜交瘤技術(shù)制備?；蚬こ炭贵w：利用基因工程技術(shù)來制備的抗體分子稱為基因工程抗體，是分子水平的抗體。一、人工制備抗體的種類多克隆抗體：采用傳統(tǒng)的免疫方法，將抗原51雜交瘤抗體技術(shù)的基本原理：脾淋巴細(xì)胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養(yǎng)基中生長，小鼠骨髓瘤細(xì)胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交才具有持續(xù)增殖的能力，形成同時具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。其原理從下列幾個主要步驟闡明。雜交瘤抗體技術(shù)的基本原理：52單克隆抗體的制備1、B細(xì)胞制備2、骨髓瘤細(xì)胞制備3、飼養(yǎng)細(xì)胞的制備4、選擇培養(yǎng)基5、細(xì)胞融合6、檢測抗體7、雜交細(xì)胞瘤克隆化8、單克隆抗體的生產(chǎn)單克隆抗體的制備1、B細(xì)胞制備53動物免疫學(xué)-抗體ppt課件54脾細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞脾細(xì)胞/脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞/骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞脾細(xì)胞不能長期存活不能長期存活HAT培養(yǎng)基篩選B淋巴細(xì)胞：HGPRT+，

TK+骨髓瘤細(xì)胞：HGPRT-，

TK-存活死亡脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞脾細(xì)胞/脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞/骨髓瘤5513%