環(huán)境儀器分析第七章高效液相色譜法第1頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)概述高效液相色譜法：以氣相色譜為基礎(chǔ)，在經(jīng)典液相色譜實(shí)驗(yàn)和技術(shù)基礎(chǔ)上建立的一種液相色譜法一、HPLC與經(jīng)典LC區(qū)別二、HPLC與GC差別三、高效液相色譜的特點(diǎn)四、高效液相色譜的局限性第2頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、HPLC與經(jīng)典LC區(qū)別主要區(qū)別：固定相差別，輸液設(shè)備和檢測(cè)手段1．經(jīng)典LC：僅做為一種分離手段

柱內(nèi)徑1~3cm，固定相粒徑>100μm且不均勻常壓輸送流動(dòng)相柱效低（H↑，n↓）分析周期長(zhǎng)無(wú)法在線檢測(cè)2．HPLC：分離和分析

柱內(nèi)徑2~6mm，固定相粒徑<10μm（球形，勻漿裝柱）高壓輸送流動(dòng)相柱效高（H↓，n↑）分析時(shí)間大大縮短可以在線檢測(cè)第3頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第4頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、HPLC與GC差別相同：兼具分離和分析功能，均可以在線檢測(cè)主要差別：分析對(duì)象的差別和流動(dòng)相的差別1．分析對(duì)象

GC：在操作溫度下能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品，高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品不可檢測(cè)占有機(jī)物的20%

HPLC：溶解后能制成溶液的樣品，不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制分子量大、難氣化、不易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差及高聚物和離子型樣品均可檢測(cè)用途廣泛，占有機(jī)物的70~80%第5頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第6頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前2．流動(dòng)相差別GC：流動(dòng)相為惰性氣體組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用力，只與固定相作用

HPLC：流動(dòng)相為液體流動(dòng)相與組分間有親合作用力，為提高柱的選擇性、改善分離度增加了因素，對(duì)分離起很大作用流動(dòng)相種類較多，選擇余地廣流動(dòng)相極性和pH值的選擇也對(duì)分離起到重要作用選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相可以增大分離選擇性3．操作條件差別

GC：加溫操作

HPLC：室溫；高壓（液體粘度大，峰展寬小）第7頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前三、HPLC的特點(diǎn)

“三高”“一快”“一廣”高柱效——n=104片/米，柱效高（遠(yuǎn)高于一般LC）高靈敏度高選擇性分析速度快應(yīng)用范圍廣泛（可分析80%有機(jī)化合物）第8頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、高效液相色譜的應(yīng)用方位和局限性1、應(yīng)用范圍高效液相色譜適用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定易分解的、相對(duì)分子質(zhì)量大的、不同極性的有機(jī)化合物；生物活性物質(zhì)和多種天然產(chǎn)物；合成的和天然的高分子化合物等，包括石油化工產(chǎn)品、食品、合成藥物、生物化工產(chǎn)品及環(huán)境污染物等，約占全部有機(jī)化合物的80%。其余20%有機(jī)化合物，包括永久性氣體、易揮發(fā)低沸點(diǎn)及中等相對(duì)分子質(zhì)量的化合物，只能用氣相色譜法。第9頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、局限性

1）使用多種流動(dòng)相成本高于GC，且易引起環(huán)境污染梯度洗脫比氣象中的程序升溫操作復(fù)雜

2）缺少通用檢測(cè)器

3）不能完成組成復(fù)雜具有多種沸程的石油產(chǎn)品的分析（毛細(xì)管氣象色譜法分析）

4）也不能替代中低壓色譜法第10頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)高效液相色譜的分離原理與分類一、液相色譜分離原理

固定相：吸附劑、化學(xué)鍵和固定相、離子交換樹(shù)脂或多孔凝膠流動(dòng)相：各種溶劑被分離的混合物由流動(dòng)相液體推動(dòng)進(jìn)入色譜柱。根據(jù)各組分在固定相及流動(dòng)相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。色譜分離的實(shí)質(zhì)是樣品分子（溶質(zhì)）與溶劑（流動(dòng)相或洗脫液）以及固定相分子間的作用，作用力大小決定色譜過(guò)程的保留行為。第11頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月不同組分在兩相間的吸附、分配、離子交換、親和力或分子尺寸等性質(zhì)存在微小差別，經(jīng)過(guò)連續(xù)多次在兩相間的質(zhì)量交換，這種性質(zhì)微小差別被疊加、放大，最終得到分離。不同組分性質(zhì)上的微小差別是色譜分離的根本---必要條件在兩相間進(jìn)行了上千次甚至上百萬(wàn)次的質(zhì)量交換，是色譜分離的充分條件第12頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、高效液相色譜的分類

1.液固色譜（LSC）通常也稱吸附色譜法。分離原理是根據(jù)固定相對(duì)組分吸附力大小不同。依靠流動(dòng)相溶劑分子與溶劑分子競(jìng)爭(zhēng)固定相活性位置，從而是溶質(zhì)從色譜柱上洗脫下來(lái)。與硅膠表面活性位置結(jié)合力強(qiáng)的溶劑洗脫溶質(zhì)分子的能力強(qiáng)，稱強(qiáng)溶劑。常用吸附劑：硅膠或氧化鋁，5~10um

適用于相對(duì)分子質(zhì)量200~1000的組分大多數(shù)屬于非離子型化合物

第13頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前2．固定相：與LC比，固定相粒徑不同（<10μm）

（2）高分子多孔小球：YSG

原理：吸附+分配蒹小孔凝膠作用特點(diǎn)：柱選擇性好，峰形好，柱效低適用：分離弱極性化合物（1）硅膠表孔硅膠（薄殼硅膠）全多孔硅膠無(wú)定形YWG5~6μm5×104

球形YQG3~4μm8×108

堆積硅珠YQG3~4μm8×108

理想

原理：吸附特點(diǎn)：峰易拖尾適用：分離極性化合物第14頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前3．流動(dòng)相：底劑（烷烴）+有機(jī)極性調(diào)節(jié)劑

例：正己烷或庚烷+氯仿---4．影響k的因素：與固定相性質(zhì)和流動(dòng)相性質(zhì)有關(guān)溶質(zhì)分子極性↑，洗脫能力↓，k↑，tR↑

溶劑系統(tǒng)極性↑，洗脫能力↑，k↓，tR↓注：調(diào)節(jié)溶劑極性，可以控制組分的保留時(shí)間5．出柱順序：強(qiáng)極性組分后出柱，弱極性組分先出柱對(duì)具有不同官能團(tuán)的化合物和異構(gòu)體有較高的選擇性對(duì)同系物（即分子量大?。┑倪x擇性分離弱。常用于分離同分異構(gòu)體，可用于脂溶性化合物的分析，如磷脂、甾體化合物、脂溶性維生素第15頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.液液色譜法（LLC）

其流動(dòng)相和固定相都是液體，固定相是通過(guò)化學(xué)鍵合的方式固定在基質(zhì)（惰性載體）上的。分離原理：根據(jù)各組分在固定相與流動(dòng)相中的相對(duì)溶解度（分配系數(shù)）的差異進(jìn)行分離，分離過(guò)程是一個(gè)分配平衡過(guò)程。理論上說(shuō)，流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶第16頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月?lián)霉潭ㄒ号c流動(dòng)相液體極性的差異，液-液分配色譜可分為正相色譜和反相色譜。正相色譜：固定相的極性>流動(dòng)相的極性洗脫順序:按組分極性從小到大流出。流動(dòng)相溶劑：非極性疏水性溶劑，如庚烷、己烷及異辛烷。極性大的溶劑是強(qiáng)溶劑常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等調(diào)節(jié)組分的保留時(shí)間常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物（如酚類、胺類、羰基累計(jì)氨基酸類等）根據(jù)化合物在固定相及流動(dòng)相中分配系數(shù)的不同進(jìn)行分離，不適合于分離幾何異構(gòu)體第17頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月反相色譜：固定相的極性小于流動(dòng)相極性。組分的洗脫順序和正相色譜相反，極性大的組分先流出，極性小的組分后流出。固定相：共價(jià)結(jié)合到載體上的一些直鏈碳?xì)浠衔铮缯镣?。疏水性?qiáng)的化合物在色譜柱中滯留時(shí)間長(zhǎng)反相色譜法中不同的化合物因各自的疏水特性得到分離。適于分離帶有不同疏水基團(tuán)（非極性基團(tuán)）的化合物、帶有不同極性基團(tuán)的化合物反相色譜中，水在流動(dòng)相中所占比例可調(diào)，所以可用于水溶性、脂溶性化合物的分離第18頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月液-液分配色譜技術(shù)的關(guān)鍵是相體系選擇?？赏ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的極性，來(lái)獲得良好的柱效和縮短分析時(shí)間。液-液分配色譜可用于幾乎所有類型化臺(tái)物，極性的或非極性的、有機(jī)物或無(wú)機(jī)物、大分于或小分于物質(zhì)的分離，只要官能團(tuán)不同、或者官能團(tuán)數(shù)目不同、或者是分子量不同均可獲得滿意的分離。第19頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月離子交換色譜法

固定相:帶電荷的基團(tuán)常用苯乙烯和二乙烯苯交聯(lián)形成的聚合物為骨架在表面末端芳環(huán)上接上羧基、磺酸基為陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，接上季胺基為陰離子交換樹(shù)脂。按質(zhì)量作用定律，樹(shù)脂上可電離的離子與流動(dòng)性中具有相同電荷的離子及被測(cè)組分的離子進(jìn)行交換，各離子與離子交換基團(tuán)之間因具有不同的電荷吸引力而分離。主要用于可電離化合物的分離，如多肽、蛋白質(zhì)、核苷酸、核苷和各種堿基的分離等第20頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.離子對(duì)色譜

又稱偶離子色譜法。是在流動(dòng)相中加入具有與被測(cè)離子相反電荷的離子，即“離子對(duì)試劑”，使之與被測(cè)離子形成中性離子對(duì)化合物，此離子對(duì)化合物在反相色譜柱上被保留。保留的強(qiáng)弱主要取決于離子對(duì)化合物的解離平衡常數(shù)和離子對(duì)試劑的濃度主要用于分析離子強(qiáng)度大的酸堿物質(zhì)。分析堿性物質(zhì)常用的離子對(duì)試劑為烷基磺酸鹽，如戊烷磺酸鈉，辛烷磺酸鈉分析酸性物質(zhì)常用四丁基季銨鹽，如四丁基溴化銨，四丁基磷酸鹽第21頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月空間排阻色譜法（凝膠色譜法）固定相：有一定孔徑的多孔性填料流動(dòng)相：可以溶解樣品的溶劑相對(duì)分子量小的化合物可以進(jìn)入孔中，滯留時(shí)間長(zhǎng)；相對(duì)分子質(zhì)量大的化合物不能進(jìn)入孔中，直接隨流動(dòng)相流出。利用分子篩對(duì)相對(duì)分子量大小不同的個(gè)組分排阻能力的差異完成分離。缺點(diǎn)：不能分辨分子大小相近的化合物常用于分離高分子化合物，如多肽、蛋白質(zhì)、核酸等第22頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月排阻色譜分離過(guò)程模型第23頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月空間排阻色譜分離示意圖第24頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6.高效液相色譜分離類型的選擇

高效液相色譜每種分離類型都有其自身的特點(diǎn)和適用范圍，沒(méi)有一種類型可以通用于所有領(lǐng)域，它們互相補(bǔ)充。一般情況，選擇最有效的分離類型，應(yīng)考慮樣品來(lái)源，樣品的性質(zhì)（相對(duì)分子質(zhì)量、化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、化學(xué)穩(wěn)定性、溶解度參數(shù)等化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)），分析目的要求，液相色譜分離類型的特點(diǎn)及應(yīng)用范圍、實(shí)驗(yàn)室條件（儀器、色譜柱等）等一系列因素。第25頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月液相色譜分離類型選擇參考表第26頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)基本理論和條件選擇熱力學(xué)理論：塔板理論——平衡理論基礎(chǔ)動(dòng)力學(xué)理論：速率理論——Vander方程一、塔板理論二、速率理論三、HPLC法中分離條件的選擇第27頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、塔板理論第28頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、速率理論（與GC對(duì)比）

1.第29頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前2）渦流擴(kuò)散項(xiàng)及其影響next2.討論：

1）流動(dòng)相流速對(duì)HPLC板高的影響（與GC對(duì)比）第30頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月圖示第31頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前3）傳質(zhì)阻抗項(xiàng)及其影響第32頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月圖示第33頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月高效液相色譜儀由以下五部分組成：高壓輸液系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)記錄系統(tǒng)（記錄儀、積分儀和色譜工作站）第四節(jié)高效液相色譜儀第34頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月高效液相色譜儀流程圖1．貯液罐（濾棒，可濾去顆粒狀物質(zhì)）2．高壓泵（輸液泵）3．進(jìn)樣裝置4．色譜柱——分離5．檢測(cè)器——分析6．廢液出口或組分收集器7．記錄裝置第35頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月高效液相色譜儀的工作過(guò)程：輸液泵將流動(dòng)相一穩(wěn)定的流速或壓力輸送到分析體系，在色譜柱之前通過(guò)進(jìn)樣器將樣品倒入，流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱，在色譜柱中各組分因在固定相中的分配系數(shù)或吸附力大小的不同而被分離，并依次隨流動(dòng)相流至檢測(cè)器，檢測(cè)到的信號(hào)送至數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄、處理或保存。第36頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1．高壓輸液系統(tǒng)：溶劑儲(chǔ)存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等。泵：按輸出液恒定的因素分恒壓泵：流量精度不穩(wěn)恒流泵：常用對(duì)泵的要求：無(wú)脈動(dòng)流速恒定流量可調(diào)耐腐蝕便于實(shí)現(xiàn)程序控制死體積小，便于測(cè)壓、調(diào)整及維護(hù)。第37頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2．進(jìn)樣裝置

包括進(jìn)樣口、注射器和進(jìn)樣閥等，作用是把分析試樣有效的送入色譜柱上進(jìn)行分離。

1）隔膜進(jìn)樣---微量注射器（高分子有機(jī)硅膠墊→進(jìn)樣室）

GC系統(tǒng)壓力較小，可以

HPLC系統(tǒng)壓力太大，必須停泵進(jìn)樣（早期）隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng)

2）閥進(jìn)樣：不必停泵，六通閥第38頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3．色譜柱：柱內(nèi)徑2~5mm,柱長(zhǎng)10~30cm

裝柱方法：干法和濕法兩種填料粒度大于20μm的可用干法裝柱；粒度小于20μm的填料不宜用干法裝柱，這是由于微小顆粒表面存在著局部電荷，具有很高的表面能，因此在干燥時(shí)傾向于顆粒間的相互聚集，產(chǎn)生寬的顆粒范圍并粘附于管壁，這些都不利于獲得高的柱效。目前，對(duì)微顆粒填料的裝柱只能采用濕法完成。濕法也稱勻漿法，即以一合適的溶劑或混合溶劑作為分散介質(zhì)，使填料微粒在介質(zhì)中高度分散，形成勻漿，然后，用加壓介質(zhì)在高壓下將勾槳壓入柱管中，以制成具有均勻、緊密填充床的高效柱。柱再生：維護(hù)、保養(yǎng)、柱子的沖洗第39頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4．檢測(cè)器

1）紫外檢測(cè)器

ultraviolet-visibledetector,UVD高效液相色譜儀中應(yīng)用最廣泛的一種。是一種靈敏度和檢測(cè)精度都較高的選擇性濃度型檢測(cè)器。適用于在紫外可見(jiàn)區(qū)有吸收的樣品。作用原理：基于被分析樣品組分對(duì)特定波長(zhǎng)紫外光的選擇性吸收，組分濃度與吸光度的關(guān)系遵守比耳(Beer)定律。

第40頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月紫外可見(jiàn)檢測(cè)器的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn);(1)靈敏度高，最小檢測(cè)濃度可達(dá)10-8g·mL-1；

(2)選擇性好，對(duì)柱溫控制精度要求不高，對(duì)流動(dòng)相流速變化不敏感，適用梯度洗脫，對(duì)樣品無(wú)破壞性、線性范圍寬。缺點(diǎn)

(1)是對(duì)壓力變化敏感，要求用無(wú)脈沖泵；

(2)對(duì)在紫外可見(jiàn)光區(qū)無(wú)強(qiáng)吸收的組分，需要經(jīng)過(guò)衍生化，才可用紫外可見(jiàn)檢測(cè)器，如糖類、氨基酸、類酯化物等；

(3)不能用在紫外可見(jiàn)光區(qū)有吸收的溶劑作流動(dòng)相。第41頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2）示差折光檢測(cè)器

refractiveindexdetector,RID

濃度型通用檢測(cè)器。利用折光率的差別，根據(jù)流動(dòng)相中出現(xiàn)組分時(shí)，流動(dòng)相折射率發(fā)生變化而設(shè)計(jì)的。優(yōu)點(diǎn)：對(duì)所有的物質(zhì)都有響應(yīng)；靈敏度可達(dá)到10-7g·mL-1缺點(diǎn)：對(duì)溫度變化很敏感；不能用于梯度洗提脫。第42頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）電化學(xué)檢測(cè)器：electrochemicaldetector,ED

根據(jù)電化學(xué)分析方法設(shè)計(jì)的。電化學(xué)檢測(cè)器主要有兩種類型：一是根據(jù)溶液的導(dǎo)電性質(zhì)，通過(guò)測(cè)定離子溶液電導(dǎo)率的大小來(lái)測(cè)量離子濃度；另一類是根據(jù)化合物在電解池中工作電極上所發(fā)生的氧化-還原反應(yīng)，通過(guò)電位、電流和電量的測(cè)量，確定化合物在溶液中的濃度。電導(dǎo)檢測(cè)器是根據(jù)被測(cè)組分被淋洗下來(lái)后，流動(dòng)相電導(dǎo)率發(fā)生變化的原理而設(shè)計(jì)的。它僅適用于水溶性流動(dòng)相中離子型化合物的檢測(cè)，也是一種選擇性檢測(cè)器。缺點(diǎn)是靈敏度不高，對(duì)溫度敏感，需配以好的溫控系統(tǒng)，且不適于梯度淋洗。第43頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4）熒光檢測(cè)器（F1uorescenceDetector，F(xiàn)D）基于物質(zhì)經(jīng)紫外光照射后，發(fā)射出較原激發(fā)光波長(zhǎng)長(zhǎng)的二次（熒）光。在一定條件下熒光的強(qiáng)度與溶液中產(chǎn)生熒光物質(zhì)的濃度成正比。熒光檢測(cè)器為選擇性檢測(cè)器。有兩種類型的化合物可用其檢測(cè)：

(1)它們自身發(fā)射熒光;(2)通過(guò)衍生的方法使原來(lái)不發(fā)射熒光的化合物發(fā)射熒光.

很多生物活性物質(zhì)、藥物制品、環(huán)境污染物自身都能發(fā)射熒光。熒光檢測(cè)器由于具有很高的靈敏度和選擇性，因而成為液相色譜常用檢測(cè)器之一。但其適用范圍窄，應(yīng)用有一定局限性。第44頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第五節(jié)影響分離的因素1．第45頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前2．對(duì)流動(dòng)相的要求：1）與固定液不反應(yīng)2）對(duì)樣品有良好溶解度

k=1~10k=2~5最理想的3）與檢測(cè)器匹配：

UV（常用，測(cè)定波長(zhǎng)應(yīng)大于溶劑的截止波長(zhǎng)）熒光，電化學(xué)4）使用粘度小、純度高的流動(dòng)相（甲醇，乙腈）使用前過(guò)濾、脫氣第46頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月續(xù)前

3．洗脫方式1）等度洗脫（恒組成溶劑洗脫）以固定配比的溶劑系統(tǒng)洗脫組分（一個(gè)泵）類似GC的等溫度洗脫2）梯度洗脫：在一定分析周期內(nèi)不斷變換流動(dòng)相的種類和比例即不斷改變其極性（兩個(gè)泵）適于分析極性差別較大的復(fù)雜組分類似GC的程序升溫（沸程較長(zhǎng)樣品）第47頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月圖示第48頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第六節(jié)高效液相色譜法

在環(huán)境中的應(yīng)用1903年自Tswett開(kāi)創(chuàng)色譜法以來(lái)，Tames和Martin、Kirkland和Small相繼報(bào)道了氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）和離子色譜法（IC）。在已知大約存在300萬(wàn)種以上的化合物中，適于GC有效地進(jìn)行分析的揮發(fā)性、熱穩(wěn)定的化合物占20%左右，而HPLC可分析揮發(fā)性低、易受熱分解、離子型或大分子（分子量大于300以上）的化合物約占80%左右。離子色譜法可同時(shí)測(cè)定多種陰離子、陽(yáng)離子和有機(jī)陰離子,優(yōu)于電化學(xué)法和原子吸收法。色譜法在環(huán)境監(jiān)測(cè)分析中已占有主導(dǎo)地位。第49頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月高效液相色譜法是吸取了氣相色譜和經(jīng)典液相色譜的優(yōu)點(diǎn)，用現(xiàn)代化的手段加以改進(jìn)，已得到廣泛應(yīng)用,特別適用于分子量大、揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差的有機(jī)污染物的分離和分析。如多環(huán)芳烴類、酚類、多氯聯(lián)苯、鄰苯二甲酸酯類、聯(lián)苯胺類、陰離子和非離子表面活性劑、有機(jī)農(nóng)藥、除草劑等。第50頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月環(huán)境樣品，無(wú)論是水質(zhì)、大氣、土壤或生物物質(zhì)，大都具有成分復(fù)雜、分析對(duì)象多、含量低等特點(diǎn)，某些本底值甚至只有ppt級(jí)；樣品性質(zhì)一般不夠穩(wěn)定，需要快速連續(xù)測(cè)定。HPLC具有高效、快速、靈敏度高、選擇性好等特點(diǎn)，特別適用于分離高沸點(diǎn)、難揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差的高分子化合物，能滿足環(huán)境分析的這些要求，特別是對(duì)有機(jī)污染物的分析，更是其它分析手段難以比擬的。同時(shí)，離子色譜法的迅速發(fā)展，使得高效液相色譜法在測(cè)定有機(jī)和無(wú)機(jī)陰離子方面取得很好的成效。因此近年來(lái)高效液相色譜在大氣、水質(zhì)、土壤、生物等環(huán)境監(jiān)測(cè)中得到了廣泛地應(yīng)用和發(fā)展。第51頁(yè)，課件共55頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月大氣、降水、廢氣等監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用