臨床微生物學檢驗標本的采集臨床微生物學檢驗標本的采集第1頁標本采集標準發(fā)覺感染應及時采集微生物標本作病原學檢驗。盡可能在抗菌藥品使用前，或停藥一周后采集標本，如不能停用抗菌藥品，應于下次抗菌藥品應用前采集。應在感染急性期或傷口局部治療前采集標本。選擇正確解剖部位，并以適當技術、方法與容器搜集足量標本。臨床微生物學檢驗標本的采集第2頁采樣時應嚴格執(zhí)行無菌操作，將污染情形降至最低。搜集真正感染病灶處標本，且防止鄰近區(qū)域常居菌群污染。采取專用無菌容器搜集標本。標本中不可添加防腐劑。采樣后應馬上送檢，最好在2h內。如不能及時送檢，應將標本置于適當儲存環(huán)境待送，但存放普通不能超出24h。臨床微生物學檢驗標本的采集第3頁血液

血培養(yǎng)是把靜脈穿刺取得血液接種到一個或多個培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)管中，用來發(fā)覺、識別細菌或其它可培養(yǎng)分離微生物（如大腸桿菌、念珠菌屬、霉菌屬等），這些微生物存在于血液中形成菌血癥或真菌菌血癥。臨床微生物學檢驗標本的采集第4頁血樣采集和培養(yǎng)瓶接種采血指征①發(fā)燒（≥38℃）或低溫（≤36℃）②寒戰(zhàn)③白細胞增多（＞10×109/L，尤其有“核左移”未成熟或帶狀白細胞增多）④粒細胞降低（成熟多核白細胞＜1×109/L）⑤血小板降低臨床微生物學檢驗標本的采集第5頁⑥皮膚、粘膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭⑨血壓降低⑩呼吸加緊同時具備上述幾個臨床

表現(xiàn)時應采集血培養(yǎng)臨床微生物學檢驗標本的采集第6頁皮膚消毒程序嚴格執(zhí)行以下三步法：70%乙醇擦拭靜脈穿刺部位30s以上1%～2%碘酊作用30s或10%碘伏60s，從穿刺點向外圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達3cm以上70%乙醇脫碘：對碘過敏患者，用70%乙醇消毒60s，待乙醇揮發(fā)干燥后采血臨床微生物學檢驗標本的采集第7頁采血部位肘靜脈肘動脈或股動脈骼前（后）上棘臨床微生物學檢驗標本的采集第8頁靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在靜脈穿刺前或穿刺期間，為預防靜脈滑動，可戴乳膠手套固定靜脈，但不可接觸穿刺點用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭直接注入血培養(yǎng)瓶血標本接種血培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。馬上送檢，切勿冷藏！臨床微生物學檢驗標本的采集第9頁采血量成人：8～10ml/瓶兒童：1～5ml/瓶標本運輸采血后應馬上送檢，或室溫保留，切勿冷藏！臨床微生物學檢驗標本的采集第10頁采血次數(shù)和采血時間只要懷疑血液感染，即刻采集盡可能在使用抗菌藥品之前采集24h內采集2～3次血培養(yǎng)使用抗菌藥品患者選取能中和或吸附抗菌藥品培養(yǎng)基間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)燒：寒戰(zhàn)或發(fā)燒高峰到來之前0.5～1h、寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h采血臨床微生物學檢驗標本的采集第11頁可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關節(jié)炎或肺炎，應在不一樣部位采集2～3份血標本。不明原因發(fā)燒，先采集2～3份血標本，24～36h后預計體溫升高之前再采集2份以上?？梢删Y或真菌菌血癥，但血培養(yǎng)連續(xù)陰性，應改變血培養(yǎng)方法，以取得罕見或苛養(yǎng)微生物?？梢杉毦孕膬饶ぱ?，在1～2h內采集3份血標本，假如24h后陰性，再采集2份血標本。特殊全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)提議臨床微生物學檢驗標本的采集第12頁常見病原體G+球菌：葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌G+桿菌：結合分枝桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌、陰道加特納菌G-球菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌G-桿菌：大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動桿菌、嗜肺軍團菌、嗜血桿菌真菌：念珠菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌：擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌臨床微生物學檢驗標本的采集第13頁概念：少許細菌侵入血液循環(huán)，為一過性，不繁殖或極少繁殖，不引發(fā)或僅引發(fā)輕微炎癥反應。有菌血癥患者，不一定會出現(xiàn)臨床癥狀，也不一定需要抗生素治療。

菌血癥（bacteremia

）臨床意義臨床微生物學檢驗標本的采集第14頁依據(jù)細菌進入血液機制不一樣，可分為暫時性菌血癥：通常為人體正常菌群進入到血液中。間歇性菌血癥：細菌來自血管外臟器、組織或擴散性感染(化膿性關節(jié)炎、腹膜炎、蜂窩組織炎)，斷斷續(xù)續(xù)將細菌釋放到血液之中。連續(xù)性菌血癥：通常為感染源直接感染血液系統(tǒng)。多數(shù)菌血癥發(fā)生原因不明臨床微生物學檢驗標本的采集第15頁膿毒癥（sepsis）概念：血液或其它組織因致病菌或其毒素而產(chǎn)生全身性炎癥反應表現(xiàn)。血液培養(yǎng)是診療菌血癥基礎而主要方法，若從患者血液中檢出細菌，普通視為病原菌感染，提醒有菌血癥。臨床微生物學檢驗標本的采集第16頁血液感染特點危重全身感染耐藥菌、條件致病菌、非致病菌感染顯著增多死亡率高正常人血液無菌臨床微生物學檢驗標本的采集第17頁常見菌血癥或膿毒癥葡萄球菌菌血癥病原體：MRSA及凝固酶陰性葡萄球菌特點：臨床表現(xiàn)顯著、發(fā)病急、中毒癥狀重常由原發(fā)感染灶繼發(fā)為菌血癥和膿毒癥，也可由呼吸道感染引發(fā)?？梢疬w徙性損害，并發(fā)心內膜炎等臨床微生物學檢驗標本的采集第18頁腸球菌菌血癥病原體：腸球菌特點：常見于泌尿生殖道、消化道和腹腔感染病人易并發(fā)心內膜炎常對各種抗菌藥品耐藥，病情較重臨床微生物學檢驗標本的采集第19頁革蘭陰性桿菌菌血癥病原體：革蘭氏陰性桿菌特點：主要侵犯危及機體免疫功效低下病人常引發(fā)泌尿生殖道、胃腸道、膽道及呼吸道感染大面積燒傷及嚴重創(chuàng)傷病人可發(fā)生銅綠假單胞菌菌血癥感染嚴重者可引發(fā)感染性休克和DIC，甚至出現(xiàn)多臟器功效衰竭臨床微生物學檢驗標本的采集第20頁厭氧菌菌血癥病原體：厭氧菌（常見脆弱擬桿菌）特點常合并需氧菌感染，臨床癥狀較重而復雜常引發(fā)口腔、腸道、泌尿生殖道感染肝硬化、糖尿病、尿毒癥、惡性腫瘤和新生兒易發(fā)生厭氧菌敗血癥臨床微生物學檢驗標本的采集第21頁真菌血癥病原體：真菌特點：多數(shù)伴有細菌感染主要發(fā)生于菌群失調患者?？刹ド⒗奂案?、肺、和心內膜等臨床微生物學檢驗標本的采集第22頁采集方法腰椎穿刺術小腦延髓池穿刺術腦室穿刺術腦脊液臨床微生物學檢驗標本的采集第23頁采集量：1～3ml送檢要求置無菌管內馬上送檢，不超出1h。特殊培養(yǎng)保溫送檢或床旁接種。儲存條件馬上接種，勿置冰箱病毒檢驗標本應放置冰塊，可在4℃保留72h。臨床微生物學檢驗標本的采集第24頁常見病原體革蘭陽性菌革蘭陰性菌病毒真菌及其它肺炎鏈球菌B群鏈球菌A群鏈球菌消化鏈球菌結核分枝桿菌產(chǎn)單核李斯特菌炭疽芽胞桿菌葡萄球菌腦膜炎奈瑟氏菌大腸埃希氏菌銅綠假單胞菌卡他布蘭漢菌擬桿菌不動桿菌肺炎克雷伯菌流感嗜血桿菌乙型腦炎病毒柯薩奇病毒A柯薩奇病毒B脊髓灰質炎病毒新腸道病毒68～71狂犬病毒新型隱球菌白色假絲酵母菌鉤端螺旋體臨床微生物學檢驗標本的采集第25頁臨床意義正常人腦脊液無菌病原體經(jīng)過血腦屏障進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)引發(fā)感染引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染原因、病原體種類不停增多，發(fā)病率逐年增加診療和治療較為困難臨床微生物學檢驗標本的采集第26頁細菌性腦膜炎中樞神經(jīng)系統(tǒng)嚴重感染性疾病流行性腦脊髓膜炎由腦膜炎奈瑟菌引發(fā)化膿性腦膜炎為法定傳染病有呈暴發(fā)型，病情嚴重，病死率高多發(fā)年紀在5～29歲，冬春季多見結核性腦膜炎：現(xiàn)在因為盛行接種卡介苗和大力開展結核病防治，本病發(fā)病率較過去顯著下降臨床微生物學檢驗標本的采集第27頁真菌性腦膜炎病原體：真菌特點：隱球菌腦膜炎最常見免疫功效低下和惡性疾病患者易并發(fā)常合并其它病原菌感染臨床微生物學檢驗標本的采集第28頁流行性乙型腦炎病原體：乙型腦炎病毒特點：人獸共患自然疫源性疾病病情嚴重、病死率高、可留有后遺癥傳染源：患病者、家禽、家畜及野生動物傳輸媒介：蚊蟲人群普遍易感多為隱性感染，可取得持久免疫力臨床微生物學檢驗標本的采集第29頁腸道病毒引發(fā)腦膜炎及腦炎脊髓灰質炎：因為疫苗廣泛使用，脊髓灰質炎當前已基礎毀滅新腸道病毒可造成中樞神經(jīng)系統(tǒng)嚴重損害，也可留下嚴重后遺癥臨床微生物學檢驗標本的采集第30頁膿液臨床微生物學檢驗標本的采集第31頁標本采集癥狀指征局部癥狀全身癥狀疾病指征軟組織急性化膿性炎癥化膿性疾病膿腫創(chuàng)傷感染采集指征臨床微生物學檢驗標本的采集第32頁采集方法開放性膿腫

用無菌生理鹽水擦洗病灶表面后，用蘸有沒有菌生理鹽水滅菌拭子采取膿液和病灶深部分泌物，置無菌試管內送檢。注意盡可能取化膿組織與正常組織交界處膿汁。開放病灶不能做厭氧培養(yǎng)臨床微生物學檢驗標本的采集第33頁閉鎖膿腫

普通采取穿刺或手術引流方法采取。采集前先用2.5～3%碘酊和75%酒精消毒周圍皮膚后，用無菌注射器抽取膿液送檢。也可于切開排膿時用無菌棉拭子采樣。消毒膿腫表面皮膚后用無菌注射器抽取，刺入無菌橡皮塞中送檢臨床微生物學檢驗標本的采集第34頁燒傷傷口

生理鹽水清洗傷口，出現(xiàn)滲出物后用無菌拭子采集病灶基底部或邊緣標本，僅做需氧培養(yǎng)。也可送組織標本。膿皰或水皰酒精消毒膿皰或水皰表面及周圍皮膚干燥后用針頭挑破膿皰，無菌拭子采集膿皰液和基底部標本。臨床微生物學檢驗標本的采集第35頁厭氧菌感染標本采集針筒直接由病灶處抽取標本，床邊接種或置于厭氧運輸培養(yǎng)基內送檢。防止接觸空氣。臨床微生物學檢驗標本的采集第36頁注意事項采樣前病灶局部應防止用抗菌藥品或消毒劑，應在用藥前采取。對大多數(shù)開放傷口，采集前應先清創(chuàng)，去除表面菌群。除非有滲出物，干燥、結痂傷口普通不做培養(yǎng)。不要僅僅送檢膿液，應在病灶活動區(qū)域或基底部采集標本，最好是組織標本。臨床微生物學檢驗標本的采集第37頁標本送檢標本采集后應盡快送檢。假如在1h內不能培養(yǎng)，應將標本置于4℃冷藏。（培養(yǎng)淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌標本除外）厭氧菌培養(yǎng)標本只能放于室溫下。臨床微生物學檢驗標本的采集第38頁常見病原體G+球菌：葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、消化鏈球菌、四聯(lián)球菌G+桿菌：分枝桿菌、破傷風桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、炭疽芽胞桿菌G-球菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌G-桿菌：肺炎克雷伯菌、變形桿菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、擬桿菌、梭桿菌其他：放線菌臨床微生物學檢驗標本的采集第39頁臨床意義外傷性創(chuàng)傷感染以G+球菌多見易發(fā)生混合感染深部創(chuàng)傷極易引發(fā)破傷風和氣性壞疽等厭氧菌感染臨床微生物學檢驗標本的采集第40頁燒傷創(chuàng)面感染最常見G-桿菌感染（如銅綠假單胞菌）急性化膿性骨關節(jié)炎常由金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、淋病奈瑟菌、肺炎鏈球菌感染造成慢性化膿性骨關節(jié)炎、慢性骨髓炎常由結核分枝桿菌感染引發(fā)臨床微生物學檢驗標本的采集第41頁痰液標本采集采集指征：有以下指征時，應采集痰標本咳嗽、咳痰咯血呼吸困難發(fā)燒伴白細胞增高胸部影像學檢驗提醒有感染可能。肺部感染患者有25～50％可能發(fā)生菌血癥，應同時作血培養(yǎng)臨床微生物學檢驗標本的采集第42頁采集方法自然咳痰法以晨痰為佳，咳痰前先用清水、冷開水重復漱口，然后用力咳出呼吸道深部痰，痰液直接吐入痰盒中，1h內送檢。標本量應≥1ml。盡可能在用抗菌藥品之前采集標本。臨床微生物學檢驗標本的采集第43頁痰量少或無痰者可采取霧化吸入加溫至45℃10%NaCl水溶液，使痰液易于排出。對難于自然咳痰患者可用無菌吸痰管抽取氣管深個別泌物。合格痰標本：鱗狀上皮細胞＜10個/LP

白細胞＞25個/LP臨床微生物學檢驗標本的采集第44頁特殊器械采集法纖維支氣管鏡采集法防污染毛刷采集法（PSB）支氣管肺泡灌洗法（BAL）環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引法（TTA）經(jīng)胸壁針穿刺吸引法(TNA)臨床微生物學檢驗標本的采集第45頁小兒取痰法

用彎壓舌板向后壓舌，將棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。臨床微生物學檢驗標本的采集第46頁標本運輸

標本應盡快送檢，不能及時送檢標本，室溫保留≤2h，4℃冰箱保留≤24h。普通天天只需做1次。臨床微生物學檢驗標本的采集第47頁常見病原體細菌真菌病毒臨床微生物學檢驗標本的采集第48頁臨床意義下呼吸道感染：即肺實質性肺炎和支氣管黏膜支氣管炎，為我國常見病和病死率高感染性疾病。痰標本病原學檢驗對呼吸道感染診療與治療含有主要意義。臨床微生物學檢驗標本的采集第49頁細菌性肺炎：為下呼吸道感染最常見類型支原體肺炎真菌性肺炎病毒性肺炎臨床微生物學檢驗標本的采集第50頁糞便標本采集采集指征：當腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一個情況時提議采集糞便標本，進行細菌培養(yǎng)糞便涂片鏡檢白細胞≥5個/HP；重癥腹瀉；體溫大于38.5℃；血便；便中有膿液；未經(jīng)抗菌藥品治療連續(xù)性腹瀉患者；來自疫區(qū)患者。臨床微生物學檢驗標本的采集第51頁標本采集注意腹瀉患者盡可能在急性期和應用抗菌藥品之前采集標本；住院腹瀉成人患者，采集住院3日內糞便標本；糞便標本普通不做厭氧培養(yǎng)；在不一樣時間采集2～3份標本能夠提升致病菌分離率。臨床微生物學檢驗標本的采集第52頁采集方法自然排便法

本法為常規(guī)方法。直腸拭子法

本法只適合用于排便困難患者或嬰幼兒。組織活檢消化道潰瘍、幽門螺桿菌標本可取胃竇和胃體等部位各一塊胃黏膜活檢標本臨床微生物學檢驗標本的采集第53頁標本運輸標本應盡快送檢，不能及時送檢標本，室溫保留≤2h。活檢標本置于生理鹽水中馬上送檢，或將標本放于運輸培養(yǎng)基內，于4℃保留，≤24h。臨床微生物學檢驗標本的采集第54頁常見病原體腸毒素為主病原菌侵襲性為主病原菌病毒臨床微生物學檢驗標本的采集第55頁臨床意義細菌性痢疾細菌、真菌、病毒引發(fā)胃腸炎細菌性食物中毒致病性大腸埃希菌腸道感染消化性潰瘍幽門螺桿菌感染臨床微生物學檢驗標本的采集第56頁尿液標本采集采集指征疾病指征：①尿路感染；②腎結核；③泌尿系結石、前列腺增生；④無癥狀性菌尿臨床微生物學檢驗標本的采集第57頁癥狀指征①有經(jīng)典尿路感染癥狀；②肉眼膿尿或血尿；③尿常規(guī)檢驗表現(xiàn)為白細胞或亞硝酸鹽陽性；④不明原因發(fā)燒，無其它局部癥狀；⑤留置導尿管患者出現(xiàn)發(fā)燒；⑥膀胱排空功效受損；⑦尿道口有膿性分泌物；⑧泌尿系統(tǒng)疾病手術前。臨床微生物學檢驗標本的采集第58頁采集方法清潔中段尿法：最常見方法恥