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甘氨酸的鑒別中國(guó)藥典》中的鑒別方法:(1)取本品與甘氨酸對(duì)照品各適量,分別加水溶解并稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液,作為供試品溶液與對(duì)照品溶液。照其他氨基酸項(xiàng)下的色譜條件試驗(yàn),供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。(2)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(《藥品紅外光譜集》929圖)一致。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、 了解薄層層析的原理,掌握薄層層析的操作方法。2、 了解紅外光譜法的原理并學(xué)會(huì)操作相關(guān)的儀器。薄層色譜法:一、實(shí)驗(yàn)原理:薄層色譜是一種微量、快速和簡(jiǎn)便的色譜方法。由于各種化合物的極性不同,吸附能力不相同,在展開(kāi)劑上移動(dòng),進(jìn)行不同程度的解析,根據(jù)原點(diǎn)至主斑點(diǎn)中心及展化合物的吸附能力與它們的極性成正比,具有較大極性的化合物吸附較強(qiáng),因此Rf值較小。在給定的條件下(吸附劑、展開(kāi)劑、板層厚度等),化合物移動(dòng)的距離和展開(kāi)劑移動(dòng)的距離之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常數(shù),其大小只與化合物本身的結(jié)構(gòu)有關(guān),因此可以根據(jù)Rf值鑒別化合物。開(kāi)劑前沿的距離,計(jì)算比移值(Rf)。二、實(shí)驗(yàn)器材與試劑(1)實(shí)驗(yàn)器材>硅膠板,層析缸,毛細(xì)管,鉛筆,展開(kāi)劑,顯色劑>待測(cè)試劑溶液,甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液>丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(2)實(shí)驗(yàn)試劑TOC\o"1-5"\h\z展開(kāi)劑:正丙醇—氨水(7:3) 100ml指示劑:茚三酮一丙酮(1~50)20ml甘氨酸:10mg/ml 10mlL-丙氨酸:10mg/ml 10ml甘氨酸試樣:10mg/ml10ml三、實(shí)驗(yàn)步驟1、試劑準(zhǔn)備將待測(cè)試劑溶液、甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、展開(kāi)劑以及茚三酮顯色劑配制2、劃線用鉛筆在硅膠板上距末端一厘米出輕輕畫(huà)一橫線。3、點(diǎn)樣用毛細(xì)管分別吸取待測(cè)樣品溶液、甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,在橫線上輕輕點(diǎn)樣,分別點(diǎn)三次。(點(diǎn)完一次之后等到殘余溶劑滲入之后再點(diǎn)樣,點(diǎn)樣不宜太多,否則會(huì)降低Rf值,斑點(diǎn)直徑控制在2毫米,不宜超過(guò)5毫米。同時(shí)點(diǎn)樣點(diǎn)之間距離在一厘米左右,防止邊緣效應(yīng)。硅膠板在空氣中放置時(shí)間要盡量短,否則會(huì)因吸潮而降低活性)4、展層將點(diǎn)了樣的硅膠板放在盛有展開(kāi)劑(約0?5cm)的展開(kāi)槽中。(展開(kāi)劑不能超過(guò)一厘米出畫(huà)的線。由于毛細(xì)管作用,展開(kāi)劑在硅膠板上緩慢前進(jìn),樣品由于與展開(kāi)劑的親和力不同而分離)距離硅膠板上端二厘米處取出硅膠板。5、顯色待硅膠板自然晾干后,將茚三酮噴灑在硅膠板。觀察待測(cè)樣品溶液與哪個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液跑出的線路一樣,判斷出待測(cè)樣品的種類。紅外光譜法一、 紅外光譜在化學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用紅外光譜在化學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用大體上可分為兩個(gè)方面:1、 是用于分子結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)研究,應(yīng)用紅外光譜可以測(cè)定分子的鍵長(zhǎng)、鍵角,以此推斷出分子的立體構(gòu)型;根據(jù)所得的力常數(shù)可以知道化學(xué)鍵的強(qiáng)弱;由簡(jiǎn)正頻率來(lái)計(jì)算熱力學(xué)函數(shù)。2、 是用于化學(xué)組成的分析,紅外光譜最廣泛的應(yīng)用在于對(duì)物質(zhì)的化學(xué)組成進(jìn)行分析,用紅外光譜法可以根據(jù)光譜中吸收峰的位置和形狀來(lái)推斷未知物結(jié)構(gòu),依照特征吸收峰的強(qiáng)度來(lái)測(cè)定混合物中各組分的含量,它已成為現(xiàn)代結(jié)構(gòu)化學(xué)、分析化學(xué)最常用和不可缺少的工具。二、 紅外光譜基本原理紅外光譜是由于分子振動(dòng)能級(jí)(同時(shí)伴隨轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí))躍遷而產(chǎn)生的,物質(zhì)吸收紅外輻射應(yīng)滿足兩個(gè)條件:1、 輻射光具有的能量與發(fā)生振動(dòng)躍遷時(shí)所需的能量相等。2、 輻射與物質(zhì)之間有偶合作用。三、紅外光譜法的特點(diǎn)1、 特征性高。就像人的指紋一樣,每種化合物都有自己的特征紅外光譜,所以把紅外光譜分析形象的稱為物質(zhì)分子的“指紋”分析。2、 應(yīng)用范圍廣。從氣體、液體到固體,從無(wú)機(jī)化合物到有機(jī)化合物,從高分子到低分子都可以用紅外光譜進(jìn)行分析。3、 用樣量少,分析速度快,不破壞樣品。用紅外分光光度儀檢測(cè),采用壓片法,取殘?jiān)s1?1.5mg,置瑪瑙研缽中,加入干燥的溴化鉀或氯化鉀細(xì)粉約200?300mg(與供試品的比約為200:1)作為分散劑,充分研磨混勻,置于直徑為13mm的藥片模具中,使鋪展均勻,抽真空約2min,加壓至(0.8x106)kPa(約8?10T/cm2),保持壓力2min,撤去壓力并放棄后取出制成的供試片,目視檢測(cè),片子應(yīng)呈透明狀,其中樣品分布應(yīng)均勻,并無(wú)明顯的顆粒狀樣品。亦可采用其他直徑的壓膜制片,樣品與分散劑的用量需相應(yīng)調(diào)整以制得濃度適合的片子。測(cè)定。本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集929圖)一致。
供試品的制辭及測(cè)宦I?原料藥鑒鞋雕為有展定蛉?應(yīng)按照?qǐng)F(tuán)家葯典癒J6會(huì)第訂的<藥晶虹外光謂集》孫崔收載的各光譜圖折規(guī)定的方陸制備鋒島.貝怵變作袪術(shù)套見(jiàn)*萸品虹外光譜疑4的說(shuō)(W”采闿固越制樣拉術(shù)時(shí)?箍常磁到的何蠢是莎亂理象■蝴障肄品的描型不軻?其紅外趾諸注拄也會(huì)產(chǎn)生差異卩爭(zhēng)供嵐屈的孌漑光譜與?藥肘虹外光譜卑》所收載前標(biāo)準(zhǔn)此諾不?致時(shí),在排賒各抻可博影響哋惜的外在或人為均嵐樣?購(gòu)鞍謹(jǐn)藥品兀倍圖中備注的裁仏或各品種項(xiàng)下規(guī)定的方信琲幵預(yù)處理,再供試品的制辭及測(cè)宦I?原料藥鑒鞋雕為有展定蛉?應(yīng)按照?qǐng)F(tuán)家葯典癒J6會(huì)第訂的<藥晶虹外光謂集》孫崔收載的各光譜圖折規(guī)定的方陸制備鋒島.貝怵變作袪術(shù)套見(jiàn)*萸品虹外光譜疑4的說(shuō)(W”采闿固越制樣拉術(shù)時(shí)?箍常磁到的何蠢是莎亂理象■蝴障肄品的描型不軻?其紅外趾諸注拄也會(huì)產(chǎn)生差異卩爭(zhēng)供嵐屈的孌漑光譜與?藥肘虹外光譜卑》所收載前標(biāo)準(zhǔn)此諾不?致時(shí),在排賒各抻可博影響哋惜的外在或人為均嵐樣?購(gòu)鞍謹(jǐn)藥品兀倍圖中備注的裁仏或各品種項(xiàng)下規(guī)定的方信琲幵預(yù)處理,再ffiiHJtmr比對(duì).咖未規(guī)定滾品種供藥用的晶卿取陌址理方法?則可便州時(shí)呢崩?井果用適當(dāng)?shù)娜荇[對(duì)供述品與時(shí)懇品在梅同的條件市同吋直和遁結(jié)晶’撚后比對(duì).如巳規(guī)定特宦的藥用品型?期應(yīng)采用相應(yīng)晶礎(chǔ)的時(shí)AS品依怯比対.螞果邛固體制樣技術(shù)不能洶足鑒擁需黑時(shí)*燉業(yè)用fiJSl法繪制光睛后比對(duì).2,制劑鑒刖品秤豔別項(xiàng)下應(yīng)朋確規(guī)定制棘的前處現(xiàn)方迭「通倉(cāng)采用溶削握収陡-提取時(shí)應(yīng)選擇適性的溶時(shí)?衣盡可釜誡少耶科的干撫■井力求遊免導(dǎo)致可能的S5SH?,般夙的樣品毎經(jīng)i£當(dāng)干謹(jǐn)厲依社進(jìn)齊紅外3t猶賽別.乩冬述分像輿藥樂(lè)劇不能釆用全光譜比對(duì)■坍儲(chǔ)笏【就?#^F2(ar的方畝、述樣主要風(fēng)分的若干牛特tsm^T用于組成棚對(duì)理足啊#址分原料藥的醜另此屯晶型、異椅休眼握蜒査或含滋圏定供試晶制益和具技測(cè)定方怯閔按AifJiW項(xiàng)FflJ£規(guī)宦操柞.【連定事項(xiàng)】「各品種咦F規(guī)宦*?應(yīng)與對(duì)雁的屋譜f光謐卑
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