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急性腎功能衰竭【摘要】目的:復制家兔升汞中毒致急性腎功能衰竭的動物模型。觀察升汞中毒的一般狀態(tài),尿質(zhì)和量的變化,以及腎臟人體形態(tài)及病理組織學改變。根據(jù)實驗指標判斷、分析和討論急性腎功能衰竭的發(fā)病機制及病理生理變化。方法:復制家兔升汞中毒致急性腎功能衰竭的動物模型,觀察其病理特征。結(jié)果:尿蛋白含量增高,出現(xiàn)管型。結(jié)論:學習了制作了家兔升汞中毒致急性腎功能衰竭的模型,該模型的建立助于掌握急性腎功能衰竭的特點及其對動物機體的影響。關(guān)鍵字:重金屬類毒物、腎小管壞死、血尿素氮。材料及方法:實驗前一天取家兔12只,其中10只做為實驗組,另外2只作為對照組,在實驗組家兔的皮下注射1%氯化汞適量,在對照組家兔皮下注射等量的生理鹽水作為對照。實驗時將家兔稱重后,以20%烏拉坦溶液以5ml/kg的劑量由耳緣靜脈慢慢推注,進行全身麻醉,期間觀察動物的肌張力、呼吸頻率、角膜反射作為觀察麻醉的深度指標。將家兔仰臥固定于兔試驗臺上,自尿道口插入導尿管導尿,如果尿量過少,下腹剪毛在恥骨聯(lián)合上1.5厘米處正中切口,長約4厘米,分離皮下組織沿腹白線切開腹膜,暴露膀胱,用注射器取適量尿液備測尿蛋白、尿沉渣鏡檢。頸部剪毛,做頸部切口,分離右側(cè)頸總動脈、左側(cè)頸靜脈,分別做頸總動脈插管和頸靜脈插管,經(jīng)總動脈放血5ml,離心后取血清備測尿素氮。尿蛋白定性檢查:用吸管吸取尿液3ml加入試管內(nèi),用試管夾夾著在酒精燈外焰上加熱至沸,多數(shù)情況下尿液煮沸后會變渾濁此時加入5%醋酸溶液3-5滴,繼續(xù)加熱煮沸,若尿液由渾濁變?yōu)橥该鲃t為尿酸所致;若仍渾濁則表示尿液中含有尿蛋白,依據(jù)渾濁程度推斷尿蛋白含量標準如下表所示:結(jié)果煮沸后的表現(xiàn)蛋白含量(g/L)—清晰,無渾濁無+黑色背景下輕微渾濁<0.1+輕度白色渾濁,無顆粒及絮狀沉淀0.1-0.5++明顯白色渾濁,無絮狀沉淀0.5-2+++絮狀白色沉淀,無凝塊2-5++++凝固成塊,大量絮狀沉淀>56.尿液沉渣鏡檢:⑴取收集的尿液2ml至于離心管內(nèi)離心5分鐘,使尿液中的有形成分沉淀,離心后去掉上清液。⑵將試管內(nèi)的尿沉渣混勻,吸取一滴加于載玻片中央,用蓋玻片覆蓋后鏡檢。⑶暗視野下先低倍鏡后高倍鏡,移動視野,尋找并觀察管型。(注:管型是蛋白質(zhì)、細胞及其碎片等物質(zhì)在遠曲小管、集合管中凝固形成的圓柱體蛋白聚體)7.血清尿素氮的測定:所需試劑:動物的血清、尿素氮標準應(yīng)用液I、尿素氮標準應(yīng)用液II、蒸餾水、二乙酰一污一氨硫脲液(試劑I)、酸混合液(試劑II)配置方法如下:
試劑或樣品(ml)測定管標準管空白管血清0.02尿素氮標準應(yīng)用液II0.1蒸餾水0.50.40.5試劑I0.50.50.5試劑II4.04.04.0加完上述試劑后,混勻置沸水鍋中煮沸10分鐘,置流水中冷卻3分鐘,于721型分光光度計上用520mm波長比色,以空白管調(diào)零,讀取各測定管及標準管的吸光度。按下列公式計算:血清尿素氮二(測定管吸光度/標準管吸光度)X5'X5‘‘(注:'為測定管血清稀釋倍數(shù)/標準管尿素氮應(yīng)用液稀釋倍數(shù)‘‘為尿素氮標準應(yīng)用液II濃度)結(jié)果:⑴尿蛋白定性檢查結(jié)果:尿液的蛋白含量為2-5g/L⑵血清尿素氮測定結(jié)果圖表如下:實驗組測定管1測定管2平均值標準管空白管尿素氮10.1530.1060.12950.0050647.520.1470.1230.1350.0040843.7530.4090.3910.40.0370270.270340.1480.1570.15250.0040953.12550.280.2560.2680.0330203.030360.3350.4140.37450.0180520.138970.6560.7460.7010.0540324.53780.360.3990.37950.0170558.088290.3290.1890.2590.0140462.5100.3180.4170.39450.0410240.5488平均值502.3489對照組測定管1測定管2平均值標準管空白管尿素氮10.0320.0420.0370.0070132.142920.0340.0390.03650.0060152.0833平均值142.1131尿素氮合蛆1 2組別實驗組動物的血清尿素氮的含量
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