干凈區(qū)〔室〕沉降菌測試標準操作規(guī)程干凈區(qū)〔室〕沉降菌測試標準操作規(guī)程14頁干凈區(qū)〔室〕沉降菌測試標準操作規(guī)程起草人起草日期頒發(fā)人發(fā)放部門審核人審核日期生效日期藥檢室批準人批準日期修訂日期文件編號文件名稱一、目的：建立一個干凈區(qū)文件編號文件名稱二、范圍：干凈室和干凈區(qū)，無菌室或局部空氣凈化區(qū)域〔包括干凈工作臺〕的沉降菌的測試和環(huán)境的驗證。三、責任：藥檢員、藥檢室負責人?；钗⑸飻?shù)，并以此來評定干凈室〔區(qū)〕的干凈度。儀器儀器包括：a〕培育皿；b〕培育基：大豆酪蛋白瓊脂培育基；c〕恒溫培育箱；d〕高壓蒸汽滅菌器。培育皿一般承受φ90mm×15mm規(guī)格的培育皿。培育基按培育基要求加水，加熱溶化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿〔φ90mml))中。加蓋后在室溫放至凝固。制備好的培育基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周為宜或按廠商供給的標準執(zhí)行。恒溫培育箱必需定期對恒溫培育箱進展校驗。測試步驟測試前培育基外表必需嚴格消毒。將已制備好的培育皿按采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個翻開培育皿蓋，使培育基外表暴露在空氣中。靜態(tài)測試時，培育皿暴露時間為30min以上；動態(tài)測試時，培育皿暴露時間為不大于4h。全部采樣完畢后，將培育皿倒置于恒溫培育箱中培育。承受大豆酪蛋白瓊脂培育基〔TSA〕配制的培育皿經(jīng)采樣后，在30℃~35℃培育箱中培育，時間2d。每批培育基應有比照試驗，檢驗培育根本身是否污染。可每批選定3只培育皿作比照培育。菌落計數(shù)用肉眼對培育皿上全部的菌落直接計數(shù)、標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。2222個以上菌落計數(shù)。留意事項測試用具要作滅菌處理，以確保測試的牢靠性、正確性。實行一切措施防止人為對樣本的污染。對培育基、培育條件及其他參數(shù)作具體的記錄。由于細菌種類繁多，差異甚大，計數(shù)時一般用透射光于培育皿反面或正面認真觀看，不要漏計培育皿邊緣生長的菌落，并須留意細菌菌落與培育基沉淀物的區(qū)分，必要時用顯微鏡鑒別。采樣前應認真檢查每個培育皿的質(zhì)量，如覺察變質(zhì)、破損或污染的應剔除。測試時間在空態(tài)或靜態(tài)測試時，測試宜在凈化空氣調(diào)整系統(tǒng)正常運行時間不少于30min后開頭，或在生20min自凈后開頭。在動態(tài)測試時，則須記錄生產(chǎn)開頭的時間以及測試時間。沉降菌菌落數(shù)計算采樣點數(shù)量及其布置mm2干凈度級別注：對于100級的單向流干凈室〔區(qū)，包括100級干凈工作臺benc，面積指的是送風口外表積；對于10000級以上的非單向流干凈室〔區(qū)，面積指的是房間面積。10010000100000300000<102~3222≥10~<204222≥20~<408222≥40~<10016422≥100~<200401033≥200~<400802066≥400~<1000160401313≥1000~<20234001003232≥20238002006363采樣點的位置〕工作區(qū)采樣點位置離地0.8m~1.5m左右〔略高于工作面b〕可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。c〕2兩點承受左右擺布，三點承受左中右擺布。采樣次數(shù)每個采樣點一般采樣一次。采樣留意事項對于單向流干凈室〔區(qū)〕或送風口，采樣器采樣口朝向應正對氣流方向；對于非單向流干凈室〔區(qū)，采樣口向上。布置采樣點時，至少應盡量避開塵粒較集中的回風口。采樣時，測試人員應站在采樣口的下風側(cè)，并盡量少走動。應實行一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。培育皿在用于檢測時，為避開培育皿運輸或搬動過程造成的影響，宜同時進展比照試驗，每次或每個區(qū)域取1箱內(nèi)培育，結果應無菌落生長。記錄測試報告應包含以下內(nèi)容：a〕測試者的名稱和地址，測試日期；b〕測試依據(jù)；c〕被測干凈室〔區(qū)〕的名稱；d〕測試結果；包括全部統(tǒng)計計算資料。結果計算用計數(shù)方法得出各個培育皿的菌落數(shù)。每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)的計算，公式為：=M1+M2……M〕/式中：M—平均菌落數(shù)；M1—1號培育皿菌落數(shù)；M2—2號培育皿菌落數(shù)；Mn—n號培育菌落數(shù)；n—培育皿總數(shù)。結果評定每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)必需低于所選定評定標準中的界限。在靜態(tài)測試時，假設某測點的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標準，則應重采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判為符合。干凈室〔區(qū)〕沉降菌技術要求干凈度級別干凈度級別沉降菌/皿，0.5h100≤110000