母豬氧化應(yīng)激及抗氧化措施蔣宗勇廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所2016-3-25報告提綱母豬氧化應(yīng)激及其危害母豬熱應(yīng)激及其危害大豆異黃酮對泌乳母豬生產(chǎn)性能和抗氧化機(jī)能的影響大豆異黃酮對豬乳腺上皮細(xì)胞生長的影響大豆異黃酮對豬乳腺上皮細(xì)胞抗氧化機(jī)能的影響妊娠后期和泌乳期母豬體內(nèi)產(chǎn)生大量自由基高產(chǎn)母豬妊娠后期（75d到分娩）胎兒生長（71%體重）和乳腺生長、泌乳期泌乳等導(dǎo)致母豬營養(yǎng)需求旺盛，而妊娠后期限飼和泌乳期采食量和營養(yǎng)物質(zhì)攝入不足，導(dǎo)致分解代謝旺盛，產(chǎn)生大量活性氧自由基（ROS）。正常情況下，自由基與抗氧化系統(tǒng)保持平衡。抗氧化系統(tǒng)包括抗氧化劑和酶。酶包括超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-px），過氧化氫酶（CAT）。非酶抗氧化物質(zhì)包括維生素C,E,β-胡蘿卜素,尿酸和飼糧多酚類等。各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶的總的水平即體現(xiàn)了該體系內(nèi)的總抗氧化能力(T-AOC)。氧化應(yīng)激當(dāng)細(xì)胞中活性氧自由基比抗氧化系統(tǒng)占先時，氧化應(yīng)激就產(chǎn)生了?；钚匝踝杂苫鶗茐募?xì)胞膜不飽和脂肪酸鏈、蛋白質(zhì)的硫巰基、DNA的核酸堿基，其氧化產(chǎn)物分別是

丙二醛、羰基化蛋白、8-羥基-2‘-脫氧鳥苷。為此，氧化應(yīng)激的指標(biāo)是

總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、羰基蛋白、8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)。不飽和脂肪酸丙二醛蛋白質(zhì)羥基化蛋白質(zhì)核酸8-羥基脫氧鳥苷自由基細(xì)胞膜破壞蛋白質(zhì)變性DNA破壞妊娠中后期和泌乳期淋巴細(xì)胞DNA損傷嚴(yán)重Berchieri-RonchietalAnimal(2011),5:11,pp1774–1779母豬體內(nèi)存在系統(tǒng)性氧化應(yīng)激妊娠后期到泌乳期母豬血液視黃醇和a-生育酚含量顯著低于妊娠早期，表明母豬體內(nèi)系統(tǒng)性氧化應(yīng)激。a-生育酚視黃醇Berchieri-RonchietalAnimal(2011),5:11,pp1774–1779氧化應(yīng)激對母豬繁殖性能的影響

血漿丙二醛水平越高，18日齡哺乳仔豬窩重越小。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA正常溫度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，產(chǎn)房21oCto23.7oC熱應(yīng)激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，產(chǎn)房22.1oCto30.6oC氧化應(yīng)激對母豬繁殖性能的影響

血漿羰基蛋白水平越高，哺乳仔豬增重越小。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA氧化應(yīng)激對母豬繁殖性能的影響

血漿8-羥基-2‘-脫氧鳥苷(8-OHdG)水平越高，母豬產(chǎn)活仔數(shù)越少。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA氧化應(yīng)激對母豬繁殖性能的影響

血漿8-羥基-2‘-脫氧鳥苷(8-OHdG)水平越高，泌乳18天母豬背膘越薄，說明母豬體重?fù)p失越大。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA熱應(yīng)激導(dǎo)致母豬產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)

血漿丙二醛MDA含量升高YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA正常溫度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，產(chǎn)房21oCto23.7oC熱應(yīng)激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，產(chǎn)房22.1oCto30.6oC熱應(yīng)激導(dǎo)致母豬產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)

血漿羰基蛋白含量升高YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA正常溫度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，產(chǎn)房21oCto23.7oC熱應(yīng)激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，產(chǎn)房22.1oCto30.6oC熱應(yīng)激導(dǎo)致母豬產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)

產(chǎn)活仔數(shù)降低，增加死胎數(shù)正常溫度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，產(chǎn)房21oCto23.7oC熱應(yīng)激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，產(chǎn)房22.1oCto30.6oC＊YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA熱應(yīng)激導(dǎo)致母豬產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)

仔豬出生窩重和18日齡窩重降低正常溫度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，產(chǎn)房21oCto23.7oC熱應(yīng)激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，產(chǎn)房22.1oCto30.6oC＊＊熱應(yīng)激影響母豬繁殖性能的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)理母豬抗氧化措施

大豆異黃酮抗氧化功能總抗氧化能力T-AOC（U/ml）baaabbab試驗1：大豆異黃酮提升泌乳母豬體內(nèi)抗氧化能力陳豐等，2010，飼料博覽，8:1大豆異黃酮提供母豬血漿過氧化氫酶活性過氧化氫氧化酶CAT（U/ml）aaaabbbb大豆異黃酮降低血漿丙二醛含量丙二醛MDA（nmol/ml）aaabbbabba

泌乳量（kg）大豆異黃酮提高母豬泌乳量、乳蛋白含量乳蛋白含量（%）ba陳豐等，2010，飼料博覽，8:1bababa陳豐等，2010，飼料博覽，8:1母豬大豆異黃酮提高哺乳仔豬日增重試驗2：大豆異黃酮對泌乳母豬生產(chǎn)性能和抗氧化機(jī)能的影響選用227頭初產(chǎn)長白母豬（平均231日齡，體重143公斤）在妊娠85天至哺乳（18天）期間飼料中添加0、15、30和45ppm大豆異黃酮（ISO）結(jié)果表明：大豆異黃酮

對妊娠母豬的產(chǎn)（活）仔數(shù)、產(chǎn)程、產(chǎn)活仔窩重和初生仔豬個體重沒有顯著影響；對妊娠母豬血液T-AOC和MDA含量無顯著影響Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆異黃酮顯著促進(jìn)母豬乳腺發(fā)育15~45mg/kg大豆異黃酮

顯著改善母豬妊娠110天和泌乳7天母豬的乳腺發(fā)育。

對照組乳房（妊娠d110）15ppm組乳房（妊娠d110）30ppm組乳房（妊娠d110）45ppm組乳房（妊娠d110）

對照組乳房（哺乳d7）15ppm組乳房（哺乳d7）30ppm組乳房（哺乳d7）45ppm組乳房（哺乳d7）Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254母豬添加大豆異黃酮提高哺乳仔豬窩重*Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254母豬添加大豆異黃酮提高哺乳仔豬日增重aabbccHuetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆異黃酮提高泌乳母豬血液抗氧化能力P<0.0001P=0.001P=0.0005Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆異黃酮提高泌乳母豬血液抗氧化酶活性大豆異黃酮線性降低母豬血液丙二醛水平，減低泌乳母豬氧化應(yīng)激Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254添加大豆異黃酮提高母豬乳汁抗氧化水平Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆異黃酮線性降低泌乳第1、7、18天乳汁中丙二醛MDA含量，減少對仔豬的氧化威脅。試驗3：大豆異黃酮對豬乳腺上皮細(xì)胞生長的影響陽性對照組：正常的DMEM/F12培養(yǎng)基陰性對照組：與處理組加入等量的DMSO（濃度20ug/ml）大豆異黃酮(YZS)：廣東省農(nóng)科院動物科學(xué)研究所，純度99%異黃酮(ISO)：sigma公司，純度99%采用免疫熒光法對乳腺上皮細(xì)胞中的特異表達(dá)蛋白角蛋白進(jìn)行鑒定陽性對照陰性對照5μM10μM20μM30μM40μMGES不同劑量YZS/ISO對豬乳腺上皮細(xì)胞形態(tài)的影響（1:100）大豆異黃酮YZS對細(xì)胞的促增殖作用優(yōu)于同等劑量的ISO，高劑量的ISO（30-40μM)抑制細(xì)胞的增殖大豆異黃酮促進(jìn)乳腺細(xì)胞增殖大豆異黃酮空白對照陰性對照不同劑量YZS/ISO對乳腺上皮細(xì)胞P-cyclinE蛋白表達(dá)的影響（1:100）5μM