HIV抗體快速檢測SOP文獻 科室：檢查科目錄第一部分工作制度實驗室工作制度HIV標(biāo)本采集與接受登記制度艾滋病實驗室保密制度艾滋病篩查實驗室常規(guī)消毒清理工作制度差錯事故解決制度報告單簽發(fā)審核制度設(shè)備管理制度試劑管理制度艾滋病篩查實驗室安全防護制度艾滋病病毒職業(yè)暴露防止解決方案第二部分原則操作規(guī)程第一章樣品采集與解決第二章原則操作程序第三章成果報告與注意事項第三部分流程圖一、HIV抗體快速檢測流程圖二、暴露級別的評定第一部分工作制度實驗室工作制度室內(nèi)應(yīng)經(jīng)常保持整潔，多個儀器設(shè)備要安裝適宜，器皿試劑擺放整潔，標(biāo)志清晰，有良好的通風(fēng)設(shè)備。實驗室工作人員工作時一律穿制服，保持衣帽整潔，實驗過程中應(yīng)用心致志、認真負責(zé)，堅守工作崗位，不得隨意串崗、閑談，保持實驗室安靜，下班離開實驗室前要檢查并關(guān)好水、電、門、窗等，注意實驗室安全。認真開展實驗室質(zhì)量控制工作，儀器設(shè)備應(yīng)定時保養(yǎng)，有溫度統(tǒng)計，檢測標(biāo)本的保存規(guī)定符合規(guī)范規(guī)定。實驗室不得放置與測試無關(guān)的物品，水、溫、濕度、光照、防震、防塵、防噪聲等，環(huán)境必須符合實驗室的工作規(guī)定。實驗和樓道內(nèi)必須配備足夠的安全防火方法，并定時檢查保養(yǎng)。對不同屬性、品種和含量水平的試樣，應(yīng)有足夠的實驗區(qū)域，予以分離檢查，特別是已知含有生物危害的試樣必須分離檢查。避免損害工作人員健康和污染環(huán)境。與檢查無關(guān)人員不得進入實驗室，外單位人員聯(lián)系工作，一律在辦公室接待。實驗結(jié)束后，應(yīng)及時清理實驗現(xiàn)場和用品，對染菌帶毒的器具廢棄物應(yīng)嚴(yán)格進行消毒無菌解決。實驗室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙、用餐和進食。HIV標(biāo)本采集與接受登記制度采樣前和接受標(biāo)本時應(yīng)核對病人身份，嚴(yán)格執(zhí)行核對制度。采血時應(yīng)戴好手套、帽子、口罩。HIV標(biāo)本采集應(yīng)建立具體的統(tǒng)計本，統(tǒng)計內(nèi)容涉及：送檢單位、病人姓名、門診號、數(shù)量、種類（血清）、送樣者、接受者或采集者。采集后，應(yīng)將HIV樣本單獨分裝，勿與其它項目共用。艾滋病實驗室保密制度為確保艾滋病實驗室全部資料嚴(yán)格保密，應(yīng)恪守下列制度1、與HIV/AIDS有關(guān)檢測項目的全部資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，涉及采樣統(tǒng)計與檢測統(tǒng)計的保管，報告單的發(fā)放和送確認實驗室檢測等。2、工作人員不得向無關(guān)人員提供檢查成果，要妥善保存多個實驗統(tǒng)計。3、對初篩疑似陽性感染者不能告訴受檢者本人，更不能到處亂講。4、實驗室的有關(guān)檢查資料，檔案、成果統(tǒng)計其別人不得翻錄查閱，修改和銷毀。5、實驗室工作人員，不能在非正式場合對外提供任何成果、數(shù)據(jù)。艾滋病篩查實驗室常規(guī)消毒清理工作制度1、檢測可疑樣品時，充足準(zhǔn)備好廢棄物消毒具及消毒藥、液。如：次氯酸鈉含有效氯—5000mg/L，75%乙醇和2%戊二醛。2、實驗室用的吸頭及時打入消毒器皿中。3、一次性手套，隔離服更換后，應(yīng)丟棄在一次性垃圾袋內(nèi)。4、慣用消毒辦法4.1、物理消毒辦法4.1.1、高壓蒸汽消毒，121°C，保持15—20min；4.2、化學(xué)消毒辦法4.2.1、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉4.2.2、工作臺面及儀器表面：75%乙醇4.2.3、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉4.2.4、污染的臺面和器具：mg/L次氯酸鈉5、實驗室中發(fā)生可疑樣品溢出時，應(yīng)及時用75%乙醇噴灑，然后用消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋10-15分鐘，最后再用消毒劑清洗該地方，擦干。6、全部實驗工作結(jié)束后，應(yīng)對實驗臺、儀器、設(shè)備（接觸部位）地面進行徹底消毒解決。7、廢棄物解決

從HIV實驗室出來的全部廢棄物，涉及不再需要的樣品、包裝盒和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物。差錯事故解決制度艾滋病檢測工作人員必須要有高度的責(zé)任心和嚴(yán)肅的法制觀念，嚴(yán)防差錯事故的發(fā)生。由于責(zé)任心不強、不認真執(zhí)行規(guī)章制度，不恪守操作規(guī)程或技術(shù)因素而引發(fā)檢查錯誤，對病人未造成嚴(yán)重后果的，稱為差錯。差錯按程度不同，分為普通差錯和嚴(yán)重差錯。一級差錯記差錯一次，二級差錯扣款50元，三級差錯扣除當(dāng)月效益工資。一級差錯：

（1）違反操作規(guī)程，造成標(biāo)本損壞，需重新采集標(biāo)本或由于接受標(biāo)本未認真核對，違反核對制度，影響檢查者。（2）工作環(huán)境不能做到5S管理、違反生物安全者。（3）未準(zhǔn)時統(tǒng)計成果、繪制質(zhì)控圖、當(dāng)發(fā)現(xiàn)失控時隱瞞不報者。二級差錯：（1）未準(zhǔn)時間先后次序使用試劑，造成試劑過期或由于寄存不當(dāng)造成試劑變質(zhì)者。（2）項目漏查、做錯項目，且標(biāo)本已解決，需再次采用標(biāo)本檢查者。(3)因操作不當(dāng)，造成設(shè)備故障，影響較大者。三級差錯：（1）漏做、錯做普通標(biāo)本的檢查目的，編錯試管號碼，標(biāo)錯標(biāo)本聯(lián)號、采錯病人標(biāo)本，寫錯檢查成果并已發(fā)出報告者。（2）粗心大意寫錯報告難以挽回者。(3)因責(zé)任心不強、管理不善造成陽性標(biāo)本丟失者。報告單簽發(fā)審核制度各崗位的工作由本崗位人員進行操作檢查，然后填寫檢查報告單。工作完畢后，再對本崗位全部的檢查報告進行核查一次，在你認為能夠發(fā)出時，蓋上檢查者印章，填寫好報告日期。交給本實驗室負責(zé)人或有資質(zhì)的高年資檢查人員核查簽名；但在危急狀況下或單獨一人值班時（如夜班）除外。沒有上崗證人員不得單獨簽發(fā)檢查成果報告單。專業(yè)責(zé)任主管技師對本專業(yè)的全部報告單進行審核，審核的基本內(nèi)容有：臨床醫(yī)師所申請的檢查項目與否已全部檢查，有無漏項；檢查成果的填寫與否清晰、對的；檢查報告單上全部內(nèi)容與否全部填寫完整；有無非常異常的、難以解釋的成果；有無書寫錯誤；與否有需要復(fù)查的成果當(dāng)發(fā)現(xiàn)檢查成果有凝議時可指令本崗位人員對檢查項目進行復(fù)查。確認報告無問題時蓋章后，方可發(fā)出報告。設(shè)備管理制度由科主任或科室主管負責(zé)監(jiān)督和檢查儀器設(shè)備的使用狀況，定時校準(zhǔn)儀器的精確度。各科應(yīng)對本科室儀器設(shè)備建立臺賬明細。每月應(yīng)向總庫遞交儀器設(shè)備使用狀況表，并存檔。貴重儀器應(yīng)由專人負責(zé)管理。儀器操作前必須培訓(xùn)、考核，認真閱讀儀器操作闡明書，純熟掌握該儀器的使用辦法及維護方法，考核合格后方可操作。當(dāng)班者在使用中應(yīng)嚴(yán)格恪守操作規(guī)程，碰到問題應(yīng)作及時解決，并具體統(tǒng)計。問題嚴(yán)重者，應(yīng)及時上報科主任或主管加以解決。每次使用完畢，應(yīng)檢查儀器的電源、廢液傾倒?fàn)顩r，并具體統(tǒng)計該次使用狀況。對有溫度規(guī)定的儀器設(shè)備，如冰箱冷藏室、冷凍室及恒溫培養(yǎng)箱、水浴箱等，均應(yīng)建立登記本，每天監(jiān)測溫度。試劑管理制度為了更加好地管理檢查科試劑，由主管對檢查科試劑申購、品牌、質(zhì)量、價格、使用及管理狀況進行督查。每七天上報周計劃，各組人員根據(jù)各崗狀況，認真、具體填寫計劃表，務(wù)必注明具體的名稱、規(guī)格、數(shù)量及品牌。檢查科試劑必須由主管審核，并負責(zé)報物流中心采購，品牌不得隨意更改。杜絕浪費和積壓。所用的試劑必須符合質(zhì)量規(guī)定，必須有三證。不得使用過期、劣質(zhì)試劑。供應(yīng)商所送的試劑由總庫清點后才干接受，特殊試劑由檢查科主管清點后才干在貨單上簽字，有出入者必須向科主任或物流中心主任報告，再將貨單交物流中心統(tǒng)一結(jié)賬。領(lǐng)用時應(yīng)檢查物品質(zhì)量和試劑品名、廠家、人份、批號、過期時間及外包裝有無滲漏等，若有問題，應(yīng)及時向總庫反映。冰箱內(nèi)不能貯存乙醚、異戊烷或類似的易燃、可燃性液體。艾滋病篩查實驗室安全防護制度為確保實驗室人員的工作安全，避免交叉感染，請嚴(yán)格恪守安全防護制度1、工作人員要完畢與工作有關(guān)的充足有效的技術(shù)培訓(xùn)，要理解HIV危害，提高全員安全意識，實驗室安全負責(zé)人要對工作和環(huán)境的安全負責(zé)，全部工作人員都有責(zé)任保護自己和別人的安全。3、對有放試劑、樣品血清的冰箱專人管理。4、實驗人員應(yīng)純熟掌握操作知識和消毒技術(shù)。5、進入實驗室應(yīng)穿隔離衣，戴手套，傳染性危險大時應(yīng)戴雙層手套，戴防護鏡，口罩，如防護用品破損應(yīng)及時更換，不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚等部位。6、實驗期間盡量避免使用利器，易碎器皿，嚴(yán)禁采用口腔吸液管。7、送檢樣品應(yīng)視為有潛在傳染性，由專人接管，登記，寄存，提取。9、實驗用吸頭、手套、隔離服、污染物、廢棄物均放在指定垃圾袋中統(tǒng)一進行消毒，焚燒到無害化解決。10、不得在實驗室中吃食物，化妝打扮等，不得在實驗室會客。11、實驗室用品（涉及工作服）不得用于其它用途，不可將私人和無關(guān)的物品帶入實驗室。12、工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作服，用肥皂和流動水洗手，洗手后離開實驗室。

13、實驗結(jié)束后，要對工作平臺、儀器、地面進行消毒解決。14、遇故意外事故，應(yīng)立刻口頭和書面報告上級部門，并進行局部解決，如含氯消毒劑浸泡傷口，洗眼，漱口等，如遇高危意外事故，除進行局部解決外，同時應(yīng)立刻采用防止方法，涉及對其隨訪，HIV檢測，休息并暫離崗位二個月，按醫(yī)囑服用HIV藥品等。艾滋病病毒職業(yè)暴露防止解決方案為維護醫(yī)務(wù)人員及其它部門有關(guān)人員的職業(yè)安全，有效防止在工作中發(fā)生職業(yè)暴露感染艾滋病病毒，一旦發(fā)生職業(yè)暴露后最大程度的避免或減少艾滋病病毒感染，特制訂本方案。

一、職業(yè)暴露（一）職業(yè)暴露是指醫(yī)務(wù)人員以及有關(guān)工作人員，在從事艾滋病防治工作及有關(guān)工作的過程中意外被艾滋病毒感染者或者艾滋病患者的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其它銳器刺破皮膚，有可能被艾滋病病毒感染的狀況。（二）數(shù)據(jù)分析表明，醫(yī)護和防止保健等人員對艾滋病病毒和艾滋病患者從事醫(yī)療和實驗檢測活動是比較安全的。執(zhí)行嚴(yán)格的安全操作及防護方法，醫(yī)護及檢查等人員的暴露事件是能夠避免的。二、職業(yè)暴露的防止1、醫(yī)務(wù)人員對全部病人的血液、體液(涉及羊水、心包液、胸腔液、腹腔液、腦脊液、滑液、陰道分泌物等人體物質(zhì)，下同)及被血液、體液污染的物品均視為含有傳染性的病原物質(zhì)，在接觸這些物質(zhì)時，必須采用防護方法。2、醫(yī)務(wù)人員進行有可能接觸血液、體液的診療和護理操作時必須戴手套，操作完畢，脫去手套后立刻洗手，必要時進行手消毒。3、在診療、護理操作過程中，有可能發(fā)生病人血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面部時，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、含有防滲入性能的口罩、防護眼鏡；有可能發(fā)生血液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時，還應(yīng)當(dāng)穿戴含有防滲性能的隔離衣或者圍裙。4、醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損，在進行有可能接觸病人血液、體液的診療和護理操作時必須戴雙層手套。5、醫(yī)務(wù)人員在進行侵襲性診療、護理操作過程中，要確保充足的陽光，并特別注意避免被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或劃傷。

6、使用后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，或者運用針頭解決設(shè)備進行安全處置，也能夠使用品有安全性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器，以防刺傷。7、嚴(yán)禁將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。嚴(yán)禁用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。三、艾滋病病毒暴露后的防止解決（一）緊急局部解決：1、用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。2、如有傷口，應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓，盡量擠出損傷處的血液，用再肥皂液和流動清水沖洗；嚴(yán)禁進行傷口的局部擠壓。3、受傷部位的傷口沖洗后，應(yīng)當(dāng)用消毒液，如70%乙醇或者0.5%碘伏進行消毒，并包扎傷口；被暴露的粘膜，應(yīng)當(dāng)重復(fù)用生理鹽水沖洗干凈。（二）暴露后的報告及解決程序1、醫(yī)護人員發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后，要立刻上報醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)（具體由醫(yī)院擬定院內(nèi)程序，注意給暴露者保密）。及時報告天山區(qū)疾控中心，組織專家對暴露的級別和暴露源的病毒載量水平進行評定和擬定。2、醫(yī)務(wù)人員發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后，區(qū)疾控中心應(yīng)當(dāng)會同有關(guān)醫(yī)療衛(wèi)生單位對其進行隨訪和咨詢。隨訪和咨詢的內(nèi)容涉及：在暴露后第4周、第8周、第12周及6個月時對艾滋病病毒抗體進行檢測，對服用藥品的毒性進行監(jiān)控解決，觀察和統(tǒng)計艾滋病病毒感染的早期癥狀等。不進行暴露后防止用藥者，也要定時檢測艾滋病病毒抗體，檢測時間同上。3、在對艾滋病病毒職業(yè)暴露事件的整個解決過程中，必須始終做好保密工作。凡涉及暴露者個人的有關(guān)資料，不得向無關(guān)單位和人員泄露。四、暴露后防止性用藥

對發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露的醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)根據(jù)暴露源病毒載量水平實施防止性用藥方案。

防止性用藥應(yīng)當(dāng)在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始，最佳在4小時內(nèi)實施，最遲不得超出24小時；即使超出24小時，也應(yīng)當(dāng)實施防止性用藥。暴露后防止性用藥的推薦方案：1、基本用藥程序：兩種逆轉(zhuǎn)錄酶克制劑，使用常規(guī)治療劑量，持續(xù)服用28天。如雙汰芝（AZT與3TC聯(lián)合制劑）

300

mg/次，每日2次，用藥時間為持續(xù)服用28天。或參考抗病毒治療指導(dǎo)方案。本程序合用于輕度低危暴露。2、強化用藥程序：基本用藥程序加一種蛋白酶克制劑，如佳息患或利托那韋。均使用常規(guī)治療劑量，持續(xù)服用28天。本程序合用于嚴(yán)重暴露。鑒于醫(yī)務(wù)人員暴露后的感染率很低而用藥的毒、副作用很大，因此應(yīng)嚴(yán)格掌握用藥的指征。第二部分原則操作規(guī)程第一章樣品采集與解決樣本采集接患者申請單后，填寫血樣采集統(tǒng)計，統(tǒng)計涉及患者日期、姓名、年紀(jì)、門診號、采集人簽名等。用帶分離膠的負壓管采集一定量的靜脈血，顛倒混勻5~6次，室溫下自然放置半小時，待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min。標(biāo)本采集注意事項樣本采集嚴(yán)格按靜脈穿刺規(guī)范操作。采集樣本時應(yīng)注意安全，直接接觸HIV感染/艾滋病病人血液的操作，應(yīng)戴雙層手套，里層是PE手套，外層為乳膠手套。樣本保存在一周內(nèi)檢測的樣本，可寄存于2~8℃；在一周后來檢測的樣本，須寄存于-20℃。樣本運輸樣本運輸普通為血清或血漿，不運輸全血。細菌污染，嚴(yán)重溶血或脂血標(biāo)本不能作測定。容器規(guī)定：①血清應(yīng)置于帶蓋的1.5ml離心管內(nèi)，管外應(yīng)有明顯的標(biāo)記，姓名與門診號要清晰；②在離心周邊應(yīng)墊有可緩沖吸水材料，以免破碎；③隨樣品應(yīng)附有送檢單，送檢單應(yīng)與樣本分開放置。④外層容器規(guī)定耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器。天氣過熱，需采用干冰或冰壺冷藏運輸。五、試劑1、試劑名稱：人類免疫缺點病毒（HIV-1+2）抗體診療試劑（膠體金法）。2、試劑生產(chǎn)廠家：廣州萬孚生物技術(shù)有限公司。3、包裝規(guī)格：1個測試/包裝袋；25個測試/盒。4、試劑盒構(gòu)成：單人份包裝測試板，每盒25人份。闡明書一份。第二章原則操作程序【原理】運用雙抗原夾心法檢測HIV抗體。標(biāo)本加入反映板，若標(biāo)本中含有HIV抗體時，先與金標(biāo)抗原反映，形成抗體-金標(biāo)抗體復(fù)合物，在虹吸作用下向前移動，碰到包被抗原形成抗原-抗體-金標(biāo)抗原復(fù)合物，并出現(xiàn)紅色沉淀線。包被膜上同時帶有一條質(zhì)控包被線作為對照，因此當(dāng)出現(xiàn)一條紅色質(zhì)控線和一條（或兩條）紅色反映線時判斷為陽性。當(dāng)待測標(biāo)本中無HIV抗體時，只出現(xiàn)一條紅色質(zhì)控線則判斷為陰性。作為質(zhì)控，不管成果為陽性或陰性，都會出現(xiàn)一條紅色質(zhì)控線。如無紅色質(zhì)控線（或只有反映線）出現(xiàn)，則實驗無效。【HIV篩查實驗操作程序】實驗前準(zhǔn)備：實驗開始前將試劑和樣品放置于室溫（18~23℃）半小時。換隔離衣，戴好帽子、口罩、雙層手套。實驗操作：1、去掉外包裝，標(biāo)記上血清編號；

2、用移液器加50ul的血清或血漿樣品至反映塹；

3、如是全血則需加入1滴Chase緩沖液；

4、等最少10-15分鐘后讀取成果，超出30分鐘無意義。（三）實驗成果1、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反映。

2、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線，則實驗成果為陰性。

3、無效：如無紅線（或只有反映線）出現(xiàn)，表明實驗無效，須重新檢測。（四）報告：對呈陰性反映的樣品，可由實施檢測的實驗室出具HIV抗體快速檢測陰性報告；對呈陽性反映的樣品，須進行復(fù)檢，不能出陽性報告。第三章成果報告與注意事項【復(fù)檢實驗】對快速檢測呈陽性反映的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測。如兩種試劑復(fù)測均呈陰性反映，則報告HIV抗體陰性；如均呈陽性反映，或一陰一陽，需送艾滋病確認實驗室進行確認。（具體詳見流程圖）【篩實驗成果的報告】對HIV抗體快速檢測實驗，呈陰性反映者可出具“HIV抗體陰性”報告。對快速檢測實驗呈陽性反映者不能出陽性報告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報告?！境鹾Y實驗呈陽性反映樣品的轉(zhuǎn)送】如需送上級實驗室進行復(fù)測或確認，需要填寫“HIV抗體復(fù)測送檢單”，經(jīng)1名檢查人員和1名含有中級以上技術(shù)職稱的人員審核簽字，與血樣品一同送天山區(qū)疾控中心實驗室，再轉(zhuǎn)送市疾控中心艾滋病確認實驗室，或在本實驗室復(fù)檢后直接送確認實驗室?！静僮髋_消毒解決】用3~5%84消毒液擦拭臺面，如工作臺被溢出物污染，則用消毒液浸泡30分鐘后，再行擦拭?！痉块g消毒】

每日用紫外線照射30~60min【辦法學(xué)特性及注意事項】試劑盒4~30℃干燥保存。使用期16個月。抗凝全血應(yīng)采用EDTA，樣品應(yīng)避免溶血。樣品應(yīng)在收集后7天內(nèi)檢測，2~8℃保存，如果不不大于7天，應(yīng)冷凍保存。測試卡僅用于HIV抗體的現(xiàn)場初篩，檢測陽性必須用ELISA辦法進一步確認。樣本的加樣應(yīng)使用微量加樣器精確加入。實驗環(huán)境應(yīng)保持一定濕度、避風(fēng)，18~25℃進行。本試劑盒應(yīng)視為有感染源的物品，應(yīng)按生物危險樣品解決。第三部分流程圖HIV快速檢測方略，根據(jù)檢測點現(xiàn)場條件可分為下列二類3.1當(dāng)檢測點上有兩種快速檢測試劑時3.1.1常規(guī)檢測：3.1.1.1初篩實驗，用敏感性高的快速檢測試劑，成果為陰性，則報告陰性；成果為陽性反映，則進入復(fù)檢實驗。3.1.1.2復(fù)檢實驗，在同一檢測點，用