1脂肪酸氧化速率比色法檢測試劑盒產(chǎn)品說明書〔中文版〕主要用途rate〕比色法檢測試劑是一種旨在通過棕櫚酰肉堿氧化依靠性鐵氰化物復原β氧化速率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過細心研制、成功試驗證明的。其適用于各種細胞、組織中線粒體裂解懸液樣品〔動物、人體等〕β氧化速率的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程〔β-oxidation〕β氧化及最終經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O，并釋放能量等四個階段，是體內(nèi)，尤其是組織器官，例如肝臟、心臟和骨骼肌等能量內(nèi)平衡的關(guān)鍵代謝通路。食物中甘油三酯供給體內(nèi)三分之一的能量供給，骨骼80%的總能量。脂肪酸代謝特別，將導致脂質(zhì)聚攏在非脂肪組織內(nèi)，產(chǎn)生慢性病的病理根底，例如糖尿病、心衰、肥胖癥等。其中β氧化，包括脫氫、水合、二次脫氫和硫解，是將活化的各種長度脂酰輔酶酯〔acylCoAesters〕不斷縮短為乙酰輔酶A〔acetylCoA〕單位，最終經(jīng)過三羧酸循環(huán)和呼吸鏈氧化成是脂肪酸代謝進入β-氧化后工波長的下降與時間的對應關(guān)系。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液〔ReagentA〕 毫升反響液〔ReagentB〕 毫升C〕 毫升D〕 毫升陰性液〔ReagentE〕 毫升產(chǎn)品說明書 1份保存方式保存反響液Reagent〔ReagentC〕〔Reagent〕20A〔ReagentC〕B〔ReagentD〕6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反響操作的容器比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析試驗步驟一、測定預備預備好待測樣品〔例如純化線粒體，至于冰槽里備用〔25℃420nm470n16〔5分鐘，并置零從－20℃冰箱里取出試劑，置于冰槽里溶化；底物液A〔ReagentC〕和底物液B〔ReagentD〕避開光照A〕室溫下均衡溫度xx微升緩沖液〔ReagentA〕到的比色皿xx微升反響液〔ReagentB〕微升A〔ReagentC〕xx微升B〔ReagentD〕上下傾倒數(shù)次，混勻253分鐘xx微升陰性液〔ReagentE〕上下傾倒數(shù)次，混勻〔限定在3秒之內(nèi)〕〔OD420—OD470〕0分鐘－〔OD420—OD470〕5分鐘】xx微升緩沖液〔ReagentA〕到的比色皿xx微升反響液〔ReagentB〕微升A〔ReagentC〕xx微升B〔ReagentD〕上下傾倒數(shù)次，混勻253分鐘50微升待測樣品500微克線粒體蛋白〔留意：〕上下傾倒數(shù)次，混勻〔限定在3秒之內(nèi)〕〔OD420—OD470〕0分鐘－〔OD420—OD470〕5分鐘】四、計算氧化速率留意事項本產(chǎn)品為20次操作，包括背景比照操作時，須戴手套系統(tǒng)操作過程中，背景測定只需1次樣品須澄清，至關(guān)重要3秒內(nèi)比色測定測定值由高到低變化；測定可持續(xù)5分鐘比色測定后，比色皿須清洗徹底05分鐘讀數(shù)說明具有氧化功能樣本線粒體蛋白濃度為500微克/50微升〔本公司供給 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS3003