培養(yǎng)細胞的生長特點和生長過程2023/10/2712023/10/272一、細胞的生長特點

1、貼附并伸展是體外培養(yǎng)細胞的基本生長特點；大多數(shù)哺乳動物細胞在體內、體外均附著底物生長。2023/10/272023/10/273貼附前：呈球形；貼附后：細胞伸展，呈現(xiàn)各種細胞形態(tài)；影響細胞貼附和伸展的因素附著因子、生長因子、離子作用、溫度、培養(yǎng)液的流動速度等；特別是小牛血清和鈣、鎂離子影響更為明顯。2023/10/272023/10/274貼附過程吸附：貼附因子先吸附于底物接觸：懸浮細胞與底物附著貼壁伸展：伸展成特定形態(tài)2023/10/272023/10/275接觸抑制：指一個細胞被其他細胞圍繞無處可去而發(fā)生接觸時，細胞不再移動，接觸區(qū)域細胞膜皺褶樣運動停止的現(xiàn)象。正常細胞：接觸抑制保證培養(yǎng)過程中不重疊。轉化和腫瘤細胞：無接觸抑制現(xiàn)象，能繼續(xù)移動和增殖，細胞發(fā)生堆積。2023/10/272、接觸抑制2023/10/2762023/10/272023/10/2772023/10/272023/10/2782023/10/27

不受正常生長調控系統(tǒng)的控制，能持續(xù)的分裂與增殖。

許多癌細胞具有變形運動能力，并且能產生酶類，使血管基底層和結締組織穿孔，使它向其它組織遷移2023/10/279(二)細胞的生長增殖過程1、單個細胞的細胞周期細胞周期：一個細胞分裂結束后形成的細胞至下一次分裂結束形成兩個子細胞的這段時期。間期+分裂期（1）間期（G1，S，G2）:大多數(shù)細胞處于間期，間期時間長，DNA合成。G1:DNA合成前期，為DNA和蛋白質合成、中心體復制準備。S:DNA合成期，易受致癌物影響。G2：DNA合成后期

，進行RNA和蛋白質合成。2023/10/272023/10/2710（2）分裂期:M期（前，中，后，末）：時間短，主要是分裂。細胞周期=間期+M期=G1+S+G2+M2023/10/272023/10/2711單個細胞的細胞周期2023/10/272023/10/27122、細胞系的生長過程細胞系：原代培養(yǎng)經首次傳代成功后即成細胞系。正常細胞體外培養(yǎng)有壽命期限，大致分三個階段：2023/10/272023/10/2713(1)原代培養(yǎng)期---亦稱初代培養(yǎng)期新鮮組織從體內取出接種培養(yǎng)到第一次傳代的階段,一般持續(xù)1~4周。特點：原代細胞培養(yǎng)通常為異質性細胞獨立生存能力差多呈二倍體核型更能代表其來源組織的細胞類型及組織特異性，是藥物檢測的很好實驗工具。2023/10/272023/10/2714(2)傳代期原代細胞長滿后，分至多個容器培養(yǎng)。此期的持續(xù)時間最長，一般為30—50代；能維持二倍體核型，特性穩(wěn)定；一般在原代、5代、10代凍存。若持續(xù)反復傳代，將逐漸失去二倍體性，增殖變慢，停止分裂，進入衰退期。2023/10/272023/10/2715(3)衰退期細胞雖存活，但增殖基本停止，細胞形態(tài)輪廓增強，發(fā)生衰退、死亡。有限生長細胞系:細胞系的壽命是有限的，只能維持一定的期限。無限生長細胞系：細胞在第二期末或第三期初通過所謂“危機期”(crisis)；獲得不死性；具有持久或無限增殖的能力；失去接觸抑制。2023/10/272023/10/27163.每代細胞的生長過程細胞的一代：從接種開始到下一次再傳代接種的時間。每代細胞的生長過程分三個階段1)滯留期(latentphase)：生長緩慢2)指數(shù)生