2023/10/271培養(yǎng)細胞的特性及觀察2023/10/272一、培養(yǎng)細胞的生長方式和類型2023/10/272023/10/273二、培養(yǎng)細胞的形態(tài)形態(tài):多種多樣，如呈圓形、橢圓形、正方形、柱形、扁平形、梭形、星形和多邊形等．2023/10/272023/10/274（一）貼壁型生長細胞能附著于底物表面生長的細胞；必須貼附于底物表面才能生長的稱為貼壁或錨著依賴性細胞。體內(nèi)的大多數(shù)細胞屬于貼壁依賴性細胞。2023/10/272023/10/275貼壁生長細胞形態(tài)上大致分為兩種：上皮細胞型：形態(tài)：類似于上皮細胞，非真正上皮細胞。扁平多角形，胞核圓形，位于胞質(zhì)中央。生長特點：緊密相連，互相銜接，連成片。2023/10/272023/10/2762023/10/272023/10/277成纖維細胞型類似體內(nèi)成纖維細胞；有長短不等的細胞突起，梭型、三角形、扇形；細胞核橢圓形，位于細胞中央。生長特點：不緊靠，不連接成片排列成漩渦狀、放射狀或柵欄狀。2023/10/272023/10/2782023/10/272023/10/2792023/10/272023/10/27102023/10/272023/10/27113、游走細胞型散在生長，不連成片胞質(zhì)伸出偽足或突起活躍游走或變形運動，運動速度快、方向不規(guī)則。4、多形型細胞型：難以確定其形態(tài)，如神經(jīng)細胞。2023/10/272023/10/2712注意體外培養(yǎng)細胞形態(tài)不是固定不變的受pH、營養(yǎng)、污染、細胞密度等影響上皮/成纖維細胞不能等同于體內(nèi)細胞，指形態(tài)上與體內(nèi)這兩種細胞相似；形態(tài)類似的細胞可能來自不同組織。2023/10/272023/10/2713（二）懸浮型生長細胞無需附著物，懸浮狀態(tài)生長，呈圓形/細胞團。（血液、骨髓、脾臟細胞）優(yōu)點：生存空間大與培養(yǎng)基充分接觸無需消化傳代，利于大量生產(chǎn)。貼壁細胞經(jīng)懸浮適應(yīng)后也可長期懸浮培養(yǎng)。2023/10/272023/10/27142023/10/272023/10/27152023/10/272023/10/2716（三）半貼壁生長細胞部分貼壁，但不牢固,沖洗搖動即可脫壁；部分懸浮；無需消化傳代。2023/10/272023/10/27172023/10/272023/10/2718了解細胞生長狀態(tài)、數(shù)量改變、細胞形態(tài)、細胞有無移動、有無污染、培養(yǎng)液pH、是否變酸、變黃等。細胞常規(guī)檢查觀察的內(nèi)容為：1）肉眼觀察主要看培養(yǎng)液的顏色和透明度的變化三、培養(yǎng)細胞的生長狀況觀察2023/10/272023/10/2719正常培養(yǎng)液：7.2～7.4，桃紅色清亮透明。隨著細胞生長，代謝的酸性產(chǎn)物使培養(yǎng)液pH下降，顏色變淺、變黃。影響細胞生長，甚至造成退變死亡。所以：正常情況生長穩(wěn)定的細胞2～3天換液一次；生長緩慢的細胞3～4天換液一次。2023/10/272023/10/2720注意加Hepes或5%CO2使pH穩(wěn)定，利于細胞生長。細胞換液、傳代后，培養(yǎng)液很快變黃，可能細菌污染或培養(yǎng)器皿不干凈。貼壁細胞培養(yǎng)：若出現(xiàn)混濁，多為污染。懸浮培養(yǎng)的細胞：將瓶豎起靜置1小時，培養(yǎng)基混濁為污染。2023/10/272023/10/27212）顯微鏡觀察生長良好的細胞均質(zhì)、明亮、透明度大、折光性強、輪廓不清衰老、生長狀態(tài)不良輪廓增強，折光性變?nèi)酰毎g空隙增大胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡、脂