薰衣草精油涂膜劑抗大鼠燒傷的實驗研究

忠實草是紫蘇科的一種植物。作為一種芳香性提取劑，它在世界上廣泛種植。新疆薰衣草種植面積占全國95%以上,精油品質優(yōu)良,目前主要作為原料出口。薰衣草為新疆維吾爾醫(yī)傳統(tǒng)用藥,維語稱其為“烏斯提手杜思”,收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準維吾爾藥分冊(1998)》,能消散寒氣、補胃理腦、燥濕止痛,用于胸腹脹滿、感冒咳喘、頭暈頭痛、心悸氣短、關節(jié)骨痛等治療。薰衣草精油具有抗炎、抗菌、抗氧化、解痙、鎮(zhèn)靜、神經保護等多種藥理活性,還可減輕牛皮癬、皮炎和濕疹等皮膚病的癥狀,對促進細胞再生、加速傷口愈合,對燒燙灼曬傷有效,可抑制細菌、減少疤痕、抗病毒、殺菌、止痛抗炎等藥理活性。本研究擬考察薰衣草精油涂膜劑對燙傷的治療作用,初步探討其作用機制。1藥品、試劑和儀器薰衣草精油涂膜劑(自制,薰衣草精油購自新疆伊犁農四師伊帕爾汗集團);京萬紅燙傷膏(天津達仁堂達二藥業(yè)有限公司,批號211540);試劑均為分析純;Wistar大鼠60只(♂,體質量180～220g,新疆實驗動物研究中心,合格證書:醫(yī)動字第04號);昆明種小鼠60只(♂,體質量20～25g,新疆實驗動物研究中心,合格證書:醫(yī)動字第05號)。2方法2.1油、精油涂膜劑薰衣草經提取得到精油,經過適當工藝,加適量成膜材料制成涂膜劑,薰衣草精油涂膜劑1號含精油體積分數(shù)3%;薰衣草精油涂膜劑2號含精油體積分數(shù)6%;薰衣草精油涂膜劑3號含精油體積分數(shù)10%。本涂膜劑成膜后可塑性好,抗拉能力強,彈性很好,不影響小關節(jié)部位皮膚運動,且不撕拉皮膚,無干燥緊繃感。2.2皮膚組織病理學觀察Wistar大鼠60只,實驗前一天用8%硫化鈉脫去大鼠背部約25cm2毛發(fā)。實驗當日,大鼠用乙醚經鼻吸入麻醉后,將直徑為2.0cm的銅柱放入沸水中至銅柱恒溫,在脫毛部位自然垂直放置10s,燒傷面肉眼觀察:皮下外觀蒼白混濁或棕黃,表面干燥。顯微鏡下病檢:皮膚表面覆蓋變性壞死物,皮膚各層及附件結構和皮下脂肪組織均發(fā)生凝固性壞死而呈均質化;毛細血管擴張,紅細胞淤滯,有血栓形成,水腫明顯;肌纖維原有結構消失而互相融合,肌核固縮,可定為Ⅲ度燙傷。將燙傷的60只大鼠隨即分為6組[基質組、薰衣草精油涂膜劑高、中、低劑量組、陽性對照組(京萬紅燙傷膏)、模型組(不給任何藥)]。模型制備后,各組分別于受傷處擦藥,連續(xù)給藥21d,每天2次。實驗過程中觀測燙傷部位創(chuàng)面愈合率和創(chuàng)面愈合時間。2.2.1保乳手術后預防宮腔創(chuàng)傷愈合率模型制備各組分別于受傷處涂藥,連續(xù)21d,每日觀察大鼠的活動狀況。按Nagelschmidt法計算各時相點創(chuàng)面愈合率,記錄創(chuàng)面面積及脫痂長毛時間,并按下面公式計算創(chuàng)面愈合率:創(chuàng)面愈合率(%)=原始創(chuàng)面面積-未愈合創(chuàng)面面積原始創(chuàng)面面積×100%創(chuàng)面愈合率(%)=原始創(chuàng)面面積?未愈合創(chuàng)面面積原始創(chuàng)面面積×100%2.2.2傷口愈合時間燙傷后各確定時相點觀察傷口愈合情況,以創(chuàng)面完全上皮化、無滲出、有部分毛發(fā)長出作為創(chuàng)面完全愈合的依據(jù),記錄創(chuàng)面愈合時間。2.3給藥后小鼠右耳廓水腫度和抑制率的測定昆明種小鼠60只,體質量20～25g,隨機分成6組,每組10只,分別為模型組、京萬紅燙傷膏組,薰衣草精油涂膜劑高、中、低劑量組,涂膜劑基質組。實驗當日各給藥組小鼠右耳耳廓涂藥2次,間隔2h,末次給藥30min后,于小鼠右耳前后兩面均勻涂抹二甲苯0.02mL/只,左耳作對照,45min后脫頸處死小鼠,沿耳廓基線剪下兩耳,用直徑為9mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圓耳片,電子天平稱重,計算腫脹度和抑制率。腫脹度以每鼠左右耳片質量之差來表示,抑制率(%)=(模型組腫脹度-給藥組腫脹度)/模型組腫脹度×100%。以組間t檢驗進行統(tǒng)計學比較。2.4各模型組的用量及用量Wistar大鼠60只,體質量180～200g,隨機分6組,每組10只,分別為模型組、涂膜劑基質組、京萬紅燙傷膏組、薰衣草精油涂膜劑高(10%)、中(6%)、低(3%)劑量組。除模型組外,各組于右足跖部涂抹相應藥物2次,間隔1h,涂藥體積均為0.lmL·(100g)-1體重。造模前先用游標卡尺(精度0.02mm)測定所有大鼠右后肢足跖厚度作為造模前的正常值,末次給藥后1h,每鼠右足跖皮下注射雞蛋清0.1mL致炎,以造成急性足跖腫脹模型,分別測定注射雞蛋清致炎后30min、1,2,4,6h大鼠右后足跖的厚度,計算其腫脹度:腫脹度(mm)=致炎后足跖厚度-致炎前足跖厚度2.5統(tǒng)計處理所有數(shù)據(jù)結果均以ˉx±s表示,以SPSS軟件進行單因素的方差分析。3結果3.1不同涂膜劑治療小麥創(chuàng)傷率比較結果見表1。結果表明,薰衣草精油涂膜劑和京萬紅燙傷膏對燙傷創(chuàng)面愈合具有明顯促進作用,治療組創(chuàng)面愈合率明顯高于模型組或基質組(P<0.01),且薰衣草精油涂膜劑促進創(chuàng)面愈合效果具有一定的劑量依賴性,隨涂膜劑所含薰衣草精油濃度的升高,創(chuàng)面愈合加快。3.2加快浚傷術后愈合作用結果見表2。結果表明,薰衣草精油涂膜劑和京萬紅燙傷膏同樣具有加快燙傷創(chuàng)面愈合的作用,各治療組創(chuàng)面愈合時間明顯縮短(P<0.01),薰衣草精油涂膜劑加快創(chuàng)面愈合作用具有一定的劑量依賴性。3.3純草精膜劑對二甲苯引起的老鼠耳腫脹的影響結果見表3。薰衣草精油涂膜劑和京萬紅燙傷膏對二甲苯所致小鼠耳急性炎癥腫脹均有明顯抑制作用,涂膜劑3對腫脹抑制率達55.6%。3.4不同濃度的有機粉對血清致病大鼠足跖水腫的影響結果見圖1。薰衣草精油涂膜劑組和京萬紅燙傷膏組對蛋清所致大鼠足跖腫脹具有明顯抑制作用,且不同濃度薰衣草精油涂膜劑組表現(xiàn)了明顯的劑量依賴性,10%薰衣草精油涂膜劑組效果優(yōu)于京萬紅燙傷膏組。4皮膚屏障功能薰衣草精油對創(chuàng)面愈合療效顯著,但精油易揮發(fā),至目前為止尚未以薰衣草精油為主要成分的治療燒燙傷制劑問市。本實驗將薰衣草精油制成涂膜劑,可以充分發(fā)揮薰衣草精油的藥效。當前用于燒燙傷創(chuàng)面的外用藥大部分都難以完全隔離創(chuàng)面,創(chuàng)面容易感染,熏衣草涂膜劑與一般的外用擦劑相比,優(yōu)勢明顯:①該藥涂于皮膚表面后,形成一層均勻的藥膜能防止皮膚表面的水分蒸發(fā)和組織液的滲出,有利于藥物的吸收,起到了保護創(chuàng)面的作用,而且對創(chuàng)面有促進殘存上皮生長的作用。②止痛,具有抗菌消炎、清熱燥濕、瀉火解毒的作用。該涂膜劑還具有使用方便,即不污染衣物,又使創(chuàng)面免受外界污染等優(yōu)點。本研究采用經典的二甲苯致小鼠耳腫脹和蛋清誘導大鼠足腫脹模型觀察了薰衣草精油涂膜劑的抗炎作用,表明薰衣草精油涂膜劑具有劑量依賴性地抗炎作用。燒燙傷后皮膚的屏障功能被破壞,體內的水分、電解質、蛋白質和熱量可經燒燙傷創(chuàng)面損失,微生物可經燒燙傷創(chuàng)面侵入引起局部或全身感染。因此,重建或恢復皮膚屏障功能是燒燙傷治療的最終目標。Ⅲ度燙傷創(chuàng)面?zhèn)捌は陆M織,壞死的表皮和真皮含有大量毒素,可引發(fā)明顯的脂質過氧化反應,在創(chuàng)面的修復過程中,有效的抗氧化措施則可以促進愈合。薰衣草具有抗脂質過氧