還原糖的測定

還原糖是指含有自由甲基（葡萄糖）或酮基（如果是糖）的單糖和某些二糖（如葡萄糖和酒精）。在堿性溶液中,還原糖能將Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金屬離子還原,而糖本身被氧化成糖酸及其他產(chǎn)物。糖類的這種性質(zhì)常被用于糖的定性和定量測定。1測量1.1直接滴注法gb法1.1.1氧化亞銅的制備將一定量的堿性酒石酸銅甲、乙液等量混合,立即生成天藍色的氫氧化銅沉淀;這種沉淀很快與酒石酸鉀反應(yīng),生成深藍色的可溶性酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物。在加熱條件下,以次甲基藍作為指示劑,用樣液滴定,樣液中的還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應(yīng),生成紅色的氧化亞銅沉淀;這種沉淀與亞鐵氰化鉀絡(luò)合成可溶的無色絡(luò)合物;二價銅全部被還原后,稍過量的還原糖把次甲基藍還原,溶液由蘭色變?yōu)闊o色,即為滴定終點;根據(jù)樣液消耗量可計算出還原糖含量。1.1.2還原糖檢索表的計算(1)用已知濃度的葡萄糖標準溶液標定的方法;(2)利用通過實驗編制出的還原糖檢索表來計算。在測定過程中要嚴格遵守標定或制表時所規(guī)定的操作條件,如熱源強度(電爐功率)、錐形瓶規(guī)格、加熱時間、滴定速度等。1.1.3還原糖的測定本法又稱快速法,它是在藍-愛農(nóng)容量法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,其特點是試劑用量少,操作和計算都比較簡便、快速,滴定終點明顯。適用于各類食品中還原糖的測定。但測定醬油、深色果汁等樣品時,因色素干擾,滴定終點常常模糊不清,影響準確性。本法是國家標準分析方法。1.2磷酸滴注法1.2.1氧化亞銅的計算將一定量的樣液與一定量過量的堿性酒石酸銅溶液反應(yīng),還原糖將二價銅還原為氧化亞銅,經(jīng)過濾,得到氧化亞銅沉淀,加入過量的酸性硫酸鐵溶液將其氧化溶解,而三價鐵鹽被定量地還原為亞鐵鹽,用高錳酸鉀標準溶液滴定所生成的亞鐵鹽,根據(jù)高錳酸鉀溶液消耗量可計算出氧化亞銅的量,再從檢索表中查出與氧化亞銅量相當?shù)倪€原糖量,即可計算出樣品中還原糖含量。由反應(yīng)式可知,5摩爾氧化亞銅相當于2摩爾高錳酸鉀,故根據(jù)高錳酸鉀標準溶液的消耗量可計算出氧化亞銅量。再由氧化亞銅量檢索附表4得出相當?shù)倪€原糖量。1.2.2色樣液的測定,武本法是國家標準分析方法,適用于各類食品中還原糖的測定,有色樣液也不受限制。方法的準確度高,重現(xiàn)性好,準確度和重現(xiàn)性都優(yōu)于直接滴定法。但操作復(fù)雜、費時,需使用特制的高錳酸鉀法糖類檢索表。1.3somogii法1.3.1氧化亞銅的降解將一定量的樣液與過量的堿性銅鹽溶液共熱,樣液中的還原糖定量地將二價銅還原為氧化亞銅,生成的氧化亞銅在酸性條件下溶解為一價銅離子,并能定量地消耗游離碘,碘被還原為碘化物,而一價銅被氧化為二價銅。剩余的碘用硫代硫酸鈉標準溶液滴定,同時做空白實驗,根據(jù)硫代硫酸鈉標準溶液消耗量可求出與一價銅反應(yīng)的碘量,從而計算出樣品中還原糖含量。1.3.2生物材料的測量方法該法是微量法,檢出量為0.015~3mg。靈敏度高,重現(xiàn)性好,結(jié)果準確可靠。因樣液用量少,故可用于生物材料或經(jīng)過層析處理的微量樣品的測定。終點清晰,有色樣液不受限制。1.4甘油銅法1.4.1氧化亞銅和銅的制備將硫酸銅溶液加一定量甘油后與氫氧化鈉溶液混合生成可溶性的甘油酮溶液。準確吸取樣品溶液加適量甘油酮,在加熱條件下,以次甲基藍作為指示劑,用標準糖溶液滴定,樣液中的還原糖與甘油酮反應(yīng),生成紅色的氧化亞銅和銅沉淀。同時做空白實驗。根據(jù)兩次消耗標準糖的體積可計算出還原糖的含量。1.4.2斐林氏糖還原糖的制備本法是斐林式法的改進,終點明顯,易于掌握,重現(xiàn)性好,簡便快速,是測定還原糖