不同促透劑對(duì)黃體酮軟骨體外透皮吸收作用的影響

黃酮是一種天然激素藥物。這是黃體期從黃帝產(chǎn)生的黃體酮，也可以通過胎盤和腎臟產(chǎn)生。這是一種由21-碳i生產(chǎn)的激素。1934年，它首先合成并出售，促進(jìn)了子宮和乳房的發(fā)育，防止了流產(chǎn)。臨床上用于治療先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、月經(jīng)不調(diào)、子宮功能性出血、子宮內(nèi)膜異位癥,與雌激素合用時(shí)可用于避孕。目前,黃體酮軟膏在國外已經(jīng)上市,并廣泛用于絕經(jīng)前后婦女和更年期綜合征的治療,國內(nèi)尚未見。黃體酮軟膏為經(jīng)皮吸收制劑,其特點(diǎn)是藥物釋放恒定,血藥濃度穩(wěn)定,藥物經(jīng)過皮膚吸收,可避免肝臟的首過效應(yīng),能幫助更年期婦女保持血糖、鋅銅含量及細(xì)胞含氧水平的正常,減輕絕經(jīng)期綜合征癥狀,即潮熱、煩躁焦慮、內(nèi)心不安、記憶力減退、胸悶及皮膚張力下降、干燥、變薄等。月桂氮卓酮(氮酮,azone)為一種目前國內(nèi)外使用較多的優(yōu)良促透劑。本實(shí)驗(yàn)將氮酮、丙二醇、冰片與其它成分研制而成黃體酮軟膏,考察不同促透劑對(duì)黃體酮軟膏透皮吸收的影響。1試劑及儀器黃體酮標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品鑒定所提供),氮酮(天津市博迪化工有限公司,分析純),冰片(湖北金貴中藥飲片有限公司),丙二醇(北京中聯(lián)化工試劑廠,分析純),甲醇(西安化學(xué)試劑廠,分析純),生理鹽水(自制),醋酸纖維素膜(人工膜),硬脂酸、十六醇、蜂蠟、十二烷基硫酸鈉、液體石蠟、尼泊金乙酯、甘油均為分析純,天然薄荷香精(上海勵(lì)馳商貿(mào)有限公司)。改良的Franze擴(kuò)散池(江蘇海門三和中華玻璃儀器廠),紫外分光光度計(jì)(TU-1800,北京普析統(tǒng)儀器有限責(zé)任公司),超級(jí)恒溫水浴(重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠),電子磁力攪拌器(江蘇電分析儀器廠分廠),電子天平(北京賽多利斯天平儀器廠),電熱恒溫水浴鍋(北京醫(yī)療設(shè)備廠)。1.3黃體酮的檢測精密稱取黃體酮標(biāo)準(zhǔn)品5mg置5ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,再精密吸取1ml置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照溶液。分別精密吸取上述對(duì)照溶液0.2、0.5、0.8、1.2、1.5、1.8ml,分別置10ml容量瓶中,加甲醇并稀釋至刻度,搖勻。在紫外可見分光光度計(jì)上于242nm處測定吸收度,得回歸方程:C=16.834A+0.2382(r=0.9998,n=6),線性范圍2～18μg/ml,平均回收率為96.41%,日內(nèi)及日間精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于2.0%。精密稱取黃體酮原料藥、硬脂酸、十六醇、蜂蠟、氮酮,于70～80℃加熱熔化為油相,另取甘油、丙二醇及蒸餾水加熱至70～80℃,再加入十二烷基硫酸鈉、尼泊金乙酯溶解為水相。將油相加入水相中,迅速攪拌10min,至溫度降至50℃左右時(shí)加入天然薄荷香精,再繼續(xù)攪拌直至冷凝,即得均勻細(xì)膩含藥軟膏。按實(shí)驗(yàn)要求分別取氮酮、丙二醇、冰片加到上述含藥基質(zhì)中得到含有2%氮酮、2%氮酮+5%丙二醇、2%氮酮+1%冰片3種促透劑的黃體酮軟膏,不加促透劑(0%氮酮)的黃體酮軟膏。采用改良Franze擴(kuò)散池,裝置透皮面積為4.52cm2,接受池體積為16ml,在磁力攪拌條件下開啟循環(huán)水浴,(37±1)℃恒溫。取醋酸纖維素膜(人工膜)覆蓋在擴(kuò)散池上,將含有不同促透劑的含藥軟膏劑均勻涂在人工膜上并固定在擴(kuò)散池的供給室;在擴(kuò)散池的接受室加滿40%甲醇+60%生理鹽水,使其與人工膜接觸。將擴(kuò)散池的供給室、接受室緊密固定,排除氣泡,開啟循環(huán)水浴,(37±1)℃恒溫,磁力攪拌恒速。分別于加樣后1、2、4、6、8、10h從接受池中吸取2ml接受液置50ml容量瓶中并用恒溫(37℃)接受液稀釋至刻度,同時(shí)補(bǔ)加37℃的接受液2ml。于242nm處測定吸收度,代入回歸方程計(jì)算濃度,并根據(jù)下列公式求得單位面積藥物累計(jì)滲透量:Q=(CnVn+∑CiVi)/S(Cn為第n次取樣的濃度,Vn為第n次取樣的體積,Ci為第i次取樣的濃度,Vi為第i次取樣的體積)。采用PEMS3.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,所得數(shù)據(jù)用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±s)(xˉ±s)表示,計(jì)量資料采用q檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.01。2結(jié)果2.1透劑種類對(duì)黃體酮唇膏體外透皮吸收的影響在不同時(shí)間段取樣測定黃體酮的含量,3種不同促透劑對(duì)黃體酮軟膏體外透皮吸收產(chǎn)生不同的影響,其促透效果順序?yàn)?2%氮酮+5%丙二醇>2%氮酮+1%冰片>0%氮酮>2%氮酮(表1)。2.2混合促透劑的篩選以累計(jì)滲透量對(duì)時(shí)間的平方根進(jìn)行線性回歸,從回歸方程中提出滲透速率常數(shù)J,滲透速率常數(shù)與累計(jì)滲透量之間呈正相關(guān)。與0%氮酮和2%的氮酮比較,其余2種混合促透劑對(duì)黃體酮軟膏劑的透皮釋放量明顯增加,透皮速率明顯加快,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。2種促透劑聯(lián)合使用比1種促透劑單用效果更好,0%氮酮和單獨(dú)加2%氮酮促透效果不明顯,2%氮酮+5%丙二醇和2%氮酮+1%冰片的混合促透劑效果明顯,其中2%氮酮+5%丙二醇促透效果最明顯(P<0.01),見表2。3黃體酮含量測定的結(jié)果本實(shí)驗(yàn)選用醋酸纖維素膜(人工膜)為屏障,是因?yàn)樵陬A(yù)實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)鼠皮對(duì)黃體酮的透皮吸收有一定的干擾,選擇人工膜為屏障可以排除干擾,使測定方法更加準(zhǔn)確。除此之外,本實(shí)驗(yàn)中加5%丙二醇不僅可以加快黃體酮的釋放,而且可以增加黃體酮的溶解度。經(jīng)皮給藥制劑可以維持恒定的血藥濃度,降低不良反應(yīng)的發(fā)生率,使用方