大腸菌群計數檢驗

大腸菌群是指一群在37°C培養(yǎng)24小時能分解乳糖產酸產氣、需氧及兼E性va厭lu氧a的ti革on蘭o氏nl陰y.性無芽孢桿菌。ed?w作it為h

糞As便po污se染.指S指l標id，es有f廣or泛.的NE衛(wèi)T生3.學5意Cl義ient

Profi食品中C大op腸yr菌i群g群h數t

系2系0以04每-210010g1（As或pmoLs）e

檢Pt樣y

內Lt大d.腸菌群最可能數（themost

probablenumber-簡稱MPN）表示。舊國家標準Evaluation

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Ltd.第一法大腸菌群MPN計數法Evaluation

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Ltd.第二法大腸菌群平板計數法Evaluation

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Ltd.第一天第1、3、5、7小組：

使用第一法（附帶做第二法中，兩個平板接種），E以va自lu來a水ti為on樣o品nl。y.ed

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Ltd.第2、4、6小組：

使用第二法（附帶做第一法中，3個試管初發(fā)酵試驗），以污水為樣品。第一法：檢樣稀釋與初發(fā)酵試驗

MPN：表示食品中大腸菌群數是以每100ML或克檢樣內大腸菌群最大可能數。一般采用9管法.一般樣品25ML（克）+225ML生理鹽水=1：10，從

從10-2取樣1ML+9

ML生理鹽水=1：1000，從10-3取樣1ML，接種到3管LST中。Evaluation

only.ed1w0i-1t取h樣As1pMoLs，e接.S種li到de3s管fLoSrT（.N月E桂T桂3基.硫5硫C酸l鹽i鹽e胰nt蛋P白rofi胨肉湯）C中op。yright

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從10-1取樣1ML+9

ML生理鹽水=1：100，從10-2取樣

1ML，接種到3管LST中。第二法：檢樣稀釋與平板計數檢樣稀釋：同上。平板計數：1、每個稀釋度接種Ev2a個lu無at菌io平n

o皿nl，y.每皿1mL稀ed

w釋it樣h

A品sp，os另e.外Sl一id個es平f皿or加.N1EmTL生3.理5

C鹽li水en作t

空Profi白對照Co。pyright

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Ltd.2、及時將15—20mLVRBA（結晶紫中性紅膽鹽瓊脂）傾注每個平皿中。3、待瓊脂凝固后，再加3—4mLVRBA覆蓋表層。翻轉平板培養(yǎng)。第二天第一法

復發(fā)酵試驗Evaluation

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用A用sp接os種e.環(huán)Sl從ide產s

氣for的.LNSESTT肉3.湯5湯C管li中ent分P別rofi取培養(yǎng)Co物pyr1i環(huán)gh，t

2移00種4-于20煌1煌1

綠As乳pos糖e

膽Pty鹽L肉td.湯（BGLB）管中，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h，觀察產氣情況。產氣者，計為大腸菌群陽性管。第二法

平板菌落數的選擇與證實試驗平板菌落數的選擇選取菌落數在15CFU～150CFU

之間的平板，分別計數平板上出現的典型和可疑大腸菌群菌落。典型菌落為紫紅色，菌落周圍Ev有al紅ua色t的i的o膽n

鹽o鹽n沉ly淀.

環(huán)，菌落直徑ed

w為i0t.h5Ammsmp或os更e.大Sl。ides

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Profi證實試驗Copyright

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Ltd.從VRBA

平板上挑取10個不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于BGLB

肉湯管內，36

℃±1

℃培養(yǎng)24

h～48

h，觀察產氣情況。凡BGLB

肉湯管產氣，即可報告為大腸菌群陽性。（2）原理膽鹽可以抑制其它細菌生長繁殖。分解乳糖產酸產氣的大腸菌群，看小倒管中的氣體。

溴甲酚紫，中性時呈藍紫色，酸性時呈黃色，如果顏色不變（呈藍紫色），說明無產酸的大腸菌群；如果顏色變黃色，E說va明l可ua能ti出on現o能nl分y解.乳糖產酸的ed

w大it腸h菌As群po。se.Slides

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Ltd.21 產氣不產氣杜氏發(fā)酵管產氣情況Evaluation

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Ltd.第四天：大腸菌群計數報告第一法：確證大腸菌E群vaLlSuTa陽ti性on管o數nl，y.檢索ed

wiMtPhNA表sp（os見e.附Sl錄id）es，f報o報r告.N每ETg（3（.m5mLC）li樣ent

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Ltd.品中大腸菌群的MPN值。第二法：經最后證實為大腸菌群陽性的試管比例乘以結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）中計數的平板菌落數，再乘以稀釋倍數，E即va為l每uagt（iomnL）on樣ly品.中大腸菌群數ed

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Profi例：10C-4o樣py品ri