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抗原抗體相關(guān)內(nèi)容抗原抗體反應(yīng)特點(diǎn)1:特異性:一種抗原只能和相應(yīng)的抗體結(jié)合。2:比例性:抗原抗體的濃度比例適當(dāng)時(shí),才出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。3:可逆性:一定條件下抗原抗體反應(yīng)是可逆的。4:階段性:特異性結(jié)合階段和肉眼可見(jiàn)凝集階段。
表
抗原抗體反應(yīng)的基本類(lèi)型表反應(yīng)類(lèi)型實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)方法敏感度沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀、檢測(cè)濁度+,++++
瓊脂凝膠擴(kuò)散觀察掃描沉淀線或環(huán)+
凝膠電泳技術(shù)或峰或弧++補(bǔ)體參與反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)以裸眼或光電比色儀++
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)觀察測(cè)定溶血現(xiàn)象+++免疫標(biāo)記技術(shù)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)熒光現(xiàn)象++++
放射免疫技術(shù)檢測(cè)放射性++++
酶標(biāo)免疫技術(shù)檢測(cè)酶底物顯色++++
發(fā)光免疫技術(shù)測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度++++
生物素-親合素技術(shù)結(jié)合其它標(biāo)記技術(shù)++++
金標(biāo)免疫技術(shù)檢測(cè)金顆粒沉淀++++凝集反應(yīng)
直接凝集試驗(yàn)用裸眼、放大鏡或顯+
間接凝集試驗(yàn)微鏡觀察紅細(xì)胞或膠++
凝集抑制試驗(yàn)乳等顆粒和各種凝集+++
協(xié)同凝集試驗(yàn)現(xiàn)象+++
抗球蛋白試驗(yàn)+++中和反應(yīng)病毒中和試驗(yàn)病毒感染性喪失+
毒素中和試驗(yàn)外毒素毒性丟失++抗體類(lèi)型
抗體依據(jù)重鏈抗原性的不同分為五類(lèi):IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。免疫球蛋白GIgG是生物體液內(nèi)主要的Ig,約占血液中Ig總量的70~75%。由于IgG能通過(guò)胎盤(pán),所以新生兒從母體獲得的
IgG在抵抗感染方面起重要作用。嬰兒出生后2~4周開(kāi)始合成IgG,8歲以后血清中IgG可達(dá)到成人水平。由于IgG較其他類(lèi)Ig更易擴(kuò)散到血管外的間隙內(nèi),因而在結(jié)合補(bǔ)體、增強(qiáng)免疫細(xì)胞吞噬病原微生物和中和細(xì)菌毒素的能力方面,具有重要作用,能有效地抗感染,這是對(duì)人體有利的一面。但某些自身免疫病,如自身免疫性溶血性貧血、血小板減少性紫癜、紅斑狼瘡以及類(lèi)風(fēng)濕等中的自身抗體都是IgG。一旦它與相應(yīng)的自身細(xì)胞結(jié)合,反而加強(qiáng)了組織損傷作用。免疫球蛋白M
IgM在Ig中分子量最大,通常稱為巨球蛋白,占血清Ig總量的10%。在電子顯微鏡下觀察,IgM由五個(gè)基本結(jié)構(gòu)相同的單體組成。各單位間由一條連結(jié)鏈(J鏈)連結(jié)成“星狀”的五聚體。IgM是在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中最早產(chǎn)生的抗體,也是經(jīng)抗原刺激的動(dòng)物體內(nèi)最先出現(xiàn)的抗體,因此檢查IgM的含量,有助于傳染病的早期診斷。IgM在胎兒3個(gè)月后即開(kāi)始合成,但水平很低,1~2歲時(shí)血清中IgM含量達(dá)到成人水平。通過(guò)結(jié)合補(bǔ)體,IgM有溶解細(xì)菌和溶解血細(xì)胞的作用,并能中和病毒,其效能比IgG高100倍以上。很多抗微生物的天然抗體、同族血凝素(抗A型與抗B型血)、類(lèi)風(fēng)濕病中的類(lèi)風(fēng)濕因子以及梅毒的補(bǔ)體結(jié)合抗體都屬于IgM。檢驗(yàn)科的應(yīng)用乙肝兩隊(duì)半(ELISA)乙肝表面抗原HBsAg是HBV感染后第一個(gè)出現(xiàn)的血清學(xué)標(biāo)志物,HBsAg(+)表明體內(nèi)有乙肝感染,但不反映乙肝病毒有無(wú)復(fù)制,復(fù)制程度,傳染性強(qiáng)弱。方法:
雙抗體夾心法:①將含有已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗滌一次;②加待測(cè)抗原,如兩者是特異的,則發(fā)生結(jié)合,然后把多余抗體洗除;③加入與待測(cè)抗原呈特異反應(yīng)的酶聯(lián)抗體,使形成“夾心”;④加入該酶的底物,若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生,說(shuō)明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原。乙肝表面抗體
HBsAb是乙肝病毒中和抗體,意味著人體對(duì)乙肝產(chǎn)生了抵抗力。乙肝感染者出現(xiàn)HBsAb說(shuō)明病毒已基本清除。接種疫苗或感染乙肝病毒靠自身免疫力清除病毒的人也會(huì)產(chǎn)生此抗體。方法:
雙抗原夾心法乙肝E抗原HBeAg是體內(nèi)HBV復(fù)制及血清具有傳染性的指標(biāo)。HBeAg在體內(nèi)存在的時(shí)間一般不超過(guò)10周,否則表明乙肝慢性化。HBeAg轉(zhuǎn)陰表明病毒復(fù)制水平降低,病變趨于停止。方法:雙抗體夾心法乙肝病毒E抗體HBeAb常出現(xiàn)于HBeAg轉(zhuǎn)陰后,預(yù)示患者傳染性已顯著或相對(duì)降低。持續(xù)HBeAb說(shuō)明乙肝傳染性較弱。方法:競(jìng)爭(zhēng)法:檢測(cè)時(shí)加入待測(cè)樣本,使樣本中的待測(cè)抗體與酶標(biāo)板上的抗原結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的抗體,此抗體也可與酶標(biāo)板上的抗原結(jié)合,由于酶標(biāo)板上固著的抗原數(shù)量有限,因此當(dāng)樣本中抗體的量越多,則酶標(biāo)記抗體可結(jié)合的包被抗原就越少,兩種抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合包被抗原,所以稱為競(jìng)爭(zhēng)法。乙肝核心抗體HBcAb常緊繼HBsAg、HBeAg之后在血清中檢出,HBcAb主要分為HBcAbIgM和HBcAbIgG。HBcAbIgM在乙肝急性期為高滴度,是判斷急性乙肝的重要指標(biāo)。隨著急性乙肝的恢復(fù),抗HBcAbIgM滴度降低乃至消失,如果持續(xù)高滴度,常表明慢性化傾向。急性感染恢復(fù)期和慢性持續(xù)感染以HBcAbIgG為主。方法:競(jìng)爭(zhēng)法乙肝兩對(duì)半結(jié)果解釋1.乙肝五項(xiàng)第1項(xiàng)陽(yáng)性,其余四項(xiàng)陰性,說(shuō)明是急性病毒感染的潛伏期后期。2.乙肝五項(xiàng)第1、3、5項(xiàng)陽(yáng)性,其余兩項(xiàng)陰性,俗稱乙肝大三陽(yáng),說(shuō)明是急、慢性乙肝,傳染性相對(duì)較強(qiáng)。3.乙肝五項(xiàng)第1、4、5項(xiàng)陽(yáng)性,其余兩項(xiàng)陰性,俗稱乙肝小三陽(yáng),說(shuō)明是急、慢性乙肝,傳染性相對(duì)較弱。4.乙肝五項(xiàng)第1、3項(xiàng)陽(yáng)性,其余三項(xiàng)陰性。說(shuō)明是急性乙肝的早期。5.乙肝五項(xiàng)第1、3、4、5項(xiàng)陽(yáng)性,說(shuō)明急性乙肝感染趨向恢復(fù),或者為慢性乙肝病毒攜帶者。6.乙肝五項(xiàng)第1、4項(xiàng)陽(yáng)性,其余三項(xiàng)陰性,說(shuō)明慢性乙肝表面抗原攜帶者易轉(zhuǎn)陰,或者是急性感染趨向恢復(fù)。7.乙肝五項(xiàng)第1、5項(xiàng)陽(yáng)性,其余三項(xiàng)陰性,說(shuō)明是急、慢性乙肝,即:①急性HBV感染;②慢性HBsAg攜帶者;③傳染性弱。8.乙肝五項(xiàng)第5項(xiàng)陽(yáng)性,其余四項(xiàng)陰性,說(shuō)明:①既往感染未能測(cè)出抗-HBs;②恢復(fù)期HBsAg已消,抗-HBs尚未出現(xiàn);③無(wú)癥狀HBsAg攜帶者。9.乙肝五項(xiàng)第2、4、5項(xiàng)陽(yáng)性,其余兩項(xiàng)陰性,說(shuō)明是乙肝的恢復(fù)期,已有免疫力。10.乙肝五項(xiàng)第2項(xiàng)陽(yáng)性,其余四項(xiàng)陰性,說(shuō)明:①曾經(jīng)注射過(guò)乙肝疫苗并產(chǎn)生了抗體,有免疫力;②曾經(jīng)有過(guò)乙肝病毒的感染,并且有一定的免疫力;③假陽(yáng)性。11.乙肝五項(xiàng)第2、5項(xiàng)陽(yáng)性,其余三項(xiàng)陰性,說(shuō)明是接種了乙肝疫苗以后,或是乙肝病毒感染后已康復(fù),已有免疫力。12.乙肝五項(xiàng)第4、5項(xiàng)陽(yáng)性,其余三項(xiàng)陰性,說(shuō)明是急性乙肝病毒感染的恢復(fù)期,或曾經(jīng)感染過(guò)病毒。13.乙肝五項(xiàng)全陰,說(shuō)明過(guò)去和現(xiàn)在未感染過(guò)HBV,但目前沒(méi)有保護(hù)性抗體。案例患者因停經(jīng)33天,不規(guī)則少量陰道流血16天,加重1天,前來(lái)就診,留取中段尿測(cè)HCG,結(jié)果弱陽(yáng)性。
接著護(hù)士送來(lái)此病人的血液,要測(cè)其血β-HCG含量,這弱陽(yáng)性尿要測(cè)血β-HCG含量在臨床中也司空見(jiàn)慣了,也沒(méi)太多在意,在測(cè)定其血β-HCG定量的時(shí)候,按照習(xí)慣用早早孕試紙測(cè)一下看看是否陽(yáng)性,從而決定是否需要稀釋樣本上機(jī)測(cè)定,試劑盒:總?cè)私q毛膜促性腺激素測(cè)定試劑盒(直接化學(xué)發(fā)光法)。早早孕試紙測(cè)試血顯示如圖,此時(shí)看到是和尿HCG結(jié)果是相符合的:
憑著以往的經(jīng)驗(yàn),不用稀釋直接可以上機(jī)測(cè)定,結(jié)果儀器報(bào):hCG值大于濃度范圍。
這時(shí)候,有了懷疑,在儀器上選擇了稀釋200倍,繼續(xù)測(cè)定,結(jié)果,hCG值再次報(bào)大于濃度范圍,結(jié)果仍然無(wú)法測(cè)出,已經(jīng)超出儀器的自動(dòng)檢測(cè)范圍了,最大自動(dòng)稀釋200倍,到底是什么原因?查看病人的診斷:陰道流血查因,查質(zhì)控,質(zhì)控在控,這到底哪里出了問(wèn)題?后來(lái)手工稀釋4倍,再在ADVIA@CentaurCP系統(tǒng)上選擇200倍,最終稀釋800倍,結(jié)果出來(lái)了,hCG:579476.4mIU/ml。而就在此時(shí),得知B超檢查示:子宮增大,聲像圖改變符合葡萄胎。
問(wèn)題到這里大家應(yīng)該知道是什么原因了,葡萄胎因滋養(yǎng)細(xì)胞增生,產(chǎn)生大量HCG,血清中HCG濃度大大高于正常妊娠時(shí)相應(yīng)月份值,因此利用這種差別可作為葡萄胎的輔助診斷。由于正常妊娠時(shí)HCG分泌峰值在第60~70天,可能與葡萄胎發(fā)病時(shí)間同期,而造成診斷困難,若能連續(xù)測(cè)定HCG或B超檢查同時(shí)進(jìn)行,即可作出鑒別。這是一個(gè)典型的鉤狀效應(yīng),此例膠體金免疫層析實(shí)測(cè)定尿液中hCG時(shí),反應(yīng)中hCG(抗原)過(guò)量導(dǎo)致免疫夾心復(fù)合物不能正常形成,抗原抗體比例失調(diào),影響反應(yīng)結(jié)果。最后附上此標(biāo)本不同倍數(shù)稀釋后測(cè)試的情況,供大家參考:原液,5倍,10倍,1
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