ICS

67.120.20CCS

X

1834 DB34/T

4207—2022雞排泄物中氧氟沙星的含量檢測相色譜-熒光檢測法Determination

of

in

chicken—High

performance

liquidchromatography-fluorescence

發(fā)布

實施安徽省市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB34/T

4207—2022 本文件按照GB/T

1.1—2020《標準化工作導則

第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由安徽省獸藥飼料監(jiān)察所提出。本文件由安徽省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。預防控制中心。發(fā)全、馬騰飛、郝金華、陳守美、謝俊東、宋亞偉。DB34/T

4207—2022 1范圍本文件規(guī)定了雞排泄物中氧氟沙星含量的高效液相色譜-熒光檢測方法。本文件適用于雞排泄物中氧氟沙星含量的測定。2 規(guī)范性引用文件文件。GB/T

6682

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4 原理檢測器測定，外標法定量。5 試劑和材料除特殊說明外，本方法所用試劑均為分析純，水為符合

GB/T

6682

規(guī)定的一級水。試劑5.1.1

乙腈：色譜純。5.1.2

甲醇。5.1.3

乙酸。5.1.4

鹽酸。5.1.5

磷酸：855.1.6

三乙胺。溶液配制5.2.1

0.1

mol/L

鹽酸溶液：取鹽酸

9

mL，加水稀釋到

1000

mL，混勻。5.2.2

20％

乙酸甲醇溶液：取乙酸

200

mL，加入甲醇溶液至

1000

mL，混勻。5.2.3

0.02

mol/L

85％

的磷酸

2.31

g，加水溶解并定容至

，混勻。5.2.4

三乙胺磷酸溶液：取

0.02

mol/L

磷酸溶液

1000

，加入

1.4

mL

三乙胺，混勻。DB34/T

4207—20225.2.5 流動相：分別取乙腈和三乙胺磷酸溶液（5.3.4）按體積比

10：90

混勻。標準品及標準溶液配制5.3.1 標準品：氧氟沙星標準品（CAS

號：82419-36-1），純度

≥

98.0％。5.3.2 標準儲備液（

mg/mL）：取氧氟沙星標準品

10

，精密稱定，用

1

的

0.1

mol/L

鹽酸溶解后，加水稀釋并定容至

容量瓶，配制成濃度為

mg/mL

4℃避光保存，有效期

3

個月。5.3.3標準工作液（10

μ）：準確量取上述標準儲備液（

mg/mL）

1

mL，加水稀釋并定容至50

mL

容量瓶，配制成濃度為

μg/mL

的標準工作液，于

4

℃避光保存，有效期

1

個月。6儀器和設備高效液相色譜儀：配熒光檢測器。分析天平：感量

0.1

g、

mg、0.01

mg。高速冷凍離心機：≥

r/min。超聲波儀。氮吹儀。渦旋混合儀。無機濾膜：0.45

μm。7 試樣的制備與保存試樣的制備取適量新鮮或解凍的空白或供試雞排泄物，混勻，如下：——取混勻后的供試樣品，作為試樣；——取混勻后的空白樣品，作為空白試樣；——取混勻后的空白樣品，添加適宜濃度的標準工作液，作為空白添加試樣作為空白試樣。試樣的保存-18℃

以下保存，3

個月內(nèi)進行分析測試。8 測定步驟提取稱取

5

g（精確至

0.1

g）雞排泄物樣品，加入

％

乙酸甲醇溶液（5.3.2）

10

mL，以

2500r/min渦旋混勻

s，超聲溶解

15

5000

r/min

離心

5

min，取

8

mL

上清液氮氣吹干，加流動相

1

mL，以

2500

渦旋混勻

30

s，超聲溶解

15

min，以

16000

r/min

4℃離心

10

，取上清液過

0.45

μm

的濾膜，供高效液相色譜儀測定。測定8.2.1 色譜條件??×??2×1000

(1)DB34/T

4207??×??2×1000

(1)色譜柱：C18柱（250

mm×

mm，5

μm）或相當者；檢測波長：熒光激發(fā)波長為

280

nm，發(fā)射波長為

nm；流動相：乙腈-三乙胺磷酸溶液（5.3.4），按體積比

10：（流速：1.0

mL/min；柱溫：30進樣量：20

μL。8.2.2 測定法多點校準，以保留時間定性，峰面積定量。氧氟沙星標準色譜圖見附錄AA.1?？瞻自囼炄】瞻自嚇?，除不加標準溶液外，采用相同的測定步驟進行平行操作。9 結果的計算與表述試樣中氧氟沙星的含量利用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計算或按式(1)計算：??

=

??×??1×??3×1000式中：X

——

試樣中被測組分的含量，單位為微克每千克（μg/kgC

——

試樣溶液中氧氟沙星的濃度，單位為納克每毫升（ng/mLV1

——

提取液體積，單位為毫升（mL）；V2

——

取出上清液體積，單位為毫升（mL）；V3

——

試樣定容體積，單位為毫升（mLM

——

試樣取樣質(zhì)量，單位為克（g）。10 靈敏度、準確度和精密度靈敏度本方法的檢出限為

μ，定量限為

μg/kg。準確度本方法在雞排泄物

μ～