考點(diǎn)3DNA的粗提取與鑒定及DNA片段的擴(kuò)增與鑒定1.DNA的粗提取與鑒定2.DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定（1）原理（2）方法步驟基礎(chǔ)自測(cè)1.進(jìn)行“DNA的粗提取”實(shí)驗(yàn)時(shí)，為獲得較好的提取效果，應(yīng)離心2次，第一次離心后應(yīng)保留上清液，第二次離心后應(yīng)棄去上清液，且兩次離心的轉(zhuǎn)速也不相同。（√）2.TaqDNA聚合酶是用PCR儀對(duì)DNA分子擴(kuò)增過程中常用的一種耐高溫的DNA聚合酶。（√）3.PCR中離心的目的是讓反應(yīng)組分在離心管中分層分布。（×）4.電泳鑒定PCR產(chǎn)物時(shí)，應(yīng)在每個(gè)加樣孔中加入等量的PCR產(chǎn)物與凝膠載樣緩沖液的混合液。（×）5.粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后顯藍(lán)色[2023江蘇，T9D]。（×）6.過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解[2022山東，T13A]。（√）深度思考1.能否選擇哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞作為DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)材料，為什么？提示不能。因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和線粒體等，不含DNA。2.DNA的電泳鑒定實(shí)驗(yàn)中，影響DNA分子遷移速率的因素有哪些？提示影響DNA分子遷移速率的因素有凝膠濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等。研透高考明確方向命題點(diǎn)1DNA的粗提取與鑒定1.[2023廣東改編]“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過程是：裂解→分離→沉淀→鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是（D）A.裂解：使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B.分離：可去除混合物中的部分多糖、蛋白質(zhì)等C.沉淀：可反復(fù)多次以提高DNA的純度D.鑒定：加入二苯胺試劑后即呈現(xiàn)藍(lán)色解析“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過程是：裂解、分離、沉淀、鑒定。裂解的目的是使細(xì)胞破裂，釋放出DNA等物質(zhì)，A正確。DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理，可以初步分離DNA與蛋白質(zhì)等，分離過程中混合物中的部分多糖、蛋白質(zhì)等可被去除，B正確。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，通過控制NaCl溶液的濃度可去除雜質(zhì)，反復(fù)多次以提高DNA的純度，C正確。進(jìn)行DNA鑒定時(shí)可以使用二苯胺試劑，但要進(jìn)行沸水浴加熱后才能觀察到顏色變化，D錯(cuò)誤。命題點(diǎn)2DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定2.[2023浙江6月]某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計(jì)了引物1和引物2用于PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。圖甲圖乙下列敘述正確的是（B）A.Gata3基因的啟動(dòng)子無法控制GFP基因表達(dá)B.翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C.2號(hào)條帶的小鼠是野生型，4號(hào)條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子D.若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分雜合子和純合子解析由圖甲可知，Gata3基因與GFP基因共用一個(gè)啟動(dòng)子，且由題干可知兩基因能正常表達(dá)出相關(guān)蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；由于啟動(dòng)子在左側(cè)，基因在右側(cè)，轉(zhuǎn)錄基因時(shí)，先轉(zhuǎn)錄Gata3基因，再轉(zhuǎn)錄GFP基因，且翻譯的方向是沿mRNA從5'→3'，因此翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正確；由圖乙可知，大片段包含GFP基因編碼區(qū)片段，小片段不包含GFP基因編碼區(qū)片段，則2號(hào)小鼠是Gata3-GFP基因純合子，4號(hào)小鼠是野生型，C錯(cuò)誤；若