江蘇省南通市海安高級中學(xué)2023-2024學(xué)年高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列關(guān)于育種的敘述，正確的是（）A．雜交育種的原理是染色體變異B．多倍體育種得到的個體都能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂C．單倍體育種比誘變育種的目的性強，比雜交育種的年限短D．通過人工誘變，人們有目的地選育新品種，能避免育種的盲目性2．T細(xì)胞表面有兩種特殊的蛋白質(zhì)——CD28和CTLA-4，二者與癌細(xì)胞表面的B7蛋白結(jié)合后，細(xì)胞免疫或被“激活”或被“抑制”?？蒲腥藛T制備接種了癌細(xì)胞的模型小鼠，并均分為三組。實驗組分別注射抗CD28抗體和抗CTLA-4抗體，定時測定腫瘤面積得到如圖所示結(jié)果。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．T細(xì)胞表面CTLA-4與B7蛋白結(jié)合后其免疫功能受到抑制B．T細(xì)胞表面CD28與B7蛋白結(jié)合后可激活細(xì)胞免疫C．CD28既是抗CD28抗體的抗原，又是B7蛋白的抗體D．注射抗CTLA-4抗體對抑制癌細(xì)胞增生具有積極意義3．研究表明，抑郁癥與單胺類遞質(zhì)傳遞功能下降相關(guān)。單胺氧化酶是一種單胺類遞質(zhì)的降解酶，其抑制劑(MAOID)是一種常用抗抑郁藥。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是（）A．細(xì)胞X通過胞吐釋放神經(jīng)遞質(zhì)，可保證遞質(zhì)大量迅速釋放B．單胺類遞質(zhì)與蛋白M結(jié)合后，即可使細(xì)胞Y產(chǎn)生動作電位C．若細(xì)胞Y上蛋白M的數(shù)量減少，則可能會導(dǎo)致人患抑郁癥D．MAOID能增加突觸間隙的神經(jīng)遞質(zhì)濃度，從而起到抗抑郁的作用4．2019年，澳大利亞的山火肆虐，過火面積大，對人類和森林生態(tài)系統(tǒng)帶來危害。下列敘述正確的是（）A．過火地區(qū)上的所有植物構(gòu)成一個群落B．過火地區(qū)的群落演替過程中優(yōu)勢物種被替代主要是植物之間競爭的結(jié)果C．森林能提供木材體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值D．火災(zāi)過后的森林發(fā)生的演替類型是初生演替5．下列為減少實驗誤差而采取的措施，錯誤的是選項實驗內(nèi)容減少實驗誤差采取的措施A對培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量進(jìn)行計數(shù)多次計數(shù)取平均值B調(diào)查人群中紅綠色盲發(fā)病率調(diào)查足夠大的群體，隨機(jī)取樣并統(tǒng)計C觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原觀察對洋蔥鱗片葉外表皮臨時裝片進(jìn)行了三次觀察D用標(biāo)志重捕法調(diào)查某動物的種群密度標(biāo)志物不能過于明顯A．A B．B C．C D．D6．miRNA是人體的一類內(nèi)源性非編碼RNA，長度為19-25個核苷酸。某miRNA能抑制W基因控制的W蛋白的合成，其形成和發(fā)揮作用的過程如下圖。敘述正確的是（）A．miRNA指導(dǎo)合成的肽鏈最多含8個氨基酸B．圖中①和②過程都只能發(fā)生A與U配對，不能發(fā)生T與A配對C．若miRNA不發(fā)揮作用，W基因mRNA同時結(jié)合多個核糖體合成多條相同肽鏈D．miRNA通過抑制W基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而抑制W蛋白的合成二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）番茄紅素具有一定的藥用價值，但普通番茄合成的番茄紅素易發(fā)生轉(zhuǎn)化（如圖甲），科學(xué)家設(shè)計了一種重組DNA（質(zhì)粒三），該DNA能表達(dá)出雙鏈RNA（發(fā)卡），番茄細(xì)胞能識別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解，從而提高果實中番茄紅素的含量（如圖乙）。請分析回答下列問題：（1）在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技術(shù)，該技術(shù)的原理是________________________。

（2）根據(jù)圖甲推知，轉(zhuǎn)錄出“發(fā)卡”的DNA片段實際上是兩個反向連接的________________基因，上述過程通過阻止該基因在細(xì)胞內(nèi)的_______________（填“轉(zhuǎn)錄”或“翻譯”），提高了果實中番茄紅素的含量。（3）為保證圖中的片段A反向連接，處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是______________________。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________，該DNA分子仍可以和目的基因連接，形成缺少___________個磷酸二酯鍵的重組質(zhì)粒，隨后在細(xì)胞中被修復(fù)。（5）可利用___________________法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞。8．（10分）有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境。科研人員通過人工篩選獲得高效的苯磺隆降解菌，將其擴(kuò)大培養(yǎng)后投入污染土壤中，可將土壤中的苯磺隆降解。請回答下列問題：（1）欲選擇性獲得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆污染的土壤中取樣，并在含有_______、________及水和無機(jī)鹽等的基本培養(yǎng)基上添加_______進(jìn)行選擇培養(yǎng)。（2）若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)，也可選用________方法統(tǒng)計活菌數(shù)目。（3）將篩選的苯磺隆降解菌固定在一定的空間內(nèi)定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯橫隆降解菌的一般方法為包埋法，不使用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法的原因是__________。（4）研究人員從苯磺隆降解菌中分離出苯磺隆降解酶，分離該降解酶的常用方法有凝膠色譜法和__________。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)____________進(jìn)行分離。9．（10分）果蠅的灰體和黑檀體是一對相對性狀，由一對等位基因N、n控制；直剛毛和焦剛毛為一對相對性狀，受另一對等位基因M、m控制?，F(xiàn)有灰體直剛毛雌果蠅與黑擅體焦剛毛雄果蠅雜交，F(xiàn)1全為灰體直剛毛；取F1某個體與某黑檀體焦剛毛個體雜交，F(xiàn)2雌雄果蠅均表現(xiàn)為灰體直剛毛：灰體焦剛毛：黑檀體直剛毛：黑檀體焦剛毛=1：1：1：1。請回答下列問題：（1）從題干中可以判斷____________________為顯性性狀。如果基因M、m只位于X染色體上，則題干中“F1某個體”與“某黑檀體焦剛毛個體”的性別應(yīng)該分別是__________。（2）根據(jù)F2的表現(xiàn)型及比例可以推測基因，N/n與M/m在遺傳上遵循定律_______。（3）現(xiàn)已知基因N、n位于常染色體上，基因M、m位于X染色體上。請你從F2中選取表現(xiàn)型相同的個體，通過一次雜交實驗，驗證該結(jié)論，并寫出預(yù)期實驗結(jié)果。（注：不考慮基因位于X、Y染色體同源區(qū)段上）雜交組合：______________。預(yù)期結(jié)果：_______________________________________。（4）基因型為Nn的果蠅在形成配子時，若減數(shù)第一次分裂中期出現(xiàn)基因組成為NN的細(xì)胞，可能的原因有________________________________；若出現(xiàn)下圖所示細(xì)胞，最可能的原因是__________________________。10．（10分）人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從人血漿中制備。圖一是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA的兩條途徑，其中報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為相關(guān)限制酶的識別序列和切割位點，以及HAS基因兩側(cè)的核苷酸序列。據(jù)圖回答下列問題：（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，我們常常用不同的限制酶去切割目的基因和運載體來獲得不同的黏性末端，原因是_____。依據(jù)圖一和圖二分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時下列敘述錯誤的是____A．應(yīng)該使用酶B和酶C獲取HSA基因B．應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒C．成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個酶A的識別位點D．成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到2個DNA片段（2）PCR技術(shù)應(yīng)用的原理是_____，在利用該技術(shù)獲取目的基因的過程中，以從生物材料中提取的DNA作為模板，利用_________尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。（3）圖一過程①中需將植物細(xì)胞與_______________________混合后共同培養(yǎng)，旨在讓__________________整合到植物細(xì)胞染色體DNA上；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含_____的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。（4）圖一③過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多，也是最為有效的方法是_____。（5）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的_____，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗。11．（15分）“海水稻”是耐鹽堿水稻，能通過細(xì)胞代謝在根部產(chǎn)生一種調(diào)節(jié)滲透壓的代謝產(chǎn)物，此代謝產(chǎn)物在葉肉細(xì)胞和莖部卻很難找到。自然狀態(tài)下，“海水稻”單株生長，自花受粉。抗病、易感病以及莖的高矮是兩對獨立遺傳的性狀?？共『鸵赘胁∮苫騁和g控制，抗病為顯性；莖的高矮由兩對獨立遺傳的基因（D、d、E、e）控制，同時含有基因D和E表現(xiàn)為矮莖，只含有基因D或E表現(xiàn)為中莖，其他表現(xiàn)為高莖。現(xiàn)有親本為易感病矮莖和抗病高莖的純合子，欲培育純合的抗病矮莖“海水稻”品種。（1）“海水稻”產(chǎn)生調(diào)節(jié)滲透壓的代謝產(chǎn)物在莖部和葉肉細(xì)胞中很難找到，而存在于根部細(xì)胞中的根本原因是__________________________________。（2）某“海水稻”品種M是用野生海水稻與栽培稻雜交后，經(jīng)多年耐鹽堿選育獲得，其耐鹽堿能力遠(yuǎn)強于野生海水稻，且產(chǎn)量高，則獲得品種M的育種原理有_____________。（3）若只考慮莖的高矮這一相對性狀，兩親本雜交所得的F1在自然狀態(tài)下繁殖，理論上F2的表現(xiàn)型及比例為_________________________________。（4）若利用題干兩親本，通過單倍體育種，理論上獲得純合的抗病矮莖“海水稻”品種的概率是___________，試簡述該育種過程___________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

四種育種方法的比較如下表:雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法雜交→自交→選優(yōu)輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理基因重組基因突變?nèi)旧w變異(染色體組先成倍減少,再加倍,得到純種)染色體變異(染色體組成倍增加)【詳解】A、雜交育種的原理是基因重組，A錯誤；B、多倍體育種得到的三倍體個體不能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂，B錯誤；C、單倍體育種比誘變育種的目的性強，比雜交育種的年限短，C正確；D、基因突變是不定向的，通過人工誘變育種盲目性大，D錯誤。故選C。2、C【解析】

據(jù)圖示結(jié)果可推測，注射抗CD28抗體的一組與對照組結(jié)果相近——癌細(xì)胞大量增殖，說明CD28在“激活”細(xì)胞免疫中具有重要作用，同樣道理注射抗CTLA-4抗體的一組癌細(xì)胞被清除掉了，說明CTLA-4具有“抑制”細(xì)胞免疫的作用?！驹斀狻緼、抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合后，會使抗原失去原有作用。注射抗CTLA-4抗體的一組癌細(xì)胞被清除掉了，說明CTLA-4具有“抑制”細(xì)胞免疫的作用，A正確；B、注射抗CD28抗體的一組與對照組結(jié)果相近——癌細(xì)胞大量增殖，說明CD28在“激活”細(xì)胞免疫中具有重要作用，B正確；C、CD28是抗CD28抗體的抗原，但不是B7蛋白的抗體，C錯誤；D、注射抗CTLA-4抗體的一組癌細(xì)胞被清除掉了，說明CTLA-4具有“抑制”細(xì)胞免疫的作用，因此注射抗CTLA-4抗體對抑制癌細(xì)胞增生具有積極意義，D正確。故選C3、B【解析】

由圖可知，細(xì)胞X可以釋放神經(jīng)遞質(zhì)，作用于細(xì)胞Y，故細(xì)胞X屬于突觸前神經(jīng)元?！驹斀狻緼、細(xì)胞X通過胞吐釋放小分子神經(jīng)遞質(zhì)，可保證遞質(zhì)在短時間內(nèi)大量釋放，該過程需要消耗能量，A正確；B、單胺類遞質(zhì)與蛋白M結(jié)合后，陽離子內(nèi)流后才使細(xì)胞Y產(chǎn)生動作電位，B錯誤；C、細(xì)胞Y上蛋白M的數(shù)量減少，神經(jīng)遞質(zhì)無法作用于蛋白M，有可能導(dǎo)致人患抑郁癥，C正確；D、MAOID能夠抑制單胺氧化酶的活性，抑制其分解神經(jīng)遞質(zhì)，故增加突觸間隙的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)濃度，從而起到抗抑郁的作用，D正確。故選B。【點睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握突觸的結(jié)構(gòu)，分析圖中數(shù)字和字母代表的結(jié)構(gòu)的名稱，明確神經(jīng)遞質(zhì)的作用機(jī)理以及作用后會被降解。4、B【解析】

初生演替：是指一個從來沒有被植物覆蓋的地面，或者是原來存在過植被，但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替。次生演替：原來有的植被雖然已經(jīng)不存在，但是原來有的土壤基本保留，甚至還保留有植物的種子和其他繁殖體的地方發(fā)生的演替。【詳解】A、一定自然區(qū)域內(nèi)相互間有直接或間接聯(lián)系的所有生物稱為群落，過火地區(qū)上的所有植物不能構(gòu)成一個群落，A錯誤；B、演替過程中優(yōu)勢物種被替代主要是植物之間競爭的結(jié)果，B正確；C、森林提供木材體現(xiàn)了生物多樣性的直接價值，C錯誤；D、火災(zāi)后的森林因為保留土壤條件，或者保留了植物種子和其他繁殖體，所以是次生演替，D錯誤。故選B。5、C【解析】

本題考查不同的實驗減少實驗誤差的方法，涉及到的實驗有探究酵母菌種群數(shù)量實驗、調(diào)查人類遺傳病、觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原觀察實驗、用標(biāo)志重捕法調(diào)查某動物的種群密度實驗，結(jié)合不同的實驗過程、注意事項和選項分析答題。【詳解】A、對培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量進(jìn)行計數(shù)時，多次計數(shù)取平均值，而且次數(shù)越多越接近真實值，可以減少實驗誤差，A正確；B、調(diào)查人群中某病的發(fā)生率，應(yīng)該調(diào)查足夠大的群體，隨機(jī)取樣并統(tǒng)計，B正確；C、觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原的實驗中，對洋蔥鱗片葉外表皮臨時裝片進(jìn)行了三次觀察，觀察的是細(xì)胞原樣、質(zhì)壁分離和質(zhì)壁分離復(fù)原，目的不是為了減少實驗誤差，C錯誤；D、用標(biāo)志重捕法調(diào)查某動物的種群密度時，標(biāo)志物不能過于明顯，否則易被天敵捕食，影響實驗結(jié)果，D正確。故選C。6、C【解析】

當(dāng)RNA聚合酶與DNA分子的某一啟動部位結(jié)合后，啟動DNA轉(zhuǎn)錄形成RNA。根據(jù)題圖可知，miRNA基因在核內(nèi)轉(zhuǎn)錄成mRNA后，經(jīng)過初步加工，然后通過核孔到達(dá)細(xì)胞質(zhì)中，在細(xì)胞質(zhì)中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成miRNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體，該復(fù)合體與W基因的mRNA結(jié)合，從而導(dǎo)致W基因mRNA翻譯過程受阻?！驹斀狻緼、miRNA是非編碼RNA，即不會編碼蛋白質(zhì)，A錯誤；B、①過程為轉(zhuǎn)錄，能發(fā)生A-U配對，也能發(fā)生T-A配對，②為翻譯，只能發(fā)生A-U配對，B錯誤；C、mRNA上同時結(jié)合多個核糖體，其模板為同一條mRNA，合成的多條肽鏈相同，C正確；D、miRNA蛋白質(zhì)復(fù)合物作用到了W基因的mRNA上，只能抑制X基因的翻譯，不會抑制W基因的轉(zhuǎn)錄，D錯誤。故選C?！军c睛】本題考查學(xué)生對遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯等相關(guān)知識的識記和理解能力。解決此類問題需要學(xué)生熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識，系統(tǒng)、全面地構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)，據(jù)此從圖示中提取信息準(zhǔn)確判斷各選項。二、綜合題：本大題共4小題7、PCRDNA雙鏈復(fù)制番茄紅素環(huán)化酶翻譯Ecl和BamH1自身成環(huán)2農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（或基因槍、花粉管通道）【解析】

分析圖一：番茄紅素可以轉(zhuǎn)化為胡蘿卜素。分析圖二：圖二位重組DNA（質(zhì)粒三）的構(gòu)建過程，該質(zhì)粒能表達(dá)出雙鏈RNA（發(fā)卡），番茄細(xì)胞可以識別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解，提高了果實中番茄紅素的含量。【詳解】（1）在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。（2）根據(jù)圖二可知，目的基因是番茄紅素環(huán)化酶基因，因此表達(dá)出“發(fā)卡”的DNA片段實際上是兩個反向連接的番茄紅素環(huán)化酶基因；“發(fā)卡”能導(dǎo)致雙鏈RNA、mRNA被降解，而mRNA為翻譯的模板，因此“發(fā)卡”阻止了其在細(xì)胞內(nèi)的翻譯過程，所以提高了果實中番茄紅素的含量。（3）為保證第二個目的基因片段反向連接，應(yīng)該用兩種限制酶切割。由圖可知，第二個目的基因片段兩側(cè)的限制酶識別序列為Ecl和BamHⅠ，因此處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是Ecl和BamHⅠ。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成環(huán)（自身環(huán)化）；構(gòu)建重組質(zhì)粒三時，要用限制酶Ecl和BamHⅠ切割，這樣會去除黏性末端最外側(cè)缺少磷酸基團(tuán)的脫氧核苷酸，因此形成的重組質(zhì)粒缺少2個磷酸二酯鍵。（5）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因此可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞?！军c睛】解答第（5）題，關(guān)鍵能理清將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法，總結(jié)如下：1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。2、將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞，最常用的方法是顯微注射技術(shù)。3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為

感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。8、碳源氮源苯磺隆稀釋涂布平板體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合電泳法相對分子質(zhì)量大小【解析】

1、微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽四類營養(yǎng)；選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長，又要抑制或阻止其他種類微生物生長，因而篩選獲得高效的苯磺隆降解菌，必須以苯磺隆為唯一碳源，只讓目的菌株生存繁殖。2、微生物計數(shù)的方法有稀釋涂布平板法和血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)，前者統(tǒng)計活菌數(shù)，后者不能區(qū)分死菌和活菌?！驹斀狻浚?）培養(yǎng)基的主要成分為水、碳源、氮源和無機(jī)鹽；為了獲得能降解有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆的微生物菌種，可用含有有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。（2）微生物的計數(shù)除了在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)，也可用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目。（3）一般來說，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化，而細(xì)胞多采用包埋法固定化，這是因為細(xì)胞體積大，而酶分子很小，體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶更容易從包埋材料中漏出。（4）實驗室分離蛋白質(zhì)的常用方法有電泳法和凝膠色譜法。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量大小?！军c睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和分離等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；掌握分離微生物計數(shù)的方法；掌握酶的應(yīng)用等相關(guān)知識，能結(jié)合題中信息知識答題。9、灰體、直剛毛雌、雄基因的自由組合灰體直剛毛雄蠅×灰體直剛毛雌蠅子代雌雄果蠅均為灰體：黑檀體=3：1；雌蠅全為直剛毛，雄蠅中直剛毛：焦剛毛=1：1基因n所在的染色體整條缺失或基因n所在的染色體片段缺失減數(shù)第一次分裂前期（四分體時期）N和n所在的染色體片段發(fā)生了交叉互換【解析】

由“現(xiàn)有灰體直剛毛雌果蠅與黑擅體焦剛毛雄果蠅雜交，F(xiàn)1全為灰體直剛毛”可知：灰體對黑檀體為顯性，直剛毛對焦剛毛為顯性。由“F1某個體與某黑檀體焦剛毛個體雜交，F(xiàn)2雌雄果蠅均表現(xiàn)為灰體直剛毛：灰體焦剛毛：黑檀體直剛毛：黑檀體焦剛毛=1：1：1：1”可知：控制灰體和黑檀體的等位基因N/n、直剛毛和焦剛毛的等位基因M/m分別位于兩對同源染色體上。【詳解】（1）從分析可知灰體、直剛毛為顯性性狀；如果基因M、m只位于X染色體上，要想得到F2雌雄果蠅均表現(xiàn)為灰體直剛毛：灰體焦剛毛：黑檀體直剛毛：黑檀體焦剛毛=1：1：1：1，則F1灰體直剛毛的基因型為NnXMXm，黑檀體焦剛毛個體的基因型為nnXmY，即F1某個體與某黑檀體焦剛毛個體分別為雌性、雄性。（2）由分析可知，N/n與M/m分別位于兩對同源染色體上，在遺傳上遵循基因的自由組合定律。（3）取F2中灰體直剛毛雄蠅和灰體直剛毛雌蠅進(jìn)行雜交，觀察子代的表現(xiàn)型及比例。如果子代雌雄果蠅均為灰體：黑檀體=3：1；雌蠅全為直剛毛，雄蠅中直剛毛：焦剛毛=1：1，則可以證明基因N、n位于常染色體上，基因M、m位于X染色體上。（4）基因型為Nn的果蠅在形成配子時，若減數(shù)第一次分裂中期出現(xiàn)基因組成為NN的細(xì)胞，可能的原因有基因n所在的染色體整條缺失或基因n所在的染色體片段缺失；圖示細(xì)胞最可能的原因是減數(shù)第一次分裂前期（四分體時期）N和n所在的染色體片段發(fā)生了交叉互換。【點睛】本題考查基因自由組合定律的實質(zhì)及應(yīng)用，要求考生掌握基因自由組合定律的實質(zhì)；能設(shè)計簡單的遺傳實驗進(jìn)行驗證，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。10、防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和反向連接CDNA（雙鏈）復(fù)制引物農(nóng)桿菌T-DNA無色物質(zhì)K顯微注射技術(shù)蛋白質(zhì)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟是：目的基因的獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣；目的基因的檢測與鑒定?！驹斀狻浚?）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，常用兩種不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，獲得不同的黏性末端，以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和反向連接（或使目的基因定向連接到載體上）；A、由圖中DNA序列和酶切位點序列可知應(yīng)使用酶B和酶C切割獲取HSA基因，A正確；

B、導(dǎo)入的目的基因時應(yīng)在T-DNA上，因此Ti質(zhì)粒應(yīng)用酶A和酶B切割，因為酶A和酶B切出的黏性末不能互補配對，可以將目的基因連接進(jìn)去，B正確；

C、據(jù)圖一圖二分析可知，成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒上不再有酶A的識別位點，C錯誤；

D、成功構(gòu)建的重組質(zhì)粒用酶C處理能得到2個DNA片段，應(yīng)是A-C，和C-A片段，D正確。

故選C。

（2）PCR技術(shù)應(yīng)用的原理是DNA（雙鏈）復(fù)制，在利用該技術(shù)獲取目的基因的過程中，以從生物材料中提取的DNA作為模板，利用引物尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。

（3）圖一過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，利用農(nóng)桿菌的侵染特性，讓T-DNA整合到植物細(xì)胞染色體DNA