2《食用油中苯并[α]芘的測定酶聯(lián)免疫吸附定量法》編制說明主編單位和參編單位、人員及分工等?，F(xiàn)行有效的辣椒素檢測標準有GB/T21266-2007《辣椒及辣椒制品測定及辣度表示方法》、NY/T1381-2007《辣椒素的測定高效液相色譜法》、NY/T3109-2017《植物油脂中辣椒素的測定-免疫分析法》和BJS201801《3李培武，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所，研究華權(quán)高，武漢華美維士康生物工程有限公司，董4二、標準編制原則和確定標準的主要內(nèi)容(如技術(shù)指標、參數(shù)公式、性能、要求、實驗方法、檢驗規(guī)則等)的論據(jù):2前處理條件的優(yōu)化品樣取量平均值%123455品gg平均值%12345基叔丁醚）提高食用油樣品的溶解性。結(jié)果表明，石油醚（0.64～0.66g/mL）、正己烷層污染，操作步驟繁瑣。當二氯甲烷（密度為1.320-1.330g/mL）為助溶劑，靜置相在上層，便于辣椒素溶液的移取。在加入2mL2%氫氧化鈉條件下，2g食用油樣品溶劑是2mL二氯甲烷。由于實際操作過程中，二氯甲烷體積不易量取準確，因此采用2.2提取液濃度和用量優(yōu)化進行優(yōu)化。結(jié)果表明，當氫氧化鈉溶液體積為2mL，隨著NaOH濃度的增加至4%，檢測梯度范圍與2%氫氧化鈉結(jié)果相當，檢6別為11.25μg/kg和11.32μg/kg選用梯度陽性樣本優(yōu)化pH值條件，比較不同pH值條件下試紙條檢測信號差異，pH值調(diào)節(jié)采用稀硫酸進行調(diào)制，過程中始終采用精密果表明，堿性水解食用油樣品直接用石油醚萃?。╬H值為13～14梯度樣品檢測結(jié)試紙檢測無任何梯度；當稀硫酸酸調(diào)至pH值為7～8、5～6、2～3時，陰性樣本、完全解離，檢測結(jié)果偏低，當pH值分別是5～6和2～3，檢測結(jié)果基本一致，考慮到pH值7（60-90℃)表3的結(jié)果表明，植物油梯度樣品均存在差異且不同萃取溶劑間梯度無明顯差異。與其他的有機試劑相比，石油醚（60-90℃)操作簡便、成本低，方法重現(xiàn)性好、3孵育溫度優(yōu)化反應(yīng)溫度和時間是影響辣椒素與銪標記的特異性單克隆抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng)的重要因素?？乖贵w反應(yīng)一般在15℃~40℃范圍內(nèi)進行，在此范圍內(nèi)，溫度越高，分檢測。用制備好的辣椒素加標的食用油系列梯度陽性樣本（0.5μg/kg，1.5μg/kg，2.58 根X1 根（附錄A檢驗方法中技術(shù)參數(shù)和數(shù)據(jù)處理檢出限計 Xi－測定n次空白溶液的平均值（n≥20b－單位標準溶液峰面積響應(yīng)值；標準起草小組分別對花生油、大豆油、菜籽油空白樣品進行了21次重復(fù)實驗，用時間分辨熒光檢測儀檢測讀取辣椒素免疫層析裝置中C線和T線的時間分辨熒光信號強值，T/C；X—標準系列濃度值自然對數(shù)，Lnc21次測定結(jié)果的標準偏差的3倍花生油、大豆油、菜籽油樣品21次重復(fù)測定結(jié)果中辣椒素時間分辨熒光免疫層析6方法的重復(fù)性和再現(xiàn)性9表4花生油、大豆油和菜籽油樣品重復(fù)測定結(jié)果樣品名稱含量，μg/kg123456789平均值相對相差%花生油-陽性3.183.183.163.023.193.263.223.263.333.583.2大豆油-陽性6.266.976.336.256.846.876.495.956.256.536.4菜籽油-陽性花生油-陰性NDNDNDNDNDNDNDNDNDNDND//大豆油-陰性NDNDNDNDNDNDNDND0.42NDND//菜籽油-陰性NDNDNDNDNDND0.41NDNDNDND//表5花生油、大豆油和菜籽油樣品實驗室內(nèi)測定結(jié)果日日日平均值日日日平均值表6食用油中辣椒素實驗室間比對單位樣品重復(fù)1μg/kg重復(fù)2μg/kg重復(fù)3μg/kg重復(fù)4μg/kg重復(fù)5μg/kg平均值μg/kg變異系數(shù)%實驗室1NDNDNDNDND--2號油樣3.83.43.83.53.58.43號油樣6.65.95.86.55.57.84號油樣9.69.39.98.89.69.44.4實驗室2NDNDNDNDND--2號油樣3.33.33.93.53.48.93號油樣5.56.65.76.26.07.24號油樣8.78.59.69.49.35.2實驗室3NDNDNDNDND--2號油樣3.23.52.93.53.28.03號油樣6.86.66.96.26.55.54號油樣9.99.59.69.29.53.4實驗室4NDNDNDNDND--2號油樣3.53.33.93.73.59.03號油樣6.96.26.25.86.26.84號油樣9.68.99.59.99.89.53.9表7食用油中辣椒素實驗室間比對檢測結(jié)果統(tǒng)計分析表項目樣2號油樣3號油樣4號油樣平均值μg/kgND3.46.29.4變異系數(shù)% 8.57.14.3最大值μg/kgND3.96.99.9最小值μg/kgND2.95.58.5極差μg/kg—三、主要試驗、驗證結(jié)果，預(yù)期的經(jīng)濟效果標樣，進行準確度測定，經(jīng)前處理后時間分辨3方法驗證結(jié)論通過該標準及技術(shù)的實施