大鼠常規(guī)操作技術孫泉（辦公室）1大鼠常規(guī)操作技術孫泉11.了解動物實驗的目的和意義2.了解實驗動物選擇和染毒途徑。3.掌握大鼠實驗的基本操作技術。一、實驗目的：2一、實驗目的：2精品資料精品資料3你怎么稱呼老師？如果老師最后沒有總結一節(jié)課的重點的難點，你是否會認為老師的教學方法需要改進？你所經歷的課堂，是講座式還是討論式？教師的教鞭“不怕太陽曬，也不怕那風雨狂，只怕先生罵我笨，沒有學問無顏見爹娘……”“太陽當空照，花兒對我笑，小鳥說早早早……”大鼠一般操作技術-ppt課件4551.實驗動物的選擇2.實驗動物的抓取和固定3.性別鑒定4.實驗動物編號標記5.實驗動物給藥途徑和方法（灌胃、腹腔、皮下注射、尾靜脈注射）6.生物標本的采集（鼠尾取血、心臟采血、眼眶取血）7.實驗動物的處死二.實驗內容：61.實驗動物的選擇二.實驗內容：6實驗流程7實驗流程7動物物種選擇基本原則：

動物的選擇8動物的選擇8健康動物首先看外觀：體形豐滿，被毛濃密有光澤、緊貼體表，眼睛明亮，反應行動靈活。有無明顯疾病癥狀體重、年齡外觀觀察9健康動物首先看外觀：外觀觀察9動物的抓取和固定單手固定雙手固定固定器固定板注意抓取動物的手法抓取固定時力量大小適宜10動物的抓取和固定單手固定10未成熟鼠生殖器發(fā)育不明顯，肛門與生殖器之間的距離來區(qū)分。遠——♂、近——♀。成年鼠：雄性臥位可見睪丸，雌性可見腹部有12個乳頭。性別鑒定11未成熟鼠生殖器發(fā)育不明顯，肛門與生殖器之間的距離來區(qū)分。遠—常用標記，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）先左后右，先上后下動物的編號標記12常用標記，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）動物的編號標記12穿耳孔法左耳代表十位，右耳代表個位應注意防止孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部13穿耳孔法13原則：同一實驗中，實驗動物的年齡盡可能一致，實驗動物體重大致相近；同組、同性別動物體重差異應小于平均體重的10%；不同組間同性別動物體重均值差異小于5%；♀♂動物各半，且♀♂實驗結果分開統(tǒng)計、分析。稱重編號隨機分組

實驗動物的分組14原則：實驗動物的分組14經口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等）經呼吸道染毒（靜式、動式和氣管內注入）經皮膚染毒注射染毒（皮下、皮內、肌內、腹腔和鼠尾靜脈注射等）其它（直腸內、鼻腔等）實驗動物染毒途徑和方法15經口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等）實驗動物染毒途徑和方法15灌胃抓取老鼠時應是鼠

成豎直線灌胃成功時，所遇阻力較小灌胃時注意胃容量0.1ml/10g-0.3ml/10g

，＜1mL16灌胃抓取老鼠時應是鼠16腹下1/3外側，避免損傷實質器官30-45°角刺入扎入時有“落空感”，回抽無尿液或血液腹腔注射17腹下1/3外側，避免損傷實質器官腹腔注射17酒精擦拭尾部左手食指，拇指配合按住尾端右手持注射器，針尖輕輕抬起與血管平行刺入血管由紅變白，按壓止血尾靜脈注射18酒精擦拭尾部尾靜脈注射18俯臥固定，左手拇指和食指捏住頸背部皮膚提起，右手持針沿縱軸方向刺入皮下，進針時感覺有阻力，繼續(xù)刺入，突然阻力消失，活動針頭，確認刺入皮下即可注射藥液。

皮下注射19俯臥固定，左手拇指和食指捏住頸背部皮膚提起，右手持針沿縱軸方俯臥保定，與皮膚平行刺入捏住的皮膚，注射部位局部形成皮丘。為避免藥液流出，停留片刻，再將針頭撥出

皮內注射

20俯臥保定，與皮膚平行刺入捏住的皮膚，注射部位局部形成皮丘。為血液采集（斷尾采血、眼眶采血、心臟采血等）尿液采集糞便采集生物標本的采集21血液采集（斷尾采血、眼眶采血、心臟采血等）生物標本的采集2固定→用手輕揉鼠尾→靜脈充血后剪尾尖（1-2mm）→用手從尾根向尾尖推擠→采血→干棉止血。每次0.1mL尾尖靜脈采血法22固定→用手輕揉鼠尾→靜脈充血后剪尾尖（1-2mm）→用手從尾左手固定動物→滴少量10%可卡因于動物眼內→右手持消毒過毛細吸管→以抗凝劑濕潤內壁→眼瞼和眼球間旋轉刺入→采血后消毒紗布止血30秒。每次0.2-0.3mL眼眶后靜脈叢采血23左手固定動物→滴少量10%可卡因于動物眼內→右手持消毒過毛細動物仰臥→固定器固定→剪左側心區(qū)毛→皮膚消毒→小號針頭注射器在3-4肋間刺入?？蛇_0.5mL心臟采血法24動物仰臥→固定器固定→剪左側心區(qū)毛→心臟采血法24脊椎脫臼法：用左手按住動物的頭部于實驗臺上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、略向上使勁拉，使動物的頸椎以致脊椎脫臼死亡。過量麻醉法動物的處死25脊椎脫臼法：用左手按住動物的頭部于實驗臺上，右手抓住尾根部，將動物固定于解剖臺上，從恥骨聯(lián)合至下頜沿正中線切開皮膚，再從恥骨聯(lián)合至肋骨下緣沿腹正中線切開腹壁肌肉（不要用力過猛，以免切破腹腔臟器，特別是膀胱）。從肋骨下端向脊柱方向，將兩側腹壁剪開，以便觀察腹腔內臟器。應注意不