調(diào)控帕金森疾病相關(guān)基因的miRNA研究的開題報(bào)告一、研究背景和意義帕金森疾病(Parkinson’sdisease,PD)是一種神經(jīng)系統(tǒng)疾病，主要表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)障礙、震顫、僵硬等。目前全球大約有1000萬人患有該疾病，其中中國有近400萬人患有帕金森疾病，疾病的社會(huì)成本和治療成本非常高。PD是一種復(fù)雜的疾病，其發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明。研究表明，miRNA與PD發(fā)病的關(guān)系密切，miRNA在PD的病理生理過程中發(fā)揮重要作用，因此研究miRNA在PD的發(fā)病機(jī)制中的作用，對于深入了解PD的病理生理機(jī)制及尋找有效的治療方法具有重要的科學(xué)意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。二、研究目的本研究旨在通過對miRNA與PD相關(guān)基因的調(diào)控機(jī)制的探究，尋找miRNA調(diào)控PD相關(guān)基因的潛在機(jī)制，為深入了解PD的病理生理機(jī)制及研發(fā)新型PD藥物提供理論支持。三、研究內(nèi)容1.通過文獻(xiàn)綜述分析miRNA與PD相關(guān)基因的調(diào)控機(jī)制，分析目前研究的不足和亟待解決的問題。2.建立PD細(xì)胞模型，通過qRT-PCR等實(shí)驗(yàn)技術(shù)測定miRNA和PD相關(guān)基因的表達(dá)水平。3.篩選miRNA與PD相關(guān)基因的靶標(biāo)，并驗(yàn)證靶標(biāo)的可靠性。4.通過細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)探究miRNA與PD相關(guān)基因的調(diào)控作用及機(jī)制。5.對miRNA與PD相關(guān)基因的調(diào)控機(jī)制進(jìn)行HypothesisTesting并進(jìn)一步驗(yàn)證。四、研究方法1.文獻(xiàn)綜述法：通過檢索相關(guān)文獻(xiàn)，分析已有研究成果、方法和研究現(xiàn)狀，為本研究提供理論基礎(chǔ)。2.細(xì)胞模型體系建立：本研究將使用人胚腎293T細(xì)胞作為模型，通過CRISPR-Cas9基因編輯或轉(zhuǎn)染技術(shù)建立帕金森疾病相關(guān)基因的細(xì)胞模型。3.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：利用qRT-PCR和Westernblot等技術(shù)檢測miRNA和PD相關(guān)基因的表達(dá)水平。4.生物信息學(xué)分析法：利用生物信息學(xué)的方法揭示miRNA與PD相關(guān)基因之間的調(diào)控機(jī)制，并進(jìn)行合理假設(shè)的建立。5.細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)：通過上調(diào)或下調(diào)miRNA的水平，以及靶標(biāo)基因的重組表達(dá)或沉默控制組的建立，驗(yàn)證miRNA與PD相關(guān)基因的調(diào)控作用及機(jī)制。五、預(yù)期結(jié)果1.揭示miRNA與PD相關(guān)基因之間的調(diào)控機(jī)制；2.證實(shí)miRNA在PD的發(fā)病機(jī)制中的作用；3.為尋找PD的新型治療方法提供理論支持。六、研究難點(diǎn)和問題1.miRNA與PD相關(guān)基因之間的調(diào)控機(jī)制非常復(fù)雜，需要認(rèn)真分析和探究；2.需要建立合適的模型來驗(yàn)證miRNA與PD相關(guān)基因的調(diào)控作用；3.需要進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)分析和假設(shè)檢驗(yàn)，保證研究結(jié)果的可靠性。七、研究時(shí)間安排本研究計(jì)劃用時(shí)2年，時(shí)間安排如下：|時(shí)間節(jié)點(diǎn)|任務(wù)內(nèi)容||--------------|---------------------||第一年第一季度|文獻(xiàn)綜述||第一年第二季度|細(xì)胞模型體系的建立||第一年第三季度|基因表達(dá)水平的測定||第二年第一季度|miRNA與PD