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主講老師：邢煜騫導入宿主細胞如何將克隆載體導入到宿主細胞呢宿主細胞能夠供載體進入并支持其復制和蛋白質(zhì)表達的細胞宿主細胞可分為以下兩類：原核生物——大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、鏈霉菌等真核生物——酵母菌、絲狀真菌、哺乳動物細胞等理想宿主細胞應滿足的條件容易獲得較高濃度的細胞能利用廉價易得的原料不致病、不產(chǎn)生肉毒素發(fā)熱量低、需氧低，適當?shù)陌l(fā)酵溫度容易進行代謝調(diào)控容易進行DNA重組技術(shù)操作產(chǎn)物的產(chǎn)量、產(chǎn)率高，產(chǎn)物容易提取。原核生物特點大部分原核生物細胞沒有纖維素組成的堅硬細胞壁，便于外源DNA的進入沒有核膜，染色體DNA沒有固定結(jié)合的蛋白質(zhì)，這為外源DNA與裸露的染色體DNA重組減少了麻煩基因組小，遺傳背景簡單，并且不含線粒體和質(zhì)體基因組，便于對引入的外源基因進行遺傳分析原核生物多數(shù)為單細胞生物，容易獲得一致性的實驗材料，并且培養(yǎng)簡單,繁殖迅速，實驗周期短，重復實驗快真核生物種類酵母：基因結(jié)構(gòu)相對比較簡單，便于基因工程操作；培養(yǎng)簡單，適于大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)，成本低廉；基因表達產(chǎn)物能分泌到培養(yǎng)基中,便于產(chǎn)物的提取加工;不含特異性的病毒，不產(chǎn)生毒素，是安全的受體細胞。植物細胞：具全能性。有水稻、棉花、玉米、馬鈴薯、煙草和擬南芥等。動物細胞：多采用生殖細胞、受精卵細胞或胚細胞以及干細胞。有豬、羊、牛、魚、鼠、猴等。導入宿主細胞的方法轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)導外源DNA轉(zhuǎn)化方法化合物誘導轉(zhuǎn)化法熱休克法電穿孔轉(zhuǎn)化法微彈轟擊(基因槍)轉(zhuǎn)化法激光微束穿孔轉(zhuǎn)化法超聲波處理轉(zhuǎn)化法

脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)化法

體內(nèi)注射轉(zhuǎn)化法花粉管通道轉(zhuǎn)化法

精子介導法低能離子束介導轉(zhuǎn)化法根癌農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化法小結(jié)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)染主要是基于

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