ICS65.020.20

B31

DB32

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T3991—2021

‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程

Technicalregulationformicropropagationofeverbearingstrawberry‘ZijinSiji’

2021-02-03發(fā)布2021-03-03實(shí)施

江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB32/T3991-2021

‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程的培養(yǎng)基配制、植株選擇與外植體處理、培養(yǎng)技

術(shù)、種苗培育技術(shù)要求。

本文件適用于‘紫金四季’草莓組培苗的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程

NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

NY/T3032草莓脫毒種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

4培養(yǎng)基配制

4.1基本培養(yǎng)基與植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液

B5、MS基本培養(yǎng)基購(gòu)自商業(yè)化產(chǎn)品，培養(yǎng)基中大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)成分組成參見(jiàn)NY/T

2306。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液配制的濃度、方法、保存參見(jiàn)NY/T2306。

4.2培養(yǎng)基配方

培養(yǎng)基配方如下：

誘導(dǎo)培養(yǎng)基：B5固體培養(yǎng)基+6-BA3.4mg/L+IBA0.3mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；

伸長(zhǎng)培養(yǎng)基：MS固體培養(yǎng)基+6-BA1.7mg/L+IBA0.15mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；

增殖培養(yǎng)基：MS固體培養(yǎng)基+6-BA0.75mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；

生根培養(yǎng)基：1/2MS固體培養(yǎng)基+IBA0.003mg/L+葡萄糖1.0%+瓊脂6g/L~7g/L。

4.3培養(yǎng)基配制與消毒滅菌

培養(yǎng)基準(zhǔn)備、糖溶解、瓊脂溶化、定容、pH測(cè)定、分裝、封口、滅菌、冷卻、貯存等均參見(jiàn)NY/T

2306。

1

DB32/T3991-2021

5植株選擇與外植體處理

5.1植株選擇

在6月~10月，選擇種植在栽培介質(zhì)（土、基質(zhì)等）未發(fā)生病蟲(chóng)害、植株長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期在100d

以上、根頸部粗>1cm、葉片顏色深綠色的草莓植株作為取材對(duì)象。

5.2外植體處理

5.2.1洗滌劑處理

匍匐莖或根頸在堿性洗滌劑中浸泡20min~40min，流水沖洗30min~60min，蒸餾水清洗2次~3次，

轉(zhuǎn)至超凈工作臺(tái)。

5.2.2消毒

在超凈工作臺(tái)上，匍匐莖或根頸用75%乙醇浸泡15s，無(wú)菌水沖洗4次~6次。

剝開(kāi)匍匐莖頂端葉片或根頸處，選取匍匐莖莖尖或>1mm隱芽，0.8%次氯酸鈉溶液消毒（匍匐莖

莖尖處理15min,隱芽處理10min）；無(wú)菌水沖洗4次~6次，無(wú)菌濾紙吸干；置入無(wú)菌培養(yǎng)皿中用無(wú)

菌刀片切割，匍匐莖莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)取0.2mm~0.8mm，隱芽取0.5mm~3mm；若超出尺寸范圍，45°斜切。

6培養(yǎng)技術(shù)

6.1接種

接種前期準(zhǔn)備（包括接種環(huán)境，接種盤(pán)、接種器械滅菌等）參見(jiàn)NY/T2306。在無(wú)菌的培養(yǎng)瓶中，

將消毒處理后的外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，每瓶1個(gè)，并標(biāo)注外植體、接種日期、名稱。

6.2培養(yǎng)

6.2.1培養(yǎng)條件

培養(yǎng)室內(nèi)溫度為(24±2)℃。暗培養(yǎng)，無(wú)光照；光培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶上部的光照強(qiáng)度為100μmol/(m2·s)~200

μmol/(m2·s)，每日光照12h~16h。

6.2.2誘導(dǎo)培養(yǎng)

外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中暗培養(yǎng)14d后轉(zhuǎn)入光培養(yǎng)7d~14d，莖尖或隱芽萌發(fā)成芽，若芽<0.3cm，在

誘導(dǎo)培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。

6.2.3伸長(zhǎng)培養(yǎng)

當(dāng)芽長(zhǎng)至0.3cm~0.5cm，轉(zhuǎn)置于伸長(zhǎng)培養(yǎng)基光培養(yǎng)，得到單芽或叢生芽，將芽叢切割成單芽，若單

芽<1cm，在伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。

6.2.4增殖培養(yǎng)

待單芽長(zhǎng)至1cm~3cm，轉(zhuǎn)置于增殖培養(yǎng)基光培養(yǎng)，得到芽叢，將芽叢切割單芽，若單芽<3cm，繼

續(xù)在增殖培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。

6.2.5生根培養(yǎng)

2

DB32/T3991-2021

待單芽長(zhǎng)至3cm~5cm，取生長(zhǎng)健壯、至少有3小葉的單芽移入生根培養(yǎng)基，暗培養(yǎng)7d后轉(zhuǎn)入光培

養(yǎng)7d~21d，至根長(zhǎng)1.5cm~3cm、2條幼根以上開(kāi)始煉苗。

6.2.6煉苗、移栽

按照NY/T3032執(zhí)行。

7種苗培育

移至戶外后，注意通風(fēng)，前期每天向葉面噴水3次，保證土壤持水量在50%~70%，14d后，保證土

壤持水量在35%~55%，按照GB/T6001繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)培育直至成苗。

3

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)

定起草。

本文件由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。

本文件起草單位：江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。

本文件主要起草人：王靜、趙密珍、龐夫花、蔡偉建、陳曉東、袁華招、于紅梅、吳娥嬌、夏瑾。

I

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‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程的培養(yǎng)基配制、植株選擇與外植體處理、培養(yǎng)技

術(shù)、種苗培育技術(shù)要求。

本文件適用于‘紫金四季’草莓組培苗的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程

NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

NY/T3032草莓脫毒種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

4培養(yǎng)基配制

4.1基本培養(yǎng)基與植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液

B5、MS基本培養(yǎng)基購(gòu)自商業(yè)化產(chǎn)品，培養(yǎng)基中大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)成分組成參見(jiàn)NY/T

2306。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液配制的濃度、方法、保存參見(jiàn)NY/T2306。

4.2培養(yǎng)基配方

培養(yǎng)基配方如下：

誘導(dǎo)培養(yǎng)基：B5固體培養(yǎng)基+6-BA3.4mg/L+IBA0.3mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；

伸長(zhǎng)培養(yǎng)基：MS固體培養(yǎng)基+6-BA1.7mg/L+IBA0.15mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；

增殖培養(yǎng)基：MS固體培養(yǎng)基+6-BA0.75mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；

生根培養(yǎng)基：1/2MS固體培養(yǎng)基+IBA0.003mg/L+葡萄糖1.0%+瓊脂6g/L~7g/L。

4.3培養(yǎng)基配制與消毒滅菌

培養(yǎng)基準(zhǔn)備、糖溶解、瓊脂溶化、定容、pH測(cè)定、分裝、封口、滅菌、冷卻、貯存等均參見(jiàn)NY/T

2306。

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DB32/T3991-2021

5植株選擇與外植體處理

5.1植株選擇

在6月~10月，選擇種植在栽培介質(zhì)（土、基質(zhì)等）未發(fā)生病蟲(chóng)害、植株長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期在100d

以上、根頸部粗>1cm、葉片顏色深綠色的草莓植株作為取材對(duì)象。

5.2外植體處理

5.2.1洗滌劑處理

匍匐莖或根頸在堿性洗滌劑中浸泡20min~40min，流水沖洗30min~60min，蒸餾水清洗2次~3次，

轉(zhuǎn)至超凈工作臺(tái)。

5.2.2消毒

在超凈工作臺(tái)上，匍匐莖或根頸用75%乙醇浸泡15s，無(wú)菌水沖洗4次~6次。

剝開(kāi)匍匐莖頂端葉片或根頸處，選取匍匐莖莖尖或>1mm隱芽，0.8%次氯酸鈉溶液消毒（匍匐莖

莖尖處理15min,隱芽處理10min）；無(wú)菌水沖洗4次~6次，無(wú)菌濾紙吸干；置入無(wú)菌培養(yǎng)皿中用無(wú)

菌刀片切割，匍匐莖莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)取0.2mm~0.8mm，隱芽取0.5mm~3mm；若超出尺寸范圍，45°斜切。

6培養(yǎng)技術(shù)

6.1接種

接種前期準(zhǔn)備（包括接種環(huán)境，接種盤(pán)、接種器械滅菌等）參見(jiàn)NY/T2306。在無(wú)菌的培養(yǎng)瓶中，

將消毒處理后的外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，每瓶1個(gè)，并標(biāo)注外植體、接種日期、名稱。

6.2培養(yǎng)

6.2.1培養(yǎng)條件

培養(yǎng)室內(nèi)溫度為(24±2)℃。暗培養(yǎng)，無(wú)光照；光培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶上部的光照強(qiáng)度為100μmol/(m2·s)~200

μmol/(m2·s)，每日光照12h~16h。

6.2.2誘導(dǎo)培養(yǎng)

外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中暗培養(yǎng)14d后轉(zhuǎn)入光培養(yǎng)7d~14d，莖尖或隱芽萌發(fā)成芽，若芽<0.3cm，在

誘導(dǎo)培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。

6.2.3伸長(zhǎng)培養(yǎng)

當(dāng)芽長(zhǎng)至0.3cm~0.5cm，轉(zhuǎn)置于伸長(zhǎng)培養(yǎng)基光培養(yǎng)，得到單芽或叢生芽，將芽叢切割成單芽，若單

芽<1cm，在伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。

6.2.4增殖培養(yǎng)

待