畢業(yè)論文實(shí)驗(yàn)步驟(批改稿)柳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)題目：不同溫度和PH培養(yǎng)條件下對(duì)枯草桿菌的提純優(yōu)化姓名：雷小兵學(xué)號(hào)：20093005032專業(yè)：食品檢測(cè)及管理年級(jí)：2009級(jí)時(shí)間：2011年11月指導(dǎo)老師：覃俊達(dá)實(shí)驗(yàn)合作者：楊梅娟時(shí)間：2011年11月柳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）任務(wù)書基礎(chǔ)部系（部）食品檢測(cè)及管理專業(yè)2班學(xué)生雷小兵學(xué)號(hào)20093005032一、畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）題目：不同溫度和PH培養(yǎng)條件下對(duì)枯草桿菌的提純優(yōu)化二、畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）工作規(guī)定進(jìn)行的日期：200年月日起至200年月日三、畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）進(jìn)行地點(diǎn)：學(xué)校圖書館上網(wǎng)查資料四、任務(wù)書的內(nèi)容：目的：通過此次實(shí)驗(yàn)對(duì)枯草桿菌有了一個(gè)深入的理解，懂得如何根據(jù)實(shí)際情況培養(yǎng)得出純種枯草桿菌，會(huì)科學(xué)地挑選生長(zhǎng)環(huán)境因素，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，得出結(jié)論，找出最佳生長(zhǎng)環(huán)境，寫出對(duì)結(jié)果的分析。任務(wù)：（1）上圖書館查閱微生物方面的科學(xué)雜志30-40篇，記錄各篇論文的作者、題目、雜志名稱、出版地點(diǎn)、時(shí)間及頁碼（如有摘錄千萬不能弄錯(cuò)是從哪篇文章摘錄的）（2）確定一篇論文作為自己的研究起點(diǎn)，查閱該篇論文的參考文獻(xiàn)，理出該研究的前因后果（3）依據(jù)上述工作確定自己的課題，選擇合適的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案（4）填入模擬數(shù)據(jù)，進(jìn)行模擬分析不同溫度和PH培養(yǎng)條件下對(duì)枯草桿菌的提純優(yōu)化摘要】：本文根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作,針對(duì)枯草桿菌生長(zhǎng)環(huán)境的選著，通過對(duì)培養(yǎng)基的PH值、生長(zhǎng)溫度的選擇進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,得出最佳的生長(zhǎng)環(huán)境。緒論：枯草桿菌是非致病菌細(xì)菌，對(duì)人畜無害，不污染環(huán)境，是好氧的陽性菌，①而且很多學(xué)者的研究證明動(dòng)物飼喂芽孢桿菌后，能顯著降低腸道大腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、沙門氏菌的數(shù)量，使機(jī)體內(nèi)的有益菌增加而潛在的致病菌減少，因而排泄物、分泌物中的有益菌數(shù)量增多，致病性微生物減少，從而凈化了體內(nèi)外環(huán)境，減少疾病的發(fā)生。氨、胺、吲哚、硫化氫等物質(zhì)在腸道粘膜對(duì)細(xì)胞有明顯的毒害作用，芽孢桿菌抑制了有害微生物，進(jìn)而減少有害物質(zhì)產(chǎn)生，有利于動(dòng)物健康和生長(zhǎng)。②根據(jù)（士論文-枯草芽孢桿菌XM16菌株抗真菌蛋白的分離純化及性質(zhì)結(jié)構(gòu)研究）中所說‘經(jīng)過100℃熱處理30min，活性未喪失’可知枯草桿菌是十分耐高溫的，以此對(duì)樣品經(jīng)行預(yù)處理。所以本實(shí)驗(yàn)以土壤中的枯草桿菌為對(duì)象,觀察不同溫度和PH值對(duì)枯草桿菌的生長(zhǎng)的影響。從而得到適合枯草桿菌生長(zhǎng)的最佳條件。實(shí)驗(yàn)階段：一、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)：1、①儀器：恒溫培養(yǎng)箱2個(gè)、培養(yǎng)皿27個(gè)、20ml的吸量管1支、2ml的吸量管4支、干燥箱、高壓滅菌鍋、水浴鍋、250ml的燒杯3個(gè)、（制作培養(yǎng)基）250ml的錐形瓶3個(gè)、200ml的錐形瓶1個(gè)、（廢液）洗耳球1個(gè)、試管架1個(gè)、酒精燈1個(gè)、打火機(jī)1個(gè)、75%的酒精、200ml的試劑瓶電爐1個(gè)、3支1ml的吸量管②藥品：蛋白胨、牛肉膏、Nacl、瓊脂、硫酸、氫氧化鈉2、玻璃儀器的滅菌：將所需的玻璃儀器洗凈，用報(bào)紙包好，放到干燥箱125℃滅菌4h。3、取樣：取土壤表層5-10cm下的肥土100g左右，把采得的土壤放入紙袋帶回實(shí)驗(yàn)室分離。4、樣品處理：稱取肥土5g放入含有45ml水的錐形瓶中，搖動(dòng)片刻，然后將此瓶在無菌實(shí)驗(yàn)室中用小火加熱至懸濁液沸騰，維持15min。而后靜置5min。5、培養(yǎng)基的配制：①取蛋白胨2g、牛肉膏0.6g、Nacl1g、瓊脂3~4g于250ml的燒杯中，加入200ml的且PH4的蒸餾水，溶解，倒入錐形瓶中。②取蛋白胨2g、牛肉膏0.6g、Nacl1g、瓊脂3~4g于250ml的燒杯中，加入200ml的且PH6的蒸餾水。溶解，倒入錐形瓶中。③取蛋白胨2g、牛肉膏0.6g、Nacl1g、瓊脂3~4g于250ml的燒杯中，加入200ml的且PH8的蒸餾水。溶解，倒入錐形瓶中。6、生理鹽水的配制：稱取0.85g的食鹽200ml的燒杯中溶解，移入100ml的試劑瓶中。7、濕熱滅菌：用棉花塞好裝有培養(yǎng)基的3個(gè)錐形瓶和裝有生理鹽水的試劑瓶的瓶口，用報(bào)紙包好瓶口。放入高溫滅菌鍋121℃滅菌20min。8、無菌室的滅菌：將實(shí)驗(yàn)服掛于無菌室，打開無菌操作臺(tái)的紫外光燈，再打開無菌室的紫外光燈，滅菌1h，在做實(shí)驗(yàn)前半小時(shí)關(guān)閉。二、實(shí)驗(yàn)操作：1、進(jìn)入無菌室，用75%的酒精擦拭雙手，穿上滅過菌的實(shí)驗(yàn)服，將所需玻璃儀器和培養(yǎng)基放入無菌操作臺(tái)，點(diǎn)上酒精燈。2、吸取2ml樣液到1號(hào)試管中，再吸取20ml無菌生理鹽水到該試管，搖勻，即為10-1。吸取1號(hào)試管的樣液2ml到2號(hào)試管中，再吸取20ml無菌生理鹽水加到該試管，搖勻，即為10-2。同方法制作10-3于3號(hào)試管中。3、①取PH4的培養(yǎng)基分別倒20ml平鋪于3個(gè)培養(yǎng)皿中。吸取1號(hào)試管中樣液1ml，放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)基上。吸取2號(hào)試管中的樣液1ml,放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。。吸取3號(hào)試管中的樣液1ml,放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。②取PH6的培養(yǎng)基分別倒20ml培養(yǎng)基于3個(gè)培養(yǎng)皿中。吸取1號(hào)試管中樣液1ml，放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。吸取2號(hào)試管中的樣液1ml,放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。。吸取3號(hào)試管中的樣液1ml,放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。③取PH8的培養(yǎng)基分別倒20ml培養(yǎng)基于3個(gè)培養(yǎng)皿中。吸取1號(hào)試管中樣液1ml，放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。吸取2號(hào)試管中的樣液1ml,放入培養(yǎng)皿，使樣液平鋪于培養(yǎng)皿上。。吸取3號(hào)試管中的樣液1ml,放入培養(yǎng)皿，菌都以上升的趨勢(shì)生長(zhǎng)。表明37℃對(duì)枯草桿菌的生長(zhǎng)適合。3、從表1、2、3可以看出，在42℃的溫度下，PH6和PH8的培養(yǎng)基中的枯草桿菌在36h之前都以上升的趨勢(shì)生長(zhǎng)，但在36h到48h這段時(shí)間卻變化不大，停滯生長(zhǎng)。表明短時(shí)間內(nèi)，能緩慢生長(zhǎng)，時(shí)間稍長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯生長(zhǎng)的現(xiàn)象。4、經(jīng)過比較，在同一時(shí)間、同一溫度下，PH8條件下的枯草桿菌都比PH6條件下的生長(zhǎng)的好，即在同一時(shí)間里PH8條件下的枯草桿菌生長(zhǎng)狀態(tài)和速度都比PH6的好。表明在PH8比較適合枯草桿菌的生長(zhǎng)。五、得出結(jié)論：PH8和37℃的溫度下，枯草桿菌生長(zhǎng)的比較迅速，旺盛。參考文獻(xiàn)：[