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文檔簡介
血糖與血脂檢測的
分析前質(zhì)量控制1血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024主要內(nèi)容血糖、胰島素、糖化血紅蛋白、血脂四項的常用檢測方法和基本原理影響結(jié)果準確性的分析前因素樣品采集、運輸、處理、保存和檢測過程中的注意事項2血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024一、常用測定方法與基本原理1.血糖測定方法葡萄糖氧化酶法已糖激酶葡萄糖脫氫酶法3血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024已糖激酶(HK)法檢測原理D-葡萄糖+ATPD-6-磷酸葡萄糖+ADPD-6-磷酸葡萄糖+NADP+
6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+4血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024葡萄糖氧化酶(POD)法檢測原理-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖+H2O+O2
葡萄糖酸+H2O2還原性色原+H2O2
氧化性色原+2H2O5血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024葡萄糖脫氫酶(GlucDH)法檢測原理-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖+NAD+
D-葡萄糖酸--內(nèi)酯+H+6血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20242.膽固醇氧化酶法測定膽固醇酯+H2O
游離膽固醇+游離脂肪酸游離膽固醇+O2
4膽甾烯酮+H2O2H2O2+4-AAP+4-氯酚醌亞胺+2H2O7血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20243.甘油三酯測定方法LPL:脂蛋白脂酶GK:甘油激酶GPO:磷酸甘油氧化酶POD:過氧化物酶8血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20244.HDL-C測定原理9血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20245.LDL-C測定原理10血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
6.胰島素測定(電化學(xué)發(fā)光法)11血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/202412血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/202413血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20247.糖化血紅蛋白(HbA1c)HbA95~97%血紅蛋白AHbA090%非糖化血紅蛋白部分HbA15%~7%糖化血紅蛋白A0(
2
2)-HbA1a果糖1-,6-二磷酸的糖化葡萄糖-6-磷酸的糖化糖化HbA1
鏈-HbA1bHbA1帶有未知反應(yīng)部分-HbA1c75~80%的HbA1,在
鏈-N末端纈氨酸D-葡萄糖糖化HbA2<3%血紅蛋白A(
2
2)HbF<1%血紅蛋白A(
2
2)HbSHbC14血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024糖化血紅蛋白(HbA1c)的檢測方法陽離子交換色譜法親和層析色譜法免疫分析電泳(等電聚焦)硫代巴比妥酸比色測定15血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024陽離子交換色譜法的影響因素醛亞胺被部分測定,乙醛副產(chǎn)品干擾HbF、HbH、HbBart’s使結(jié)果偏高Hb變異體干擾,HbS、HbC使結(jié)果偏低對溫度和pH敏感肝素抗凝使測定結(jié)果偏高參考區(qū)間不適用于溶血性貧血患者結(jié)果判斷16血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024HbA1c的質(zhì)量控制對患者準備和采樣無特殊要求體外高糖血癥時,糖化將繼續(xù)進行,早測定長時間儲存樣本(3~4d)后,RBC產(chǎn)生血紅蛋白相關(guān)的谷胱甘肽加合物(HbA1d/HbA3
)產(chǎn)生干擾溶血產(chǎn)物不如全血穩(wěn)定17血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024患者的準備:視樣本類型和分析項目而定樣本采集的技術(shù)要求樣本運送樣本的儲存和長時間的儲藏分析前樣本的準備已知和需考慮的生物因素和干擾因素二、影響結(jié)果準確性的分析前因素
18血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024分析前影響因素生物因素可變生物因素:營養(yǎng)、禁食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、姿勢、氣候、身高、作息規(guī)律、治療藥物固定生物因素:性別、年齡、種族、遺傳干擾因素內(nèi)在干擾因素:溶血、脂血、膽紅素血、內(nèi)源性抗凝劑、藥物代謝物、輸注液外在干擾因素:抗凝劑、殘留洗液、細菌、真菌19血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024食物影響測定過程吸收到血液中的成分可產(chǎn)生渾濁,
顏色而干擾測定有些成分可能參與測定的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生干擾20血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024試驗對食物的特殊要求
葡萄糖耐量試驗
前三天要給患者足夠的碳水化合物
肌酐清除率試驗
前不能進食富含肌酐的食物(如肌肉)血脂測定至少2周內(nèi)保持一般飲食習(xí)慣和體重穩(wěn)定21血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024CK↑AST↑LDH↑尿酸↑(男性,可能因排泄減少)內(nèi)分泌素↓(卵泡刺激素、黃體生成素、泌乳素、性激素)
(停止運動后數(shù)日可恢復(fù)正常)
運動的影響長期運動可導(dǎo)致:22血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024短時劇烈運動后血液試驗結(jié)果的改變試驗90km滑雪后40km跑步后Cr+40%+45%BUN+46%+31%Hb?33%-Ca2+?5.7%-Mg?10%-HCO3—?12%?17%K
-+23%P-+65%乳酸+113%-23血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024生理節(jié)奏晝夜周期變化舉例:
清晨:皮質(zhì)醇↑、ACTH↑、血清鐵↑、膽紅素↑
入睡時:生長激素高峰,皮質(zhì)醇最低
午夜:蛋白質(zhì)最低垂體激素:多在入睡1~2小時開始升高,在睡眠的中段達高峰24血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024月周期變化
性激素:女性按月經(jīng)周期而變化膽固醇:月經(jīng)前高,排卵時最低
纖維蛋白原:月經(jīng)前增高長周期影響
維生素D夏天高,冬天低副甲狀腺激素、鈣有輕度的相同變化
25血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
立位:
水和電解質(zhì)從血管逸出,站立5min可使血
脂升高5%,15min可升高16%
坐位:
從立位到坐位,水的再平衡分布需要
15分鐘
臥位:
從坐位到臥位,水和電解質(zhì)回到血管,血漿蛋白及和蛋白結(jié)合的物質(zhì)可降低
10%~15%
體位的影響26血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
從立位到臥位時血液成分的變化
試驗項目下降(%)
Hb4(0~17)Hct6(4~9)K1(0~3)Ca4(2~7)ALT7(4~14)AST9(6~11)ALP9(5~11)IgG7IgA7IgM5
甲狀腺素11
27血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024大靜脈的血流被止血帶壓迫阻塞時,引起靜脈濾過壓升高液體和低分子量的物質(zhì)通過毛細血管逸出,使血液相對濃縮應(yīng)用止血帶的影響液體的丟失28血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
靜脈壓持續(xù)升高,流到組織的新鮮血液減少,但細胞代謝繼續(xù)進行,使靜脈內(nèi)的代謝產(chǎn)物增加,如乳酸堆積會使鉀從細胞中漏出,血鉀升高。采血時令患者握拳、松拳的動作也會增加代謝速率。用止血帶時緊握拳1分鐘可使血鉀升高1
1.5mmol/L。細胞內(nèi)含物的漏出29血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024靜脈閉鎖1
3分鐘內(nèi)血清成分改變舉例:
試驗
升高(%)
總蛋白鐵總脂質(zhì)
膽固醇
AST
膽紅素
4.96.74.7
5.19.38.430血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
藥物
的影響藥物對血、尿等成分及試驗結(jié)果的影響是一個極其復(fù)雜的問題影響途徑:
藥理作用對生理病理過程的影響藥物的毒副作用對測定方法的影響
31血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024主要作用于內(nèi)分泌系統(tǒng),兒茶酚胺明顯增加
并導(dǎo)致葡萄糖、胰島素的增加
胃泌素增加可高于基線五倍皮質(zhì)醇、5-羥色胺增加
幾種藥物影響舉例咖啡因32血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
兒茶酚胺↑
胃泌素↑
皮質(zhì)醇↑
生長激素↑(可達正常的10倍)免疫球蛋白↓
維生素B12↓
碳氧血紅蛋白↑WBC↑Hct↑尼古丁33血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
決定于每次的飲酒量和飲酒時間的長短
葡萄糖↓
甘油三酯↑
(采血前24h內(nèi)勿飲)
γ-GT↑
HDL-C↑(與飲酒量相關(guān))
ALT、AST↑
乙醇34血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024
雌激素引起:
HDL-C↑
甲狀腺結(jié)合蛋白↑
銅藍蛋白↑
某些凝血因子↑
黃體酮引起:
HDL-C↓LDL-C↑
口服避孕藥35血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024作好對患者的解釋工作,消除患者的顧慮指導(dǎo)患者如何進行合作避免飲食、藥物、運動、情緒等影響分析前影響因素控制要點36血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20241.護士培訓(xùn)與操作標準化、規(guī)范化責(zé)任心:檢驗申請、采血管、病人的查對技術(shù)操作:抽血部位、抽血用具、抽血技術(shù)、抽血過程、抽血量
獲得“真實”樣本三、樣品采集、運輸、處理、保存和檢測
過程中的注意事項37血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20242.血液樣品采集每日同一時間采血(理想時間7:00-8:00)空腹12h不在服藥期間:早晨服藥前仰臥位或從位同一手臂靜脈區(qū)38血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024采血操作尋找合適的靜脈(肘窩以上10cm為加壓處)無壓力下消毒(70%異丙醇,70%~80%酒精)靜脈加壓(30-50mmHg)用另一只手拉緊穿刺區(qū)域皮膚采血針針頭朝下30o刺入靜脈真空管順暢采血至4ml解除壓力取出針頭,壓迫止血(勿讓患者彎曲胳膊)39血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024采血技術(shù)引起的分析前變異體位:直立位比仰臥10min后蛋白質(zhì)、細胞、膽固醇、Ig、Ca等結(jié)果高3%~8%靜脈加壓持續(xù)時間:大分子量物質(zhì)增高,10min可使TP升高20%,應(yīng)<2min進食:葡萄糖、磷酸鹽、膽紅素增加,CHO中到輕度增高OGTT試驗前幾天應(yīng)連續(xù)攝入高碳水化合物食物40血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024采血不規(guī)范操作反復(fù)拍打、反復(fù)穿刺:凝血已啟動凝血指標受影響;血小板聚集影響血常規(guī)分析血量過多或過少:抗凝劑與血液比例不合適影響凝血指標、血常規(guī)分析等血標本凝固:
影響凝血指標、血常規(guī)分析等溶血:針頭過細、負壓過大影響生化、凝血、血常規(guī)分析等多數(shù)項目靜脈輸注液體的污染:前臂靜脈連接緊密,采血靜脈易被旁側(cè)輸液靜脈液體污染,因此,不能在輸液同側(cè)手臂靜脈取血41血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20243.抗凝劑氟化鈉(2mg/ml血)抑制血液凝固抵制糖酵解抗凝劑污染:如血液污染EDTA-K,會使血K升高,Ca和Mg降低,并使CK、ALP活性降低。42血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20244.樣本運輸樣品儲存可引起:細胞代謝蒸發(fā)作用升華作用化學(xué)反應(yīng)酶活性失活微生物降解滲透作用光學(xué)作用氣體擴散43血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024樣本運輸要求時間:不宜過長運送容器:密封,具一定避震性最好使用冷藏箱:1~4℃管架:一次性或可重復(fù)消毒試管:緊密橡皮塞,垂直放置標簽:清晰易讀、信息齊全、不易脫落44血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024及時運送標本:
APTT和PT室溫2小時 尿常規(guī)室溫2小時
血生化室溫2小時血糖濃度室溫小于1小時心肌損傷標志物小于20分鐘運送真實標本:切忌丟失或灑漏標本后人為復(fù)制標本45血糖與血脂檢測的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20245.樣本準備血清:血液凝固和血塊收縮約需30min;置冰箱或低溫環(huán)境更長促凝劑、分離膠的應(yīng)用:聚苯乙烯試管溶血離心:RCF=1.12×10-5×N2×R(全血2000g15min),離心力與離心時間成反比。不超外界溫度15℃,應(yīng)低于37℃。應(yīng)在2h內(nèi)完成血清分離46血糖與血脂檢測的分
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