第第頁試驗室凱氏定氮儀上機(jī)測定操作步驟說明凱氏定氮儀如何做好保養(yǎng)試驗室凱氏定氮儀上機(jī)測定操作步驟說明

儀器稀釋水接受中性去離子水；蒸汽發(fā)生瓶內(nèi)的水必需保持酸性；硼酸吸取液配制時應(yīng)用中性去離子水，避開堿性物質(zhì)的混入，盛裝硼酸吸取液的容器應(yīng)刷洗干凈；堿液應(yīng)用中性去離子水配置；滴定用的標(biāo)準(zhǔn)酸必需依照標(biāo)準(zhǔn)配制和標(biāo)定。

上機(jī)測試樣品前，應(yīng)打開儀器預(yù)熱，放一支消化管空蒸一次，排出蒸餾管路中的空氣。

蒸餾時必需加堿，加入堿的作用一是中和硫酸，二是使溶液處于強(qiáng)堿性，這樣才能使、（NH4）2SO4變成NH3被硼酸吸取，通常是消化取用濃硫酸的四倍體積（40%NaOH）。硫酸銅可作為催化劑,并在蒸餾時作堿性反應(yīng)指示劑,氫氧化鈉是否足量.可借助硫酸、銅在堿性條件下生成的褐色沉淀或深藍(lán)色的銅氨絡(luò)離子指示。若溶液的顏色不更改，則說明所加的堿液不足。

蒸餾是否完全，半自動凱氏定氮儀可用精密、pH試紙測冷凝管的冷凝液來確定，中性說明已蒸餾完全。全自動凱氏定氮儀目前緊要是以蒸餾體積與設(shè)置時間（閱歷值）確保蒸餾完全。

蒸餾結(jié)束后，滴定緊要是是分為人工滴定和機(jī)器自動滴定計算和打印試驗結(jié)果。要求操依據(jù)實際情況，依照要求操作。

凱氏定氮儀的分析原理—凱氏定氮法測定試樣時，需經(jīng)過消解、蒸餾、滴定3個過程樣品的消解就是將含氮的有機(jī)化合物與硫酸和催化劑一同加熱消化，使有機(jī)氮分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸按樣品經(jīng)過消解后將試樣中有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為無機(jī)氮，再將消解后的樣品加入到定氮儀蒸餾器中進(jìn)行堿解蒸餾。

免水凱氏定氮儀

凱氏定氮儀就是完成無機(jī)氮的堿解蒸餾過程，即在經(jīng)過消解后的硫酸按中加入堿液，在熱蒸汽下進(jìn)行堿解蒸餾，實在如下:凱氏定氮儀可以自動完成對樣品的定量加堿、加酸、自動蒸餾過程，當(dāng)被測樣品完全消解后，反應(yīng)中釋放的氨氣與水蒸氣經(jīng)過冷凝管冷凝后，被收集在裝有硼酸吸取液（含有甲基紅一澳甲酚綠混合定氮指示劑）的三角瓶中，后用標(biāo)準(zhǔn)酸液進(jìn)行滴定。

一臺好的設(shè)備不光是制造性能與使用人性化上，還是檢測結(jié)果上，都離不開使用后的維護(hù)與保養(yǎng)，再好的設(shè)備不進(jìn)行維護(hù)與保養(yǎng)不但會降低使用壽命，還會使得設(shè)備常常顯現(xiàn)故障影響整個試驗，下面共享免水凱氏定氮儀的維護(hù)與保養(yǎng)。

免水凱氏定氮儀的維護(hù)與保養(yǎng)

1.儀器應(yīng)避開安裝在陽光直射及過冷、過熱或潮濕的地方，室內(nèi)溫度不得超過100C～300C，通風(fēng)要好，應(yīng)有良好的散熱條件

2.儀器前部槽皿中若積有液體，應(yīng)常常擦凈

3.長期使用后，在加熱器上會結(jié)有水垢，它將影響加熱效率若水垢過厚，在關(guān)機(jī)狀態(tài)下斷電，可將蒸汽發(fā)生器頂上的一個旋塞擰下，在管口處插入一個小漏斗，注入除垢劑或冰醋酸清洗水垢（也可用稀釋后的硫酸）清洗后，打開機(jī)箱內(nèi)蒸汽發(fā)生器排水節(jié)門將水排凈，并加入清水多次清洗。

4.加堿液桶、加硼酸桶應(yīng)定期清理沉淀物并洗凈

凱氏定氮儀怎么使用？

凱氏定氮儀緊要用來檢測糧食、食品、乳制品、飲料、飼料、土壤、水、藥物、沉淀物和化學(xué)品等中的氨氮、蛋白質(zhì)氮等含量。檢測結(jié)果符合GB/T6423—94規(guī)定指標(biāo)。

（一）消化

1、準(zhǔn)備6個凱氏燒瓶，標(biāo)號。1、2、3號燒瓶中分別加入適當(dāng)濃度的蛋白溶液1.0mL，樣品要加到燒瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次加入硫酸鉀—硫酸銅接觸劑0.3g，濃硫酸2.0mL，30%過氧化氫1.0mL。4、5、6號燒瓶作為空白對比，用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì)，對樣品測定進(jìn)行校正。4、5、6號燒瓶中加入蒸餾水1.0mL代替樣液，其余所加試劑與1、2、3號燒瓶相同。

2、將加好試劑的各燒瓶放置消化架上，接好抽氣裝置。先用微火加熱煮沸，此時燒瓶內(nèi)物質(zhì)炭化變黑，并產(chǎn)生大量泡沫，務(wù)必注意防止氣泡沖出管口。待泡沫消失停止產(chǎn)生后，加大火力，保持瓶內(nèi)液體微沸，至溶液澄清后，再連續(xù)加熱使消化液微沸15min。在消化過程中要隨時轉(zhuǎn)動燒瓶，以使內(nèi)壁粘著物質(zhì)均能流入底部，以保證樣品完全消化。消化時放出的氣體內(nèi)含SO2，具有猛烈刺激性，因此自始自終應(yīng)打開抽水泵將氣體抽入自來水排出。整個消化過程均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。消化完全后，關(guān)閉火焰，使燒瓶冷卻至室溫。

（二）蒸餾和吸取

蒸餾和吸取是在微量凱氏定氮儀內(nèi)進(jìn)行的。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多，大體上都由蒸氣發(fā)生、氨的蒸餾和氨的吸取三部分構(gòu)成。

1、儀器的洗滌

儀器安裝前，各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管、塞須浸在10%NaOH溶液中，煮約10min，水洗、水煮10min，再水洗數(shù)次，然后安裝并固定在一只鐵架臺上。

儀器使用前，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨，正在使用的儀器，每次測樣前，蒸汽洗滌5min即可。較長時間未使用的儀器，重復(fù)蒸汽洗滌，不得少于三次，并檢查儀器是否正常。認(rèn)真檢查各個連接處，保證不漏氣。

首先在蒸汽發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性，以避開水中的氨被蒸出而影響結(jié)果，并放入少許沸石（或毛細(xì)管等），以防爆沸。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室，但玻璃杯內(nèi)的水不要放光，塞上棒狀玻塞，保持水封，防止漏氣。蒸汽發(fā)生后，立刻關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān)，使蒸氣只能進(jìn)入反應(yīng)室，導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)的水快速沸騰，蒸出蒸氣由反應(yīng)室上端口通過定氮球進(jìn)入冷凝管冷卻，在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發(fā)燙開始計時，連續(xù)蒸煮5min，然后移開煤氣燈。沖洗完畢，夾緊蒸汽發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，由于氣體冷卻壓力降低，反應(yīng)室內(nèi)廢液自動抽到反應(yīng)室外殼中，打開廢液排出口夾子放出廢液。如此清洗2～3次，再在冷凝管下放一個盛有硼酸—指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口完全浸沒在溶液中，蒸餾1～2min，察看錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色。如不變色，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈。移去錐形瓶，再蒸餾1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝器下口，關(guān)閉煤氣燈，儀器即可供測樣品使用。

2、無機(jī)氮標(biāo)準(zhǔn)樣品的蒸餾吸取

由于定氮操作繁瑣，為了諳習(xí)蒸餾和滴定的操作技術(shù)，初學(xué)者宜先用無機(jī)氮標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行反復(fù)練習(xí)，再進(jìn)行有機(jī)氮未知樣品的測定。常用巳知濃度的標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨測試三次。

取干凈的100mL錐形瓶五只，依次加入2%硼酸溶液20mL，次甲基藍(lán)—甲基紅混合指示劑（呈紫紅色）3～4滴，蓋好瓶口待用。取其中一只錐形瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸沒在溶液中。注意：在此操作之前必需先打開收集器活塞，以免錐形瓶內(nèi)液體倒吸。精準(zhǔn)吸取2mL硫酸銨標(biāo)準(zhǔn)液加到玻杯中，當(dāng)心提起棒狀玻塞使硫酸銨溶液漸漸流入蒸餾瓶中，用少量蒸餾水沖洗小玻杯3次，一并放人蒸餾瓶中。然后用量筒向小玻杯中加入10mL30％NaOH溶液，使堿液漸漸流入蒸餾瓶中，在堿液尚未完全流入時，將棒狀玻塞蓋緊。向小玻杯中加約5mL蒸餾水，再漸漸打開玻塞，使一半水流入蒸餾瓶，一半留在小玻杯中作水封。關(guān)閉收集器活塞，加熱蒸汽發(fā)生器，進(jìn)行蒸餾。錐形瓶中的硼酸—指示劑混合液由于吸取了氨，由紫紅色變成綠色。自變色時起，再蒸餾3～5min，移動錐形瓶使瓶內(nèi)液面離開冷凝管下口約lcm，并用少量蒸餾水沖洗冷凝管下口，再連續(xù)蒸餾1min，移開錐形瓶，蓋好，準(zhǔn)備滴定。

在一次蒸餾完畢后，移去煤氣燈，夾緊蒸汽發(fā)生器與收集器間的橡膠管，排出反應(yīng)完畢的廢液，用水沖洗小玻杯幾次，并將廢液排出。如此反復(fù)沖洗干凈后，即可進(jìn)行下一個樣品的蒸餾。按以上方法用標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨再做兩次。另取2mL蒸餾水代替標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨進(jìn)行空白測定二次。將各次蒸餾的錐形瓶一起滴定。

3、未知樣品及空白的蒸餾吸取

將消化好的蛋白樣品三支，空白對比液三支，依次作蒸餾吸取。

加5mL熱的蒸餾水至消化好的樣品或空白對比液中，通過小玻杯加到反應(yīng)室中，再用熱蒸餾水洗滌小玻杯3次，每次用水量約3mL，洗滌液一并倒入反應(yīng)室內(nèi)。其余操作按標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨的蒸餾進(jìn)行。

由于消化液內(nèi)硫酸鉀濃度高而呈粘稠狀，不易從凱氏燒瓶內(nèi)倒出，必需加入熱蒸餾水5mL稀釋之，假如有結(jié)晶析出，必需微熱溶解，趁熱加入玻杯，使其流入反應(yīng)室。此外，還應(yīng)當(dāng)注意趁儀器洗滌尚未完全冷卻時立刻加入樣品或空白對比液，否則消化液通過冷卻的管道簡單析出結(jié)晶，造成堵塞。

（三）凱氏定氮儀滴定

樣品和空白蒸餾完畢后，一起進(jìn)行滴定。

打開接受瓶蓋，用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液進(jìn)行滴定。待滴至瓶內(nèi)溶液呈暗灰色時，用蒸餾水將錐形瓶內(nèi)壁四周淋洗