ICS71.100.70

CCSY42

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/TXXXXX—XXXX

化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測(cè)

定高效液相色譜法

Determinationofrestricted2,4-diamino-pyrimidine-3-oxideincosmetics—High

performanceliquidchromatography

（征求意見稿）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局

發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/TXXXXX—XXXX

化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定高效液相色譜法

1警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本文件并未指出所有可能的安全問題。

使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)規(guī)定的條件。范圍

本文件描述了化妝品中二氨基嘧啶氧化物的高效液相色譜測(cè)定方法的原理、試劑和材料、儀器設(shè)備、

試驗(yàn)步驟、結(jié)果計(jì)算、回收率和精密度、允許差等內(nèi)容。

本文件適用于化妝品中二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定。

本文件方法檢出限和定量限：方法檢出限為3.0mg/kg，方法定量限為10.0mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4原理

試樣用10%甲醇溶液分散提??；提取液經(jīng)離心、過濾后，用高效液相色譜儀測(cè)定。根據(jù)保留時(shí)間和光

譜圖定性，外標(biāo)法定量。

5試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純。

5.1水：GB/T6682，一級(jí)。

5.2甲醇：色譜純。

5.3乙腈：色譜純。

5.4正己烷：色譜純。

5.510%甲醇溶液：準(zhǔn)確量取10mL甲醇（5.2）和90mL水，混勻后備用。

5.6標(biāo)準(zhǔn)品：二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量及化學(xué)

結(jié)構(gòu)式見附錄A表A.1，純度不小于98%。

5.7標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品（5.6）（精確至0.1mg），用甲醇（5.2）配制成質(zhì)

量濃度為1000μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液（于4℃避光保存，可保存6個(gè)月）。準(zhǔn)確移取單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液

1.0mL，置于10mL棕色容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，制得標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（100μg/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用）。

5.8濾膜：孔徑為0.45μm的有機(jī)系濾膜。

2

GB/TXXXXX—XXXX

6儀器設(shè)備

6.1高效液相色譜儀：配有二極管陣列檢測(cè)器。

6.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。

6.3漩渦振蕩器。

6.4超聲波清洗儀：工作頻率不低于40kHz。

6.5離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。

7試驗(yàn)步驟

7.1試樣處理

稱取1g（精確至0.001g）試樣，置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入20mL10%甲醇溶液（5.5），渦

旋混合混勻，超聲5min。然后加入10mL正己烷溶液（5.4），渦旋振蕩1min，4000r/min離心5min，下

層清液經(jīng)濾膜過濾后供高效液相色譜儀測(cè)定。

7.2測(cè)定

7.2.1液相色譜參考工作條件

液相色譜參考工作條件如下：

a)色譜柱：AQC18柱，5μm，250mm×4.6mm，或性能相當(dāng)者；

b)流動(dòng)相：甲醇（5.2）：水=9：1；

c)流速：0.8mL/min；

d)柱溫：25℃；

e)波長(zhǎng)：287nm；

f)進(jìn)樣量：10μL。

7.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

用10%甲醇溶液（5.5）逐級(jí)稀釋標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（5.7），得到0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、

5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按色譜條件（7.2.1）進(jìn)行測(cè)定，以色譜

峰的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對(duì)應(yīng)的溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高效液相色譜圖見附錄B圖B.1。

7.2.3試樣測(cè)定

按色譜條件測(cè)定試樣溶液（7.1），如果檢出目標(biāo)物質(zhì)的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品一致，且紫外吸

收光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品一致，可認(rèn)定樣品中存在目標(biāo)物質(zhì)，記錄色譜峰的峰面積，以外標(biāo)法定量。試樣溶液

中被測(cè)物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液可用10%甲醇溶液（5.5）

適當(dāng)稀釋后進(jìn)行測(cè)定。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的紫外吸收光譜圖見附錄B圖B.2。

7.3空白試驗(yàn)

除不稱取試樣外，均按7.1～7.2步驟進(jìn)行測(cè)定。

8結(jié)果計(jì)算

3

GB/TXXXXX—XXXX

二氨基嘧啶氧化物含量按公式（1）計(jì)算：

()ccV?

Xk=i0（1）

im10000

式中：

Xi——試樣中被測(cè)組分的含量，單位為百分比(%)；

ci——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中被測(cè)組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

c0——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白樣品溶液中被測(cè)組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

V——加入10%甲醇溶液的體積，單位為毫升(mL)；

m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)；

k——超線性范圍的稀釋倍數(shù)。

計(jì)算結(jié)果大于或等于1.0%時(shí)，結(jié)果保留三位有效數(shù)字；結(jié)果小于1.0%時(shí)，保留兩位有效數(shù)字。

9回收率

在添加濃度為0.001%~1%范圍內(nèi)，回收率在80%~110%之間。

10精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10％。

4

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附錄A

（資料性）

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的信息

二氨基嘧啶氧化物的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量及化學(xué)結(jié)構(gòu)式見表A.1。

表A.1二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的信息

序號(hào)中文名稱英文名稱CAS號(hào)分子式相對(duì)分子質(zhì)量化學(xué)結(jié)構(gòu)式

二氨基嘧啶2,4-Diamino-pyr

174638-76-9C4H6N4O126.12

氧化物imidine-3-oxide

5

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附錄B

（資料性）

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖和光譜圖

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖見圖B.1

圖B.1二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖

圖B.2二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的光譜圖

_________________________________

6

GB/TXXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由輕工業(yè)聯(lián)合會(huì)提出。

本文件由全國香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC257）歸口。

本文件起草單位：***。

本文件主要起草人：***。

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化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定高效液相色譜法

1警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本文件并未指出所有可能的安全問題。

使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)規(guī)定的條件。范圍

本文件描述了化妝品中二氨基嘧啶氧化物的高效液相色譜測(cè)定方法的原理、試劑和材料、儀器設(shè)備、

試驗(yàn)步驟、結(jié)果計(jì)算、回收率和精密度、允許差等內(nèi)容。

本文件適用于化妝品中二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定。

本文件方法檢出限和定量限：方法檢出限為3.0mg/kg，方法定量限為10.0mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4原理

試樣用10%甲醇溶液分散提??；提取液經(jīng)離心、過濾后，用高效液相色譜儀測(cè)定。根據(jù)保留時(shí)間和光

譜圖定性，外標(biāo)法定量。

5試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純。

5.1水：GB/T6682，一級(jí)。

5.2甲醇：色譜純。

5.3乙腈：色譜純。

5.4正己烷：色譜純。

5.510%甲醇溶液：準(zhǔn)確量取10mL甲醇（5.2）和90mL水，混勻后備用。

5.6標(biāo)準(zhǔn)品：二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量及化學(xué)

結(jié)構(gòu)式見附錄A表A.1，純度不小于98%。

5.7標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品（5.6）（精確至0.1mg），用甲醇（5.2）配制成質(zhì)

量濃度為1000μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液（于4℃避光保存，可保存6個(gè)月）。準(zhǔn)確移取單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液

1.0mL，置于10mL棕色容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，制得標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（100μg/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用）。

5.8濾膜：孔徑為0.45μm的有機(jī)系濾膜。

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6儀器設(shè)備

6.1高效液相色譜儀：配有二極管陣列檢測(cè)器。

6.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。

6.3漩渦振蕩器。

6.4超聲波清洗儀：工作頻率不低于40kHz。

6.5離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。

7試驗(yàn)步驟

7.1試樣處理

稱取1g（精確至0.001g）試樣，置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入20mL10%甲醇溶液（5.5），渦

旋混合混勻，超聲5min。然后加入10mL正己烷溶液（5.4），渦旋振蕩1min，4000r/min離心5min，下

層清液經(jīng)濾膜過濾后供高效液相色譜儀測(cè)定。

7.2測(cè)定

7.2.1液相色譜參考工作條件

液相色譜參考工作條件如下：

a)色譜柱：AQC18柱，5μm，250mm×4.6mm，或性能相當(dāng)者；

b)流動(dòng)相：甲醇（5.2）：水=9：1；

c)流速：0.8mL/min；

d)柱溫：25℃；

e)波長(zhǎng)：287nm；

f)進(jìn)樣量：10μL。

7.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

用10%甲醇溶液（5.5）逐級(jí)稀釋標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（5.7），得到0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、

5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按色譜條件（7.2.1）進(jìn)行測(cè)定，以色譜

峰的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對(duì)應(yīng)的溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高效液相色譜圖見附錄B圖B.1。

7.2.3試樣測(cè)定

按色譜條件測(cè)定試樣溶液（7.1），如果檢出目標(biāo)物質(zhì)的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品一致，且紫外吸

收光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品一致，可認(rèn)定樣品中存在目標(biāo)物質(zhì)，記錄色譜峰的峰面積，以外標(biāo)法定量。試樣溶液

中被測(cè)物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液可用10%甲醇溶液（5.5）

適當(dāng)稀釋后進(jìn)行測(cè)定。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的紫外吸收光譜圖見附錄B圖B.2。

7.3空白試驗(yàn)

除不稱取試樣外，均按7.1～7.2步驟進(jìn)行測(cè)定。

8結(jié)果