肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求2019-12-17發(fā)布國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)I本標(biāo)準(zhǔn)為全文強(qiáng)制。本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)工業(yè)和信息化部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：上海化工研究院有限公司、全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心、中農(nóng)舜天生態(tài)肥業(yè)有限公司、中化化肥有限公司、江蘇華昌化工股份有限公司、山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、云南省化工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站、上海海關(guān)工業(yè)品與原材料檢測(cè)技術(shù)中心、雙贏集團(tuán)生態(tài)科技有限公司、江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院、湖南省產(chǎn)商品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院、貴州省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院。1肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求、試驗(yàn)方法和檢驗(yàn)規(guī)則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種工藝生產(chǎn)的商品肥料。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T2441.2尿素的測(cè)定方法第2部分：縮二脲含量分光光度法GB5085.1危險(xiǎn)廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)腐蝕性鑒別GB5085.2危險(xiǎn)廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)急性毒性初篩GB5085.3危險(xiǎn)廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)浸出毒性鑒別GB5085.4危險(xiǎn)廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)易燃性鑒別GB5085.5危險(xiǎn)廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)性鑒別GB5085.6危險(xiǎn)廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)毒性物質(zhì)含量鑒別GB/T8170—2008數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB/T19524.1肥料中糞大腸菌群的測(cè)定GB/T19524.2肥料中蛔蟲卵死亡率的測(cè)定GB/T22924復(fù)混肥料(復(fù)合肥料)中縮二脲含量的測(cè)定GB/T31266過磷酸鈣中三氯乙醛含量的測(cè)定GB/T32952肥料中多環(huán)芳烴含量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法GB/T35104肥料中鄰苯二甲酸酯類增塑劑含量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法ISO17318肥料和土壤調(diào)理劑砷、鎘、鉻、鉛和汞含量的測(cè)定(Fertilizersandsoilconditioners-Determinationofarsenic,cadmium,chromium,leadandmercurycontents)ISO18643肥料和土壤調(diào)理劑尿基肥料中縮二脲含量的測(cè)定HPLC法(Fertilizersandsoilconditioners—Determinationofbiuretcontentofurea-basedfertilizers—HPLCmethod)3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。肥料fertilizer用于提供、保持或改善植物營(yíng)養(yǎng)和土壤物理、化學(xué)性能以及生物活性，能提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量，或改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)，或增強(qiáng)植物抗逆性的有機(jī)、無(wú)機(jī)、微生物及其混合物料。商品肥料commercialfertilizer以商品形式出售的肥料。2在生產(chǎn)、生活和其他活動(dòng)中產(chǎn)生的喪失原有利用價(jià)值或者雖未喪失利用價(jià)值但被拋棄或者放棄的固態(tài)、半固態(tài)和置于容器中的氣態(tài)的物品、物質(zhì)以及法律、行政法規(guī)規(guī)定納入固體廢物管理的物品、注：改寫GB5085.7—2007,定義3.1。由提取、物理和/或化學(xué)工業(yè)方法制成的，標(biāo)明養(yǎng)分呈無(wú)機(jī)鹽形式的肥料。[GB/T6274—2016,定義2.1.6]4要求4.1基本項(xiàng)目表1中的項(xiàng)目為基本項(xiàng)目(必測(cè)項(xiàng)目),按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的試驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè)判定后應(yīng)符合表1要求。表1肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求(基本項(xiàng)目)序號(hào)含量限值無(wú)機(jī)肥料其他肥料"1總鎘2總汞3總砷4總鉛5總鉻6總鉈7縮二脲8蛔蟲卵死亡率—c9糞大腸菌群數(shù)_c≤100個(gè)/g或≤100個(gè)/mL除無(wú)機(jī)肥料以外的肥料，有毒有害物質(zhì)含量以烘干基計(jì)?！眱H在標(biāo)明總氮含量時(shí)進(jìn)行檢測(cè)和判定。該指標(biāo)不做要求。4.2可選項(xiàng)目表2中的項(xiàng)目為可選項(xiàng)目，當(dāng)使用來(lái)源不明的廢棄物為肥料原料及管理部門認(rèn)為必要時(shí)，按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的試驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè)判定后應(yīng)符合表2要求。3表2肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求(可選項(xiàng)目)序號(hào)含量限值其他肥料”1總鎳2總鈷3總釩4總銻5苯并[a]芘6石油烴總量'7鄰苯二甲酸酯類總量8三氯乙醛_d除無(wú)機(jī)肥料以外的肥料，有毒有害物質(zhì)含量以烘干基計(jì)?！蜔N總量為C?~C?s總和。鄰苯二甲酸酯類總量為鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸丁基卞酯(BBP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己基酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP)八種物質(zhì)總和。d該指標(biāo)不做要求。4.3其他要求4.3.1尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的肥料產(chǎn)品投放市場(chǎng)前，應(yīng)按附錄A進(jìn)行陸生植物生長(zhǎng)試驗(yàn)，且在一定暴露期間產(chǎn)生的不良改變與對(duì)照相比不大于25%作用濃度(EC?5)。4.3.2不應(yīng)在肥料中人為添加對(duì)環(huán)境、農(nóng)作物生長(zhǎng)和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全造成危害的染色劑、著色劑、激素等添加物。4.3.3依據(jù)GB5085.1～GB5085.6進(jìn)行鑒別，具有腐蝕性、毒性、易燃性、反應(yīng)性等任何一種危險(xiǎn)特性的固體廢物不應(yīng)直接施用到土壤中。其中依據(jù)GB5085.3進(jìn)行浸出毒性鑒別時(shí)，對(duì)銅(以總銅計(jì))和鋅(以總鋅計(jì))指標(biāo)不做要求。5試驗(yàn)方法5.1腐蝕性鑒別5.2急性毒性鑒別5.3浸出毒性鑒別45.4易燃性鑒別5.5反應(yīng)性鑒別按GB5085.5進(jìn)行。5.6毒性物質(zhì)含量鑒別按GB5085.6進(jìn)行。按附錄B進(jìn)行。5.9縮二脲按GB/T22924或GB/T2441.2或ISO18643進(jìn)行，以GB/T22924為仲裁法。按GB/T32952進(jìn)行。5.11石油烴總量5.12鄰苯二甲酸酯類總量按GB/T35104進(jìn)行。5.13三氯乙醛5.14蛔蟲卵死亡率按GB/T19524.2進(jìn)行。5.15糞大腸菌群數(shù)按GB/T19524.1進(jìn)行。5.16陸生植物生長(zhǎng)試驗(yàn)按附錄A進(jìn)行。6檢驗(yàn)規(guī)則6.1本標(biāo)準(zhǔn)中指標(biāo)合格判定，采用GB/T8170—2008中的“修約值比較法”。56.2采樣和樣品制備按相應(yīng)的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。6.3第4章中縮二脲按相應(yīng)的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定確定檢驗(yàn)項(xiàng)目分類，其他項(xiàng)目均為型式檢驗(yàn)項(xiàng)目。6.4型式檢驗(yàn)在下列情況時(shí)應(yīng)進(jìn)行：a)在新產(chǎn)品投放市場(chǎng)前；b)正式生產(chǎn)時(shí)，定期或積累到一定量后，每?jī)赡曛辽龠M(jìn)行一次檢驗(yàn)；c)發(fā)生肥料質(zhì)量事故和糾紛，進(jìn)行調(diào)查時(shí)；d)政府管理部門提出型式檢驗(yàn)的要求時(shí)。6(規(guī)范性附錄)陸生植物生長(zhǎng)試驗(yàn)A.1受試物信息受試物信息包括但不限于：水溶性、蒸汽壓、結(jié)構(gòu)式、有機(jī)溶劑中的溶解度、正辛醇/水的分配系數(shù)、A.2試驗(yàn)簡(jiǎn)介A.2.1試驗(yàn)?zāi)康挠糜谠u(píng)價(jià)在一次性施用后，土壤中固態(tài)和液態(tài)的化學(xué)物質(zhì)對(duì)植物幼苗和早期生長(zhǎng)的潛在毒性效應(yīng)。A.2.2試驗(yàn)原理本附錄用于評(píng)價(jià)在土壤中(或其他合適的土壤基質(zhì))施用供試品后對(duì)出苗和較高植物早期生長(zhǎng)的影響。種子種入供試品處理過土壤中，在對(duì)照組出苗率達(dá)到50%后的14d～21d內(nèi)進(jìn)行評(píng)價(jià)。終點(diǎn)測(cè)量是可見的出苗率、苗干重(也可為鮮重),某些情況下為苗高，也要評(píng)價(jià)植物不同部位上可見的有害的影響。這些測(cè)量和觀察與未處理的對(duì)照進(jìn)行比較。根據(jù)可能的暴露途徑，供試品混入土壤(或可能的人工土壤基質(zhì))或噴灑在土壤表面，這些途徑要盡可能正確代表化學(xué)品潛在的暴露途徑。土壤混合時(shí)先進(jìn)行大量散土的混合，然后再裝入盆中，將所選植物種子種入土壤中。表面施藥時(shí)，先將土壤裝入盆中，將種子種好，然后再噴藥。試驗(yàn)體系(對(duì)照和處理土壤及種子)放在適合植物生長(zhǎng)的環(huán)境中。本附錄可根據(jù)研究目的測(cè)定劑量-反應(yīng)曲線，或單劑量/比率作為限度試驗(yàn)。如果單劑量/比率試驗(yàn)超出一定的毒性水平(例如觀察到的效應(yīng)高于x%),要進(jìn)行范圍篩選試驗(yàn)測(cè)定毒性高限和低限，再進(jìn)行多劑量試驗(yàn)產(chǎn)生劑量-反應(yīng)曲線。適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)分析方法分析獲得最敏感參數(shù)的作用濃度EC,或有效施用率ER,(如：EC25、ER?5、EC?、ERso)。同樣無(wú)作用濃度(NOEC)和最低作用濃度(LOEC)也能計(jì)算A.2.3參比物定期進(jìn)行參考物質(zhì)試驗(yàn)，以確認(rèn)隨著時(shí)間的推移試驗(yàn)性能和特定植物的反應(yīng)和試驗(yàn)條件沒有明顯改變?？蛇x的方法還有，實(shí)驗(yàn)室用以往的對(duì)照組生物量測(cè)定或生長(zhǎng)測(cè)量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)系統(tǒng)的性能，可以作為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制。本附錄不能給出由受試物蒸發(fā)所造成的可能傷害結(jié)果，也未測(cè)定由于直接接觸植物所產(chǎn)生的傷害。A.3設(shè)備與材料人工生長(zhǎng)箱、溫室或植物生長(zhǎng)箱。生長(zhǎng)容器應(yīng)為塑料器皿或瓷盆缽。7A.4試驗(yàn)操作A.4.1準(zhǔn)備自然土/人工基質(zhì)可用含1.5%以上有機(jī)碳(有機(jī)質(zhì)約3%)的沙壤土、壤質(zhì)沙土或沙質(zhì)黏壤土裝入花盆，種入植物，含1.5%以上有機(jī)碳的商業(yè)盆栽土或合成混合土均可用。如果供試品黏土有很高的親和力，則不可用黏土。耕地土應(yīng)過2mm篩使之均一，并去除粗糙顆粒。最終準(zhǔn)備土壤的類型和構(gòu)造、有機(jī)碳、pH、鹽含量和電導(dǎo)率應(yīng)報(bào)告。土壤應(yīng)巴氏消毒或熱處理消毒以減少土壤病菌的影響。由于物理/化學(xué)特征和微生物群落的改變，自然土可能使結(jié)果的解釋復(fù)雜化，增加變異性，這些變異依次為土壤持水能力、化學(xué)結(jié)合能力、通風(fēng)、營(yíng)養(yǎng)和微量元素含量。除了物理因素的變異外，在化學(xué)特性上的變異，如pH和氧化還原電位，可以影響供試品的生物可用性。為盡可能減少自然土的變異性對(duì)試驗(yàn)帶來(lái)的誤差，當(dāng)受試物不是植物保護(hù)產(chǎn)品時(shí)，可用人工基質(zhì)代替自然土進(jìn)行試驗(yàn)。所用基質(zhì)應(yīng)包含惰性物質(zhì)，減少與供試品、溶劑載體或兩者的相互反應(yīng)，用酸洗過的石英砂、礦物絲和玻璃珠(如：直徑0.35mm～0.85mm)是合適的惰性物質(zhì)，可減少對(duì)供試品的吸收，保證供試品最大可能地經(jīng)根吸收達(dá)到幼苗。不適合的基質(zhì)包括蛭石、珍珠巖或其他高吸收性的材料。應(yīng)提供植物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)，以保證植物沒有營(yíng)養(yǎng)缺乏的壓力，可通過化學(xué)分析或?qū)φ罩参锏目梢娫u(píng)價(jià)進(jìn)行評(píng)價(jià)。A.4.2供試植物選擇植物的種類應(yīng)考慮其在植物界中分類學(xué)上的多樣性、分布特征、種的特定生活史和自然界分布地區(qū)差異，具體包括下列特征：——有均一的種子，從可靠的標(biāo)準(zhǔn)種子來(lái)源獲得，能產(chǎn)生持續(xù)、可靠和一致的萌芽，以及一致的幼苗生長(zhǎng)；——植物應(yīng)適于在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)及實(shí)驗(yàn)室之間能夠得出可靠和可再現(xiàn)的結(jié)果；——所用種的敏感性應(yīng)與環(huán)境暴露中的植物反應(yīng)一致；——所選種已用以往的一些毒性試驗(yàn)，它們?cè)谌绯輨┥餃y(cè)定、重金屬篩選、鹽度或礦物壓力試驗(yàn)或植物相克研究中的使用表明對(duì)寬泛多樣性刺激存在敏感度；——能夠適應(yīng)試驗(yàn)方法中的生長(zhǎng)條件；——符合試驗(yàn)有效性標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)所用的種類數(shù)量根據(jù)相關(guān)的管理要求決定，附錄C中的植物測(cè)試試驗(yàn)用物種供參考。A.4.3供試品的施入分和各種助劑的制劑進(jìn)行試驗(yàn)。A.4.4與土壤/人工基質(zhì)的混合溶于水或可懸浮在水中的物質(zhì)可以直接配成水溶液，然后將水溶液與土在適當(dāng)?shù)娜萜髦谢旌?。此種類型試驗(yàn)適合化學(xué)品通過土壤或土壤毛細(xì)水吸收，涉及根的吸收。供試品添加量不應(yīng)超過土壤持水力。每個(gè)濃度添加的溶液量應(yīng)一致，但要注意避免土壤結(jié)塊。水溶性低的物質(zhì)應(yīng)先溶入適當(dāng)?shù)膿]發(fā)性溶劑中(如：丙酮、乙醇)并與沙混合。用氣流將溶劑從沙中去除。處理的沙子與試驗(yàn)土壤混合。設(shè)置只加沙子和溶劑的溶劑對(duì)照。各處理和溶劑對(duì)照應(yīng)加等量的混入溶劑并已去除溶劑的沙子，對(duì)于固體和不溶于水的供試品，直接和干土混合。此后，將土加入容器8用人工基質(zhì)代替土壤時(shí)，在試驗(yàn)開始前可直接將溶于水的化學(xué)品溶解到營(yíng)養(yǎng)液中。不溶于水，但可以通過溶劑載體懸浮于水中的，可加入載體，再溶于營(yíng)養(yǎng)液中。不溶于水，但沒有無(wú)毒的水溶性載體，可先溶于適當(dāng)?shù)膿]發(fā)性溶劑。溶液與沙子或玻璃珠混合，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)，使化學(xué)品均勻地覆著在沙?；蛑樽由稀Ｔ诜盅b之前，取一部分稱重的玻璃珠用等量溶劑提取，進(jìn)行化學(xué)分析。A.4.5表面施用對(duì)于作物保護(hù)產(chǎn)品，通常用土壤表面噴灑試驗(yàn)溶液的方法進(jìn)行施藥。進(jìn)行試驗(yàn)操作的所有設(shè)備，包括準(zhǔn)備和噴灑供試品的設(shè)備，都應(yīng)使試驗(yàn)以精確的方式進(jìn)行，能夠產(chǎn)生可重現(xiàn)性覆蓋。覆蓋應(yīng)均一分布在土壤表面。應(yīng)避免化學(xué)品被設(shè)備吸收或與設(shè)備反應(yīng)的可能(如：塑料管與親脂性化學(xué)品易反應(yīng)，或某些化學(xué)品對(duì)鋼材質(zhì)設(shè)備有腐蝕性)。模仿典型的噴霧器將供試品噴灑在土壤表面。通常，噴灑量應(yīng)在正常農(nóng)用量的范圍內(nèi)，用量(水的量等)應(yīng)報(bào)告。選擇噴嘴類型以保證均一的土壤表面覆蓋量。如果應(yīng)用溶劑和載體，應(yīng)設(shè)置溶劑/載體對(duì)照。不必試驗(yàn)作物保護(hù)產(chǎn)品的制劑。A.4.6供試品濃度/比率的驗(yàn)證濃度應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)姆治龇椒?yàn)證。對(duì)于可溶性物質(zhì)，所有濃度的驗(yàn)證可以通過分析用于逐級(jí)稀釋的最高濃度來(lái)確認(rèn)。用校準(zhǔn)設(shè)備(如：校準(zhǔn)分析用玻璃器具、校準(zhǔn)噴霧設(shè)備)進(jìn)行逐級(jí)稀釋。對(duì)于不溶于水的物質(zhì)，分析添加到土中的量。如果要證明供試品在土壤中的均一性，有必要進(jìn)行土壤分析。A.4.7試驗(yàn)條件試驗(yàn)條件應(yīng)與試驗(yàn)種和變種的正常生長(zhǎng)條件相似。出苗的植物應(yīng)放在可控的氣候培養(yǎng)箱、人工氣候箱或溫室中進(jìn)行園藝操作維持正常生長(zhǎng)。采用生長(zhǎng)設(shè)備時(shí)，應(yīng)保證植物正常生長(zhǎng)，并與對(duì)照組對(duì)照；應(yīng)記錄包括條件控制和足夠頻率(如：每日)的溫度、相對(duì)濕度、二氧化碳濃度、光(照度、波長(zhǎng)、光合有效輻射)/光周期、平均灌溉量等參數(shù)，溫室溫度通過通風(fēng)、升溫和/或制冷系統(tǒng)來(lái)控制。下列條件通常為溫室試驗(yàn)的推薦條件： 溫度：(22+10)℃;——相對(duì)濕度：(70±25)%;——光周期：最少16h光照；——照度：(24850±3550)lx。如果照度降到14200lx以下，波長(zhǎng)400nm～700nm,除某些種需減少照度外，需補(bǔ)充光照。試驗(yàn)期間應(yīng)監(jiān)測(cè)和記錄環(huán)境條件。試驗(yàn)所用容器應(yīng)為無(wú)孔塑料或玻璃容器，容器下面應(yīng)墊上托盤或碟子。容器應(yīng)定期重新擺放以減少植物的生長(zhǎng)差異(因?yàn)樯L(zhǎng)設(shè)施的試驗(yàn)條件不同)。容器應(yīng)足夠大以保證正常生長(zhǎng)。為維持好的植物活力，可以添加土壤營(yíng)養(yǎng)液。通過觀察對(duì)照植物判斷添加營(yíng)養(yǎng)液的需要和時(shí)機(jī)。推薦從試驗(yàn)容器底部澆水(如：用玻璃纖維絲)。對(duì)試驗(yàn)植物種和供試品來(lái)說，特定的生長(zhǎng)條件是適合的(參見附錄D)。對(duì)照和試驗(yàn)組植物應(yīng)放置在一樣的試驗(yàn)環(huán)境條件下。然而，應(yīng)采取必要的措施防止不同處理間及對(duì)照與供試品間的交叉污染A.4.8試驗(yàn)操作A.4.8.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)同樣種類的種子種植于容器中。每個(gè)容器中種入的種子數(shù)目應(yīng)根據(jù)植物種類、容器大小和試驗(yàn)周期決定。試驗(yàn)期間給植物提供充分的生長(zhǎng)條件，避免過于擁擠。根據(jù)種子大小，最大的植株密度為93粒/100cm2~10粒/100cm2。例如，每個(gè)直徑為15cm的容器內(nèi)，可種1侏～2株玉米、大豆、西紅柿、黃瓜或甜菜；可種3株油菜或豌豆；可種5株～10株洋蔥、小麥或其他小粒種子。種子數(shù)量和重復(fù)容器(一個(gè)重復(fù)指一個(gè)容器，容器內(nèi)的植物不是重復(fù))應(yīng)足以采用理想的統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。每個(gè)重復(fù)用很少的大種子比每個(gè)重復(fù)用小種子時(shí)變異會(huì)較大，應(yīng)標(biāo)記?？梢酝ㄟ^每個(gè)容器內(nèi)同樣數(shù)量的種子降低變異。設(shè)置對(duì)照組保證觀察到的效應(yīng)與暴露的供試品有關(guān)或由供試品引起。除了不暴露于供試品外，適當(dāng)?shù)膶?duì)照組應(yīng)與試驗(yàn)組在各方面都一樣。所有被試植物包括對(duì)照均應(yīng)來(lái)自同一來(lái)源。為避免偏離，對(duì)照和試驗(yàn)組植物應(yīng)隨機(jī)分布。應(yīng)避免使用殺蟲劑或殺菌劑包被的種子(即“包衣”種子)。特殊情況下允許使用某些非內(nèi)吸性接觸殺菌劑(如：克菌丹、福美雙)。如果有種生病菌，可以把種子在5%次氯酸鹽中浸一下，然后在流水下漂洗再曬干。允許其他作物保護(hù)產(chǎn)品的非治療性處理。A.4.8.2單濃度/比率試驗(yàn)進(jìn)行單濃度試驗(yàn)(限度試驗(yàn))時(shí)，未確定適當(dāng)供試品濃度，需要考慮很多因素。對(duì)一般化學(xué)品來(lái)說，應(yīng)考慮物質(zhì)的物理/化學(xué)特性。對(duì)作物保護(hù)產(chǎn)品而言，需要考慮物理/化學(xué)特性、供試品的使用模式、最大濃度或施用比率、每個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)施用次數(shù)和/或試用品的持久性。為測(cè)定一般化學(xué)品是否有植物毒素特性，通常以1000mg/kg干土作為最大劑量。A.4.8.3預(yù)試驗(yàn)進(jìn)行正式的多濃度的劑量反應(yīng)研究前，需先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)確定劑量范圍。預(yù)試驗(yàn)的濃度間距應(yīng)較寬(如：0.1mg/kg、1.0mg/kg、10mg/kg、100mg/kg和1000mg/kg干土)。作物保護(hù)產(chǎn)品的濃度應(yīng)根據(jù)推薦或最大使用濃度或施用比率確定，如推薦/最大濃度或施用比率的1/100、1/10和1/1。A.4.8.4多濃度/比率試驗(yàn)多濃度/比率試驗(yàn)的目的是建立劑量反應(yīng)關(guān)系和測(cè)定萌芽率、生物量的EC,或ER,值和/或與未給藥的對(duì)照組比較的可觀察效應(yīng)。試驗(yàn)濃度/比率的數(shù)量和間距應(yīng)足夠產(chǎn)生可信的劑量反應(yīng)關(guān)系和回歸線性方程并能得出估計(jì)的EC,或ER,值。所選濃度數(shù)量至少五個(gè)幾何級(jí)數(shù)并加上對(duì)照，相鄰的兩個(gè)濃度梯度不應(yīng)超過3個(gè)幾何級(jí)。每個(gè)處理和對(duì)照均至少有四個(gè)平行，總的種子數(shù)應(yīng)至少20粒。對(duì)某些萌芽率低的植物或多樣化的生長(zhǎng)特征的植物，增加平行數(shù)提高統(tǒng)計(jì)效力。A.4.8.5觀察在觀察期內(nèi)，即對(duì)照(溶劑對(duì)照)出苗率達(dá)到50%后的14d～21d內(nèi)，定期(至少1周，若可能每日)觀察植物是否出苗和可見的植物中毒死亡。在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，記錄出苗率、存活植物的生物量和植物不同部位可見的毒害效應(yīng)。后者包括已出幼苗形態(tài)上的異常、生長(zhǎng)遲緩、枯萎、變色、死亡和植物發(fā)育上的影響。最終生物量通過測(cè)定最終存活植株的平均苗干重完成，收割土壤表面以上的植株，在60℃烘干至恒定的質(zhì)量。也可選擇以鮮重作為最終生物量。如有特殊要求，苗高可作為另一個(gè)重點(diǎn)指標(biāo)?？捎靡粋€(gè)統(tǒng)一的評(píng)分系統(tǒng)對(duì)可見的傷害進(jìn)行評(píng)分來(lái)評(píng)價(jià)可觀察的毒性反應(yīng)。A.5質(zhì)量控制為保證試驗(yàn)的有效性，對(duì)照應(yīng)符合下列形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)：——出苗率至少70%;——幼苗沒有可見的植物毒素影響(如：變色病、壞死病、枯萎、葉子和莖的畸形),個(gè)別種類的植株在生長(zhǎng)和形態(tài)上只有正常變異；——試驗(yàn)期間，對(duì)照組幼苗平均存活率應(yīng)高于90%;——特定種類的環(huán)境條件應(yīng)一樣，生長(zhǎng)介質(zhì)包含等量的人工土壤基質(zhì)、支持介質(zhì)或同樣來(lái)源的物質(zhì)。A.6數(shù)據(jù)和報(bào)告A.6.1數(shù)據(jù)處理A.6.1.1單濃度/比率試驗(yàn)每個(gè)植物種的數(shù)據(jù)都應(yīng)用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行分析。報(bào)告試驗(yàn)濃度/比率產(chǎn)生的效應(yīng)水平，或試驗(yàn)濃度/比率下未見效應(yīng)(如在y濃度或比率觀察的效應(yīng)<x%)。A.6.1.2多濃度/比率試驗(yàn)根據(jù)回歸方程劑量-反應(yīng)關(guān)系，可用不同的模型，如：出苗率等計(jì)數(shù)型數(shù)據(jù)EC,或ER(如：EC25、ER?5、EC或ERs)和置信限的估算可用邏輯回歸法、概率法、韋博法、寇氏法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；幼苗生長(zhǎng)(質(zhì)量和高度)等連續(xù)型終點(diǎn)指標(biāo)EC,或ER,和可信限的估算可用適當(dāng)?shù)幕貧w分析(如：Bruce-Versteeg非線性回歸分析)。如果可能，R2值為0.7或再高些，對(duì)多數(shù)敏感種來(lái)說，所設(shè)濃度/比率包含20%和80%效應(yīng)。如果要求NOEC,要求有更強(qiáng)大的分析性試驗(yàn)，并且要在數(shù)據(jù)分布基礎(chǔ)上選擇。A.6.2試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括試驗(yàn)結(jié)果、試驗(yàn)條件的詳細(xì)描述、結(jié)果的全面討論、數(shù)據(jù)的分析和結(jié)果分析。提供結(jié)果圖表和摘要。通常包括下列內(nèi)容：a)供試品：——化學(xué)鑒定數(shù)據(jù)，相關(guān)物質(zhì)特性(如可能，正辛醇/水的分配系數(shù)lgPow、水溶解度、蒸汽壓、環(huán)境歸宿和行為的信息);——試驗(yàn)溶液的制備細(xì)節(jié)和試驗(yàn)濃度的驗(yàn)證。b)試驗(yàn)植物種：——試驗(yàn)生物的詳細(xì)資料：種/亞種、所屬植物科、學(xué)名和通用名、盡可能詳細(xì)的來(lái)源和歷史(即：提供者的名稱、萌芽率、種子尺寸級(jí)別、批號(hào)、產(chǎn)種年或選擇的生長(zhǎng)季節(jié)、萌芽期等——所試驗(yàn)的單子葉和雙子葉種的數(shù)量；——選擇此種的理由；——種子貯存、處理和維護(hù)的描述。c)試驗(yàn)條件：——試驗(yàn)設(shè)施(如：生長(zhǎng)箱、人工氣候箱和室溫);——試驗(yàn)系統(tǒng)的描述(如：容器直徑、容器材料和土壤量);——土壤特性(土壤質(zhì)地或類型：土壤顆粒分布和分級(jí)、物理化學(xué)特征，包括有機(jī)物含量、有機(jī)碳含量和pH值);——試驗(yàn)前土壤/基質(zhì)(如：土壤、人工土壤、沙子和其他)的制備；——若用營(yíng)養(yǎng)液，配方描述；——供試品的施用：施用方法、設(shè)備、暴露承載量和體積(包括化學(xué)驗(yàn)證、校準(zhǔn)方法)、施藥期間環(huán)境條件的描述；——每個(gè)容器內(nèi)的種子數(shù)量、每個(gè)劑量植株數(shù)、每個(gè)暴露率的重復(fù)數(shù)；——對(duì)照的類型和數(shù)量(陰性對(duì)照和/或陽(yáng)性對(duì)照、溶劑對(duì)照);——試驗(yàn)周期。d)結(jié)果：——每個(gè)重復(fù)、試驗(yàn)濃度/比率和種子的所有終點(diǎn)數(shù)據(jù)表；——與對(duì)照比較的萌芽數(shù)量和萌芽率；——植株生物量(植株干重或鮮重)測(cè)定值與對(duì)照比率；——若測(cè)量，植株高度與對(duì)照的比率；——與對(duì)照比較的由供試品引發(fā)的可見的傷害率和可見的定性定量描述(黃化、壞死、枯萎、葉和莖的畸形和缺乏癥);——如果提供可見傷害評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，判斷可見傷害描述；——對(duì)于單劑量試驗(yàn)，應(yīng)報(bào)告?zhèn)β剩弧狤C,或ER(如：EC?、ER?、EC?5、ER?s)值和相關(guān)置信限，如果有回歸分析，提供回歸方——統(tǒng)計(jì)過程和假設(shè)檢驗(yàn)的描述；——數(shù)據(jù)表和試驗(yàn)種的劑量-反應(yīng)關(guān)系圖。試驗(yàn)過程中與方法的偏離和試驗(yàn)中不可預(yù)見的情況的描述。(規(guī)范性附錄)電感耦合等離子體發(fā)射光譜法警示——本附錄中所用的鹽酸具有腐蝕性，硝酸具有腐蝕性和氧化性，試驗(yàn)人員應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)防護(hù)。本附錄并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國(guó)家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。B.1方法提要試樣中的總鎳、總鈷、總釩、總銻、總鉈用王水消化提取，電感耦合等離子體發(fā)射光譜法進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)存在錳及其他元素干擾測(cè)定時(shí)，總鉈的測(cè)定采用王水溶樣，甲基異丁基甲酮萃取富集后，將萃取液蒸干，殘?jiān)孟跛嵯猓秒姼旭詈系入x子體發(fā)射光譜法進(jìn)行測(cè)定。B.2試劑B.2.4鹽酸溶液：1+1。B.2.5碘化鉀-抗壞血酸溶液：稱取30g碘化鉀和20g抗壞血酸于燒杯中，加水溶解，轉(zhuǎn)移至100mLB.2.6甲基異丁基甲酮：分析純。B.2.8高純氬氣：含量≥99.999%。B.3儀器和材料B.3.1通常實(shí)驗(yàn)室用儀器。B.3.2電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀。B.3.3試驗(yàn)篩，孔徑為0.50mm。B.4試驗(yàn)方法B.4.1試樣制備研磨實(shí)驗(yàn)室樣品，直至樣品顆粒均小于0.50mm,混勻，置于潔凈、干燥的瓶中。B.4.2試樣溶液的制備稱取試樣0.5g～5g(精確至0.0001g)于100mL燒杯中，用少量水潤(rùn)濕，加入15mL鹽酸和5mL硝酸，蓋上表面皿，在低溫電熱板上加熱至沸，保持微沸15min,稍微移開表面皿繼續(xù)加熱，使酸全部蒸發(fā)至近干涸，以趕盡硝酸。冷卻后加入20mL鹽酸溶液(B.2.4),加熱溶解，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)移至B.4.2.2總鉈試樣溶液的制備稱取試樣5g(精確至0.0001g)于100mL燒杯中，用少量水潤(rùn)濕，加入15mL鹽酸和5mL硝酸，蓋上表面皿，在低溫電熱板上加熱至沸，保持微沸15min,若試料溶解清亮無(wú)殘?jiān)?，按a)進(jìn)行；若試料不a)稍微移開表面皿繼續(xù)加熱，使酸蒸發(fā)至近干涸。稍冷后加入5mL鹽酸溶液(B.2.4),并加熱使殘?jiān)芙?。冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至25mL比色管中，控制溶液體積約15mL。加入3mL碘化鉀-抗壞血酸溶液，搖勻，加入5mL甲基異丁基甲酮，振蕩萃取2min,靜置15min后，用滴管小心取出大部分有機(jī)相置于50mL燒杯中，按照同樣操作各加入4mL甲基異丁基甲酮繼續(xù)萃取2次，合并有機(jī)相，將燒杯置于沸水浴上蒸干。向燒杯中加入5mL硝酸，在電熱板上加熱消解并蒸發(fā)至溶液體積小于1mL(溶液不能蒸干),冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，b)稍微移開表面皿繼續(xù)加熱，待溶液約為10mL時(shí)，取下，冷卻，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，定容，混勻，干過濾，棄去前10mL濾液。準(zhǔn)確移取20mL濾液于50mL比色管中，加入3mL碘化鉀-抗壞血酸溶液，搖勻，加入5mL甲基異丁基甲酮，振蕩萃取2min,靜置15min后，用滴管小心取出大部分有機(jī)相置于50mL燒杯中，按照同樣操作各加入4mL甲基異丁基甲酮繼續(xù)萃取2次，合并有機(jī)相，將燒杯置于沸水浴上蒸干。向燒杯中加入5mL硝酸，在電熱板上加熱消解并蒸發(fā)至溶液體積小于1mL(溶液不能蒸干),冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，B.4.3空白溶液的制備除不加試樣外，其他步驟同試樣溶液的制備。B.4.4工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制取適量各元素的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，經(jīng)逐級(jí)稀釋并用10%硝酸溶液(B.2.2)定容，按表B.1配制混合離子標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。表B.1混合離子標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度單位為微克每毫升元素鎳鈷釩銻鉈標(biāo)1標(biāo)4B.5測(cè)定做兩份試料的平行測(cè)定。進(jìn)行測(cè)定前，根據(jù)待測(cè)元素性質(zhì)，參照儀器操作說明書，進(jìn)行最佳工作條件選擇。在選定的儀器工GB38400—2019作條件下，按照濃度由低至高依次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同樣條件下測(cè)量空白溶液、樣品溶液。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，儀器給出樣品溶液中待測(cè)元素的濃度值。B.6分析結(jié)果的表述各元素含量w?,單位為毫克每千克(mg/kg),按式(B.1)計(jì)算：…………(B.1)式中：p——試樣溶液中被測(cè)元素質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為微克每毫升(μg/mL);p?——空白溶液中被測(cè)元素質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為微克每毫升(μg/mL);V——測(cè)定時(shí)試樣溶液體積的數(shù)值，單位為毫升(mL);D——測(cè)定時(shí)試樣溶液稀釋倍數(shù)的數(shù)值；m——試料質(zhì)量的數(shù)值，單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位，取平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為測(cè)定結(jié)果。B.7允許差平行測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差不大于30%。不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差不大于50%。B.8檢出限鎳(Ni):0.03mg/kg。鈷(Co):0.03mg/kg。釩(V):0.002mg/kg。銻(Sb):0.06mg/kg。鉈(Tl):采用B.4.2.2a)步驟時(shí)，為0.01mg/kg;采用B.4.2.2b)步驟時(shí)，為0.03mg/kg。(資料性附錄)植物測(cè)試試驗(yàn)用物種表C.1給出了植物測(cè)試試驗(yàn)用物種。表C.1植物測(cè)試試驗(yàn)用物種科名學(xué)名推薦物種雙子葉植物亞綱傘形科Apiaceae(Umbelliferae)Daucuscarota胡蘿卜菊科Asteraceae(Compositae)Helianthusannuus向日葵菊科Asteraceae(Compositae)Lactucasativa萵苣十字花科Brassicaceae(Cruciferae)Sinapisalba白芥十字花科Brassicaceae(Cruciferae)大白菜十字花科Brassicaceae(Cruciferae)Brassicanappus油菜十字花科Brassicaceae(Cruciferae)Brassicaoleraceavar.capitata卷心菜十字花科Brassicaceae(Cruciferae)Brassicarapa蕪菁十字花科Brassicaceae(Cruciferae)Lepidiumsativum小白菜十字花科Brassicaceae(Cruciferae)Raphanussativus小蘿卜藜科ChenopodiaceaeBetavulgaris甜菜葫蘆科Cucur