第第頁液相色譜柱壓上升原因液相色譜技術(shù)指標色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透性，延長柱子的使用壽命特別緊要。色譜柱壓上升一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì)，造成流體阻力加大所致。淺析其原因，大致有以

色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透性，延長柱子的使用壽命特別緊要。色譜柱壓上升一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì)，造成流體阻力加大所致。淺析其原因，大致有以下幾方面：

1、流動相的前處理雜質(zhì)堵塞色譜柱進口濾片，導致壓力上升。這往往是由于流動相沒有過濾，或雖已過濾但過濾不徹底，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所造成的。

2、樣品的沉淀當溶解樣品的溶劑與流動相不一致時，樣品進入色譜柱，有時可能因溶解度降低而沉淀出來，造成壓力上升。

3、晶體的析出使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出，造成流體阻力加大、壓力上升。

4、細菌或霉菌孳生霉菌在流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長堵塞濾板，導致壓力上升。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。

5、溶質(zhì)吸附當溶質(zhì)在柱子上有較強的吸附，且所用的流動相難以將它們洗脫時，累積的未洗脫溶質(zhì)也會造成阻力增大和壓力上升。

6、流動相更換過度較快當更改流動相體系時，不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力上升。

7、壓力脈沖運行過程中，有時會產(chǎn)生系統(tǒng)內(nèi)壓力的驀地升降。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力上升。

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液相色譜柱填裝程序

液相色譜柱、特別是高效液相色譜柱的填裝，需要有較高的技巧和嫻熟的技能。因此，有人甚至將“裝柱”看作是“藝術(shù)加技術(shù)”。但是，只要把握了一些基本的規(guī)律和方法，任何試驗室都可以填裝出具有較高柱性能的色譜柱。當然，目前大多數(shù)試驗室多是購買商品預(yù)填裝柱來充分分別、分析之需。但是在一些有特別需要的情況下，或為節(jié)省經(jīng)費，在試驗室中自行填裝高效液相色譜柱還是可取的。

液相色譜柱填裝程序中應(yīng)當注意的問題：

①高壓操作的安全問題。常發(fā)生的問題是柱子與勻漿罐連接不牢，造成加壓時柱頭被高壓沖下或柱子從勻漿罐上滑脫。此時，輕則填裝失敗，材料損失，重則造成人身損害事故，確定要加以防范。除每次填裝前均須認真確認是否連接正確且牢靠外，可以還可加上由法蘭盤和長螺桿構(gòu)成的防備脫落裝置，以防萬一、

②通常，先填裝的柱床較后填裝的柱床緊密。因此，當使用時宜以相反的方向為宜，即讓近勻漿罐一端作為使用時流動相的出口，而填裝時的出口端則作為流動相的