高級食品檢驗工復(fù)習(xí)題第6頁共9頁附件一實驗室基本常識實驗室工作是科學(xué)實踐的重要手段之一。只有嚴(yán)肅認(rèn)真地進(jìn)行實驗，才能獲得可靠的結(jié)果，并從中引出反映客觀實際的規(guī)律來。隨隨便便、粗心大意是做不出正確的實驗結(jié)果的。因此，必須養(yǎng)成良好的實驗室工作習(xí)慣。下面的問題希望引起注意。1：挪動干凈玻璃儀器時，勿使手指接觸儀器內(nèi)壁。拿吸管時切勿用手觸及其尖端需放入液體中的部位。2：洗凈的儀器要放在架上或干凈紗布上晾干，不能用抹布擦拭，更不能用抹布擦拭儀器的內(nèi)壁。吸管、攪拌等用后要放在架上或底部墊有干凈紗布的燒杯內(nèi)，切勿亂放在實驗臺上，實驗臺要保持清潔整齊。3：量瓶是量器，不要用作盛器。4：量瓶等帶有磨口玻璃塞的儀器塞子，不要蓋錯。洗滌時塞子和儀器本身要放在一起，以免弄混。不用時要用紙條把塞子和瓶口隔開。抹過凡士林的磨口玻塞要用有機(jī)溶劑將凡士林洗凈后，再用紙條隔開放置。5：不要用濾紙稱量藥品，也不要用濾紙作記錄。6：不要用石蠟封閉精細(xì)藥品的瓶口，以免摻混。7：標(biāo)簽紙的大小應(yīng)與容器相稱，貼在試劑瓶或燒杯的上2/3處，試管等則貼在上部。標(biāo)簽上應(yīng)寫明物質(zhì)的名稱、規(guī)格和濃度、配制的日期和配制人。8：標(biāo)準(zhǔn)試劑烘干后，應(yīng)以稱量瓶放在干燥器中。稱取后立即放回干燥器備用。9：取用試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液后，需立即將試劑瓶塞嚴(yán)，放回原處。取出的試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液如未用盡，切勿倒回瓶內(nèi)，以免摻混。取標(biāo)準(zhǔn)溶液時，應(yīng)根據(jù)需要倒出一定量于干凈燒杯內(nèi)，再用移液管由燒杯中量取。不能用移液管直接由試劑瓶量取。10：凡是發(fā)生煙霧、有毒氣體和有臭味氣體的實驗，均應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。櫥門應(yīng)關(guān)閉，非必要時不能打開。11：用動物進(jìn)行實驗時，在殺死或解剖等操作中，必須按照規(guī)定方法進(jìn)行。不許戲弄動物，絕對不能用動物、手術(shù)器械開玩笑。12：在實驗室工作時要緊張嚴(yán)肅。不許談天說笑，更不許大聲喧嘩或互相打鬧。實驗室的藥品器材，未經(jīng)允許不得帶出實驗室。13：在實驗過程中，要將實驗的結(jié)果及時如實地記錄下來，數(shù)據(jù)要記在一定的記錄本中，不要隨便記在紙條上，以免丟失。需要拍照的及時拍照。記錄不能隨意涂改。14：要愛護(hù)儀器和節(jié)省藥品。貴重儀器在使用前應(yīng)熟知使用方法。使用時，要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。發(fā)生故障時，應(yīng)立即停止儀器的運(yùn)轉(zhuǎn)，告知管理人員。切勿擅自拆修。使用后應(yīng)按規(guī)定登記。

實驗基本操作一：容量瓶

凡要求準(zhǔn)確配制一定濃度的溶液時必須使用容量瓶。容量瓶的容量有大有小，均在瓶上標(biāo)出（如50ml、500ml等）。瓶頸上有一刻度線，表示當(dāng)液體加到此刻度時就相當(dāng)于瓶上所標(biāo)容量。瓶上并標(biāo)有溫度，通常為20℃，表示瓶上所標(biāo)容量是在20℃時的容量。室溫不在配制溶液時，先將溶質(zhì)在燒杯中用少量溶劑溶解，再把溶液沿玻璃棒引入容量瓶；用少量溶劑沖液燒杯后倒入容量瓶，最后再添加溶劑到刻度線。加溶劑時在接近刻度線前，應(yīng)改用滴管吸取溶劑添加，以免超過刻度線。裝透明溶液時應(yīng)使液體凹面下線與瓶上刻度線重疊；非透明溶液則應(yīng)使液體凹面上線與刻度線重疊?；靹驎r，一手握瓶頸并按住瓶塞；一手托瓶底，反復(fù)顛倒、搖動數(shù)次。為了保證容量瓶的準(zhǔn)確度，容量瓶中所裝溶液溫度應(yīng)在20℃二：吸量管

是精密的卸量容器。實驗室常用的分三種：1：刻度吸管

這類吸管的管壁上刻印有多個刻度?？潭确譃榭痰郊舛说募翱潭炔坏郊舛说?；刻度讀數(shù)有從上而下及從下而上的，用前必須分清楚。用刻度吸量管量取液體時，若使用刻度不到尖端的，只要小心將液體放至下端最后刻度處即可。若使用刻度到尖端的吸管則要注意使用規(guī)則。北京等地生產(chǎn)的吸管規(guī)定：1ml（包括1ml）以上的刻度管，在放出液體后，尖端遺留的液體不應(yīng)吹出，只要使管尖緊靠容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動幾秒鐘即可；1ml以下（不包括1ml）的刻度管則必須把尖端遺留的液體吹入容器內(nèi)。這類管上一般都印有“吹”字。若遇不明是否該吹的吸管，可作校正后（其校正法見附錄）再行使用，以免產(chǎn)生錯誤。2：移液管

此類管中部有一圓柱狀空泡，只有一個刻度。由于卸出量已經(jīng)固定，所以準(zhǔn)確性比刻度吸管大。使用時，將所量取的液體慢慢放出，尖端所余少量液體不應(yīng)吹出，只須在最后將管尖觸及容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動幾秒鐘即可。這類管主要作量卸液體之用。3：奧氏（Ostwald）吸管

這是一類特殊吸管。管下端有一卵形空泡，上端有一容量刻度。量取液體時，當(dāng)所量取的液體自行流出后，必須將遺留在管尖內(nèi)的少量液體吹入容器內(nèi)。該管的特點是每單位容器所占管壁的⑼換上待測溶液，輕輕晃動幾次，以便電極與溶液接觸均勻。待測液的溫度應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)溶液一致。⑽撳下“讀數(shù)開關(guān)”，指針?biāo)傅臄?shù)值即為待測溶液的PH。重復(fù)此操作幾次直至讀數(shù)不變?yōu)橹埂＂蠝y畢。將電極洗凈，玻璃電極浸泡入蒸餾水中保存?zhèn)溆?；甘汞電極套上皮帽放入電極盒。⑿關(guān)閉電源。4：注意事項⑴玻璃電極初次使用前，必須在蒸餾水中浸泡24h以上。用后浸泡于蒸餾水中以供隨時可用。⑵玻璃電極易損壞。使用時避免碰撞或用力推擦。玻璃電極不應(yīng)與強(qiáng)酸、堿接觸太久，應(yīng)盡快操作，用畢迅速以水洗凈。⑶甘汞電極內(nèi)KCL溶液應(yīng)保持飽和狀態(tài)（即有少許結(jié)晶出現(xiàn)），液柱要接觸電極絲。每次用后要及時套上兩個皮帽，以免揮發(fā)干使用時不能在水中浸泡時間過長，以防KCL稀釋。實驗的準(zhǔn)確度與精密度

在生物化學(xué)分析工作中，無論怎樣謹(jǐn)慎地操作，測定結(jié)果總會產(chǎn)生誤差，因此，掌握精確度與精密度實驗，是進(jìn)行分析工作的基礎(chǔ)。一：實驗誤差

在實際的分析工作中，由于儀器的性能，實驗的技巧以及化學(xué)反應(yīng)是否完全等原因，使測得的結(jié)果往往不是客觀的真實值，只能是與真實值接近，所以稱測得值為近似值。測得的近似值與真實值之間的差別稱為誤差。近似值比真實值大時誤差為正，比真實值小時誤差為負(fù)。表示誤差的方法有絕對誤差和相對誤差。1：絕對誤差

測得值與真實值的差值稱為絕對誤差。以A表示真實值，a表示近似值，r表示絕對誤差，則

r=a-A如，滴定讀數(shù)為20.24ml，而其真實體積為20.23ml，則絕對誤差為：r=20.24-20.23=+0.01ml；而另一滴定讀數(shù)為2.033ml，其真實體積為2.023ml，其絕對誤差為：r=2.033-2.023=+0.01ml。兩份測定的絕對誤差均為0.01，但兩份測定的體積相差10倍，可見r不能反映問題的全面，因此有另一種表示誤差的方式。2：相對誤差

絕對誤差占真實值的百分?jǐn)?shù)為相對誤差。相對誤差用R表示，即：R（%）=(a-A

)

/A

×100=

r/A×100如上例滴定讀數(shù)的相對誤差為：0.05%；0.5%。由此可見，兩份滴定讀數(shù)的絕對誤差雖然相等，但當(dāng)用相對誤差表示時，第一份滴定比第二份滴定的準(zhǔn)確度大10倍。顯然，當(dāng)被測定的量較大時，R就越小，測定的準(zhǔn)確度也就越高。所以應(yīng)該用相對誤差來表示分析結(jié)果的準(zhǔn)確度。二：系統(tǒng)誤差與回收率實驗根據(jù)誤差產(chǎn)生的原因和性質(zhì)，可分為系統(tǒng)誤差和偶然誤差。1：系統(tǒng)誤差

系統(tǒng)誤差是由分析過程中經(jīng)常性的原因造成的，在每次測定中都比較穩(wěn)定的重復(fù)出現(xiàn)，它與分析結(jié)果的準(zhǔn)確度有關(guān)，主要產(chǎn)生的原因有：⑴方法誤差

由于分析方法本身所造成的，如容量分析中等當(dāng)點與滴定終點不完全符合等。⑵儀器誤差

由于儀器不夠精密，或未進(jìn)行校正所造成的。⑶試劑誤差

試劑或蒸餾水不純。⑷操作誤差

每個人對實驗條件控制不同而造成，如不同操作者對滴定終點顏色變化的判斷不同等。同時在操作中尚存在一些不可避免的損耗及污染，如奧氏吸管，用的再精心，也免不了有少量的樣品沾壁而損耗，用濾紙濾過也是如此。由于上述種種原因引起的系統(tǒng)誤差，其特點是無論重復(fù)做多少次試驗，都是經(jīng)常反復(fù)出現(xiàn)，同真實數(shù)值之間的差距是比較一定的，并有相同的符號，（+）或（-）。為了檢驗系統(tǒng)誤差的大小，衡量測定的準(zhǔn)確度，常用回收率實驗來表達(dá)。2：回收率實驗

回收率實驗是在要測定的溶液中添加已知量的標(biāo)準(zhǔn)被測物，與待測的未知樣品同時做平行測定，測得的添加標(biāo)準(zhǔn)物量與所添加的標(biāo)準(zhǔn)物量之比的百分率就稱為回收率。回收率（%）=(（樣品+標(biāo)準(zhǔn)物）測定值-樣品測定值

)

/添加標(biāo)準(zhǔn)物量×100系統(tǒng)誤差越大，回收率越低；回收率越接近100%，系統(tǒng)誤差越小。由于系統(tǒng)誤差對分析結(jié)果的影響比較穩(wěn)定，重復(fù)測定可以重復(fù)出現(xiàn)，因而可以設(shè)法減少或校正。3：系統(tǒng)誤差的減免或校正

為了減免系統(tǒng)誤差常采用下列措施：⑴儀器的校正

對所用的測量儀器（如砝碼、容量儀器）進(jìn)行校正，以減少誤差。⑵做空白實驗

由于試劑中含有影響測定結(jié)果的雜質(zhì)或侵蝕器皿等而發(fā)生誤差，可用空白實驗來校正。其方法是用空白樣品（即不含被測物的試劑溶液）與被測樣品在完全相同的條件下進(jìn)行測定，最后將被測樣品所得的測定值，減去空白實驗的測得值，可以得到比較準(zhǔn)確的結(jié)果。⑶用回收率實驗對測得值進(jìn)行校正，按上述方法求出回收率之后，對測得值可用下式進(jìn)行校正：被測樣品的實際含量=樣品的分析結(jié)果（含量）

回收率應(yīng)該指出，由于真實值是無法知道的，因此在實際工作中無法求出真正的準(zhǔn)確度，只得用精密度來評價分析的結(jié)果。

三：偶然誤差與精密度1：偶然誤差

偶然誤差是指在某項測定中由于偶然的一些因素引起的誤差，這些因素時隱時現(xiàn)，如儀器的臨時故障，天平兩側(cè)溫度不一，電壓不穩(wěn)定，取樣不均勻等，另外，操作者不小心也是產(chǎn)生偶然誤差的原因，如吸量血液后管外擦的不凈，或放出的速度不均勻等，偶然誤差的大小通常用精密度來衡量。2：精密度

精密度是指對同一樣品在同一條件下多次測定結(jié)果之間接近的程度。同一樣品的一系列測值越是接近，精密度越高，表明偶然誤差越小。若測定高低不一，表明偶然誤差很大，精密度很低。精密度一般用偏差來表示。偏差也分為絕對偏差和相對偏差：絕對偏差=個別測定值-測定值的算術(shù)平均值（不計正負(fù)號）相對偏差（%）=絕對偏差

/

算術(shù)平均值

×100精密度的表示方法和誤差的表示方法一樣，用相對偏差表示比絕對偏差更有意義。在實驗中，對某一樣品通常須進(jìn)行多次平行測定，求得其算術(shù)平均值，作為該樣品的分析結(jié)果。對于該結(jié)果的精密度則有多種表示方法。⑴平均絕對偏差和平均相對偏差的表示法：如

一份血樣共作4次血氯測定，其結(jié)果如下：

測定結(jié)果（t）

算術(shù)平均值

個別測值的絕對偏差（d）

566mg%

9mg%

584mg%

575mg%

9mg%

570mg%

5mg%

580mg%

5mg%

平均絕對偏差（d）=9+9+5+5

/

4=7mg%平均相對偏差=7

/

575=1.2%在實驗中，有時只做兩次測定，精確度可用下式計算：

兩次分析結(jié)果的差值

/

平均值

×100%不同的實驗方法，允許誤差的要求不相同。如用滴定法對同一樣品進(jìn)行平行測定時，其各測值之間的允許誤差不應(yīng)超過0.2%。⑵標(biāo)準(zhǔn)偏差或均方根偏差：利用絕對偏差（d）和測定次數(shù)（n）可計算出標(biāo)準(zhǔn)偏差（S.D）：

S.D=±√Σd2

n-1

標(biāo)準(zhǔn)偏差表示所測定的這些樣品中待測物的含量變化范圍。這是從生物統(tǒng)計推導(dǎo)來的一種精密度表示法，標(biāo)準(zhǔn)偏差越小表示樣品中各個測值的變異度（集中或分散的程度）越小。表示越精確。其結(jié)果可以用平均值（x）±標(biāo)準(zhǔn)偏差（S.D）來表示。3：偶然誤差的減免及校正

偶然誤差與分析結(jié)果的精密度有關(guān)，它來源于難以預(yù)料和不固定的因素。或是由于取樣不均勻，或是由于測定過程中某些不易控制的外界因素的影響等。在生物測定法中，由于影響生物的因素是多方面的，往往還會造成較大的誤差。為了減少偶然誤差，一般采取的措施是：⑴均勻取樣

動、植物新鮮組織可制成勻漿后取樣；細(xì)菌通常制成懸液，經(jīng)玻璃球打散搖勻后，再量取一定體積的菌體樣品進(jìn)行分析；固體樣品極不均勻，應(yīng)于取樣前先進(jìn)行粉碎、混勻。⑵多次取樣

根據(jù)偶然誤差出現(xiàn)的規(guī)律，如果進(jìn)行多次平行測定，然后取其算術(shù)平均值，就可以減少偶然誤差。平行測定的次數(shù)愈多，其平均偶然誤差就愈少。關(guān)于上述的系統(tǒng)誤差，偶然誤差及準(zhǔn)確度和精密度的問題，有幾個問題再進(jìn)一步說明。1：除系統(tǒng)誤差、偶然誤差之外，還有因錯誤操作引起的“過失誤差”，如讀錯刻度、溶液濺出，加錯試劑等。這時可能出現(xiàn)一個很大的誤差值，此種數(shù)值應(yīng)棄去不用。2：誤差與偏差具有不同的含義，誤差以真實值為標(biāo)準(zhǔn)，而偏差是以平均值為標(biāo)準(zhǔn)。由于物質(zhì)的真實值一般是無法知道的，所以我們平時所說的真實值實際上只是采用了各種方法進(jìn)行多次平行分析所得到的相對正確的平均值。用這一平均值代替真實值來計算誤