自體富血小板血漿制備技術(shù)人員要求、條件要求、質(zhì)量要求、方法等要點PRP采集制備人員要求人員是開展自體PRP采集制備的基礎(chǔ)與核心，是保證PRP制備質(zhì)量保證的先決條件。根據(jù)PRP采集制備過程的需要，推薦配備醫(yī)療、醫(yī)技和護理三類人員。

2.1人員職責(zé)1)醫(yī)師：負(fù)責(zé)自體血小板采集過程中患者發(fā)生不良反應(yīng)的防范和處置；2)醫(yī)技人員：負(fù)責(zé)PRP的分離、制備、相關(guān)檢驗和制品質(zhì)量控制；3)護士：負(fù)責(zé)配合醫(yī)師在自體血小扳采集過程中防范和處置不良反應(yīng)的發(fā)生。

2.2人員條件2.2.1醫(yī)師應(yīng)具備的基本條件1）具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格證，有一定的臨床工作經(jīng)驗;2)通過在開展此項新技術(shù)時間>2年、并在有一定技術(shù)積累和培訓(xùn)能力的三甲醫(yī)院做過3~6個月的PRP技術(shù)專項進修且取得進修證書，熟悉PRP采集、制備的基礎(chǔ)理論知識和相關(guān)操作流程；3)熟悉常見獻(xiàn)血不良反應(yīng)的類型、臨床表現(xiàn)，具備PRP采集過程中患者發(fā)生不良反應(yīng)的處置能力。2.2.2醫(yī)技人員應(yīng)具備的基本條件

1)具備臨床醫(yī)學(xué)檢驗或輸血技術(shù)上崗資格證；2)通過在開展此項新技術(shù)時間>2年、并在有一定技術(shù)積累和培訓(xùn)能力的三甲醫(yī)院做過3-6個月的PRP技術(shù)專項進修且取得進修證書，熟悉常規(guī)血液檢驗理論知識和技術(shù)操作；3)熟悉血小板相關(guān)的基礎(chǔ)理論和相關(guān)檢驗儀器的技術(shù)操作；4)掌握PRP制備理論和技術(shù)。

2.2.3護士應(yīng)具備的基本條件

1)具有臨床護理上崗資格證；2)熟練掌握靜脈采血技術(shù)；3)熟練掌握并嚴(yán)格按無菌技術(shù)規(guī)范操作；4)通過在開展此項新技術(shù)時間>2年、并在有一定技術(shù)積累和培訓(xùn)能力的三甲醫(yī)院做過3~6個月的PRP單采技術(shù)進修且取得進修證書，熟悉常見獻(xiàn)血不良反應(yīng)的類型、臨床表現(xiàn)，具有配合醫(yī)師處置PRP采集過程中患者發(fā)生不良反應(yīng)的處置能力；5)熟悉并嚴(yán)格執(zhí)行一次性醫(yī)療用品的使用管理規(guī)定。PRP采集制備設(shè)備條件要求PRP采集制備過程，設(shè)備是關(guān)鍵要素，是制品質(zhì)量保證的基礎(chǔ)。開展PRP采集制備時，宜根據(jù)各自輸血科的實際情況，選擇合適品牌、型號的PRP采集制備設(shè)備，以達(dá)成所制備的PRP的質(zhì)量、安全和高效之目的。

3.1推薦選配設(shè)備種類3.1.1通用設(shè)備

1)普通離心機：用于處理血樣品和PRP濃度調(diào)整時的離心分離；推薦采購帶溫控調(diào)節(jié)的離心機，以保證離心室的溫度相對穩(wěn)定。2)血細(xì)胞分析儀：用于患者的基礎(chǔ)血常規(guī)檢測及PRP制備過程中和終產(chǎn)品血小板的濃度測定，以確保PRP制品濃度滿足治療的需求。3)血小板振蕩保存箱：用于PRP制品的臨時儲存。4)超低溫冰箱：推薦采用-80℃：超低溫冰箱，用于PRP制品的儲存。5)生物安全柜或超凈工作臺：有條件時優(yōu)先推薦采用生物安全柜，條件有限時采用超凈工作臺，用于PRP制備過程中提供局部環(huán)境的生物安全和實施無菌操作技術(shù)。3.1.2其他設(shè)備

1)全自動血液成分分離機：用于單采患者的自體PRP。2)專用離心機：用于專用套裝制備PRP時的配備。3)大容量低溫離心機：用于以專用血袋采集全血制備PRP時的溫度調(diào)控。4)全血成分分離機或分漿夾：用于全血離心后的PRP的分離制備。5)熱合機：用于血袋連接管的熱合、離斷。6)無菌接駁機：用于血袋連接管的接駁。

7)專用采血椅：用于自體PRP單采或全血采集時的患者使用。8)酒精燈：用于PRP制備過程中必要時配合無菌操作。

3.2設(shè)備管理基本要求3.2.1常規(guī)管理1)建立設(shè)備日常維護管理制度并指定專人負(fù)責(zé)檢查落實。2)建立儀器設(shè)備管理檔案。3)建立設(shè)備接收驗收及人員培訓(xùn)制度，人員在操作培訓(xùn)合格后上崗。4)建立設(shè)備日常使用、維護保養(yǎng)、維修檢修等制度，在專用（人）登記本上做好記錄。3.2.2強檢管理屬于強檢的設(shè)備，須按規(guī)定定期檢定，確保設(shè)備處于正常狀態(tài)。3.2.3建立標(biāo)準(zhǔn)操作流程必須按流程規(guī)定實施操作。PRP采集制備的材料及其質(zhì)量要求4.1質(zhì)量要求1)PRP是噴灑/涂布在人體創(chuàng)面或注射到人體組織中的血液制品，為最大限度地保證患者的安全，采集、分離制備PRP所用衛(wèi)生材料的質(zhì)量要求按照“就高不就低”的原則，推薦選用滿足國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA)三類醫(yī)療器械管理規(guī)定要求的合格衛(wèi)生材料。2)PRP采集、制備過程中還需用到的藥物、試劑和輔助材料亦應(yīng)滿足相應(yīng)的質(zhì)量要求。4.2材料配備PRP制備所涉及的材料包括血液采集、PRP制備過程中所涉及的耗材與藥品、試劑和消毒劑等。

4.2.1血液采集耗材通常包括無菌采血針、血小板單采密封管道、塑料四聯(lián)血袋、無菌塑料離心管、無菌注射器等一次性耗材，以及PRP專用制備套裝；采購方購買的這些耗材的生產(chǎn)方和供應(yīng)方須具有相關(guān)法規(guī)要求的資質(zhì)，耗材質(zhì)量須符合國家或（和）行業(yè)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，每個批次須附有出廠檢驗報告，所選規(guī)格必須符合使用要求，必須在有效期內(nèi)使用。4.2.2—定數(shù)量的抗凝劑與急救藥品和器械成分血單采常用的構(gòu)櫞酸抗凝劑；常用急救藥品，包括補充液體類5%?10%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液，鎮(zhèn)靜、抗驚厥、補鈣藥為地西泮注射液、硫酸鎂注射液和葡萄糖酸鈣注射液，呼吸興奮、抗過敏、抗休克類的尼可剎米注射液、鹽酸腎上腺素、地塞米松磷酸鈉、多巴胺注射液，止吐藥維生素B6，消腫藥50%硫酸鎂溶液；所有藥品須在有效期內(nèi)使用，存藥臨近過期前應(yīng)及時更新為較新批號的藥品；器械類，包括醫(yī)用氧氣瓶/氧氣罐/氧氣袋、醫(yī)用剪刀、繃帶、敷料和酒精燈，血壓計、聽診器和體溫計等。血壓計、溫度計屬于強檢器械，應(yīng)定期校準(zhǔn)。4.2.3血細(xì)胞計數(shù)儀及其配套檢測試劑檢測血小板濃度時須在有效期內(nèi)，建立標(biāo)準(zhǔn)的檢測操作規(guī)程，操作嚴(yán)格按儀器及試劑說明書。4.2.4—定數(shù)量的消毒劑皮膚消毒用安爾碘和75%醫(yī)用酒精，桌面消毒用季銨鹽（新潔爾滅、洗必泰等）或含氯消毒劑，地面消毒用84消毒液等；確保質(zhì)量合格，在有效期內(nèi)使用。4.2.5其他物品包括各類試管、吸頭、加樣槍、消毒棉球、棉棒、止血帶、治療由、握力球、采血墊、銳器盒、溫度計等；這些物品須滿足實際應(yīng)用的質(zhì)量和衛(wèi)生學(xué)要求。PRP的制備方法與要求PRP的制備方法有多種，不同制備方法各有長短，應(yīng)根據(jù)自己的實際情況選擇適當(dāng)方法，并應(yīng)用獲得國家Ⅲ類醫(yī)療器械注冊證的衛(wèi)生材料和在封閉狀態(tài)下分離制備，確保安全。5.1成分血單采機采集制備PRP推薦為首選方法。5.1.1采集制備的PRP特點成分血單采機所用一次性配套耗材為國家Ⅲ類醫(yī)療器械，特點是：1)在全封閉狀態(tài)下采集PRP,污染機會極低；2)PRP中血小板濃度、純度高，紅細(xì)胞和白細(xì)胞混入率極低；3)受治療的患者自體血液損失少；

4)PRP采集時間相對較短；5)實現(xiàn)PRP1次采集多次使用，成本-效益比提升。5.1.2設(shè)備及粍材要求1)成分血單采機須為經(jīng)NMPA審批上市的產(chǎn)品；2)耗材應(yīng)取得國家Ⅲ類醫(yī)療器械注冊證；3)成分血單采機采集的血小板濃度高（>1000x109/L)，紅細(xì)胞殘留量低（<lx109/L

)，白細(xì)胞混入量低（<1x108/L

)或根據(jù)臨床治療需求選擇保留一定濃度的白細(xì)胞；4)可根據(jù)患者的體重及其健康狀況，選擇較少的體外循環(huán)血量；5)1個循環(huán)采集時間<30min；6)設(shè)備具備安全報警裝置，確保采集過程中的血流速度。5.1.3采集制備要求

1)采集前應(yīng)對被采集者身體狀況是否滿足單采條件做安全性綜合評估，檢查患者血管、檢測血小板基礎(chǔ)濃度是否滿足采集條件：（1）Hb>120g/L，Plt>120x109/L;（2）患者近期無口服影響凝血功能的阿司匹林等藥物，或者影響正常獲取富血小板血漿的藥物；（3）無血液相關(guān)疾病，如凝血因子缺乏或功能異常所致的出血性疾?。ㄑ巡　⒀苄匝巡?、維生素K缺乏癥等），血小板功能異常疾?。ň薮笱“寰C合征、血小板無力癥、貯存池病等），無嚴(yán)重心血管疾病和其他器質(zhì)性疾?。蚨景Y、肝衰竭），全身無感染性病灶；（4）無惡性腫瘤，尤其是白血病等。2)根據(jù)治療項目PRP的用量需求、患者基礎(chǔ)血小板濃度和PRP中血小板治療濃度來預(yù)估PRP的采集量，設(shè)定相應(yīng)的采集參數(shù)。3)操作人員已熟讀設(shè)備使用說明書，本科室已建立單采制備PRP的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和流程圖，嚴(yán)格按其操作執(zhí)行。4)裝配單采管道前應(yīng)仔細(xì)檢查外觀，確保管道和收集袋無破損、無滲漏、無污染。5)采集前，應(yīng)檢查確保血液保存液（含抗凝劑）和0.9%生理鹽水袋無變色、無破損、無滲漏、無污染，是在有效期內(nèi)使用。6)PRP欲一次采集多次使用時，須先調(diào)整血小板濃度到滿足臨床使用的血小板濃度后，再于無菌條件下分裝，分裝容器須財受深低溫，并宜采用帶有分裝袋的單采管道；若單采管道不帶分裝袋，則宜用無菌接駁機接管或在潔凈環(huán)境下分裝。

5.2血袋采集制備PRP推薦為備選方法。5.2.1采集制備的PRP特點與分離制備手工血小板方法相同，分為富血小板血漿法和白膜法2種，具體操作及所用耗材按文獻(xiàn)要求，特點是：1)封閉狀態(tài)下采集、分離、制備，制品安全性相對較高；2)分離PRP后的血漿和紅細(xì)胞可以回輸，大大減少被采集者的血液浪費；3)1次采集的PRP可1次或多次使用；4)PRP的血小板濃度≥4倍患者血小板基礎(chǔ)濃度；5)推薦有相應(yīng)實驗室條件、能提供質(zhì)量控制的工作室制備；6)需要相對較多的配套設(shè)備，需2次離心分離，操作環(huán)節(jié)較多，比較費時，血小板回收率相對較低。5.2.2設(shè)備及耗材要求

1)設(shè)備應(yīng)根據(jù)本科室實際情況選擇配置，如大容量低溫離心機、熱合機、接駁機、成分血分離機或簡單的分漿夾等；2)耗材采用四或五聯(lián)血袋，符合血液制品制備的質(zhì)量要求，滿足PRP安全和質(zhì)量要求。5.2.3采集制備要求

1)采集前須了解被采集者的身體狀況，做安全評估：是否適合本法采集制備PRP，以確保采集過程和采集后被采集者的安全。2)因本法全血采集量為200?400mL，被采集者的采血不良反應(yīng)率基本與無償獻(xiàn)血不良反應(yīng)率相近，但身體條件常不如獻(xiàn)血者，發(fā)生采血反應(yīng)的機率也略高于獻(xiàn)血者，故須預(yù)先建立采血不良反應(yīng)預(yù)案及處置設(shè)施，具備對采血不良反應(yīng)的處置能力。

5.3PRP專用分離套裝制備PRP推薦為備選方法。5.3.1采集制備的PRP特點是1種專用于PRP制備而設(shè)計的一整套制備粍材，為Ⅲ類醫(yī)療器械，該套裝配備專用離心機,通常是1次采集1次使用，特點是：1)多在半封閉狀態(tài)下采集PRP,制品的安全性相對較高；2)血小板濃度≥4倍患者血小板基礎(chǔ)濃度；3)白細(xì)胞混入量較高，紅細(xì)胞混入量因各制造商產(chǎn)品設(shè)計方案的不同而差異較大，可能造成被采集者的自體PRP不能回輸而蒙受損失；在臨床科室使用時常需要再調(diào)節(jié)血小板濃度，以保障治療效果。5.3.2設(shè)備及耗材要求PRP專用分離制備套裝中包含了血液采集和分離制備齊全的耗材，操作較簡單，通常不再需要其他配套耗材。5.3.3采集制備要求

1)采集前須了解被采集者身體狀況，防止其因多次采集而發(fā)生治療性貧血；2)須在具備血液加工處理和質(zhì)量控制條件的工作間采集制備。

5.4試管法手工采集全血制備PRP不作為推薦方法。5.4.1采集制備的PRP特點是1種非常簡單、實用、成本低、可操作性強的方法；但除了PRP,被采集者其他的自體成分血不能回輸，血液損失較大；采集、制備過程為開放操作，存在一定的污染風(fēng)險；絕大多數(shù)無菌真空試管并非Ⅲ類醫(yī)療器械，安全性相對較低。5.4.2設(shè)備及粍材要求除了與前述幾種PRP采集制備方法共同的通用設(shè)備外，幾乎不需要添置額外設(shè)備（算是其最為突出的優(yōu)勢之一）。5.4.3采集制備要求

1)操作人員具備一定的技術(shù)熟練程度、實驗室滿足開展此業(yè)務(wù)的一定條件，方能確保血小板分離率與降低制品中白細(xì)胞、紅細(xì)胞的混入量；2)與血袋制備法一樣，白膜法與富漿法均可，但白膜法以采用兩步法為宜；

3)采用無菌、抗凝的真空試管采集血液，以滿足生物安全要求；4)采集前須了解被采集者身體狀況，以防因多次采集而發(fā)生治療性貧血。

5.5采集制備PRP過程中須注意的關(guān)鍵項5.5.1操作人員須熟悉PRP采集制備設(shè)備和配套耗材的使用說明書，無論采用哪種制備方法都須建立標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程與流程圖，并嚴(yán)格照之執(zhí)行。5.5.2PRP制備實驗室須配備血小板計數(shù)設(shè)備，具有調(diào)整血小板應(yīng)用濃度的能力，確保提供的PRP的血小板濃度滿足治療需要。5.5.3全血采集量須根據(jù)適應(yīng)證的PRP用量需求、患者基礎(chǔ)血小板濃度和治療所需的PRP的血小板濃度來預(yù)估。5.5.4耗材外觀質(zhì)量采集前須檢查包括耗材原包裝有無被拆封、是否密封等情況，確保采集、分離管無破損、無滲漏、無污染，是合格產(chǎn)品并在有效期內(nèi)使用。5.5.5抗凝劑和（或）保養(yǎng)液肉眼觀察須無變色、無絮狀物，是合格產(chǎn)品并在有效期內(nèi)使用。5.5.6醫(yī)患溝通與采血觀察醫(yī)護人員在采集過程中須與患者做實時有效的溝通，以防止和（或）消除患者（產(chǎn)生）的恐懼心理，并密切觀察患者對采血的反應(yīng)，一發(fā)現(xiàn)異常便及時處理。5.5.7采血反應(yīng)的處置所有PRP采集制備方法都可能引發(fā)被采集者的采血反應(yīng)，須預(yù)先備齊采血反應(yīng)急救處置的藥品和器材，建立采血不良反應(yīng)的處置預(yù)案，并由具備采血反應(yīng)處置能力的醫(yī)護人員負(fù)責(zé)保障。臨床將采血反應(yīng)分為輕度反應(yīng)：出現(xiàn)頭暈、面色蒼白、口周麻木、心跳加快等。

中度反應(yīng)：除輕度癥狀外還伴有胸悶、心悸、惡心嘔吐、出冷汗、血壓下降等。對于輕、中度反應(yīng)，只需立即停止采血，且叮囑獻(xiàn)血者精神放松，并在原地平臥休息，飲用適量的口服葡萄糖或牛奶等飲料，同時與被采集者進行交流溝通、安撫其情緒，加強對針眼的護理，大部分獻(xiàn)血者在一段時間內(nèi)均可得到緩解。重度反應(yīng)：發(fā)生意識障礙，暈厥、抽搐、心律不齊、血壓下降、脈搏細(xì)速、大小便失禁等。對于重度反應(yīng)者，密切監(jiān)測其血壓、心率及脈搏等多項生命體征指標(biāo)，并采取輕、中度反應(yīng)的處理措施，必要時給予吸氧或應(yīng)用鎮(zhèn)靜劑。5.5.8PRP的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

立足確保臨床需要，提供滿足治療用血小板濃度的PRP制品。當(dāng)血小板濃度過高時，經(jīng)由濃縮稀釋公式計算后，用貧血小板血漿（PPP)做稀釋處理；當(dāng)濃度過低時，需做濃縮處理。5.5.9分裝處理當(dāng)1次采集制備的PRP量較多，需要分裝時，宜選擇帶分裝連袋的耗材在封閉狀態(tài)下分裝；不具備封閉條件時，分裝須在超凈工作臺或生物安全柜中行無菌操作，防止制備過程中的空氣污染。

5.6采集制備PRP被采集者的控制條件血袋法采集的全血量通常與獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血量相近（≥200mL

)，其健康狀況和血管條件與機器單采血小板者相同[參見5.1.3段之1)]PRP制備的環(huán)境條件與要求6.1用房面積與室內(nèi)布局設(shè)置專用PRP采集制備工作間，面積應(yīng)滿足PRP采集制備全程實際工作量的需求；室內(nèi)布局應(yīng)切合實際，布局合理；便于工作臺、儀器設(shè)備、辦公桌椅、資料柜等的擺放；制度規(guī)范與流程圖的上墻。6.2衛(wèi)生環(huán)境6.2.1采血場所的室內(nèi)溫度和空氣質(zhì)量配備溫度調(diào)節(jié)裝置和空氣消毒設(shè)施，確保室內(nèi)溫度和空氣質(zhì)量符合室內(nèi)空氣質(zhì)量的國標(biāo)。6.2.2采血區(qū)域空氣的細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)須符合醫(yī)院消毒衛(wèi)生國標(biāo)中的Ⅲ類環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)要求。6.2.3分離制備的工作室/區(qū)的消毒須符合醫(yī)院消毒衛(wèi)生國標(biāo)中的Ⅱ類環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)要求。

6.3開放條件下PRP制備的環(huán)境要求除滿足血液采集環(huán)境要求外，還應(yīng)根據(jù)各自的實際情況分別滿足下列要求：

6.3.1潔凈室操作（推薦）PRP制備工作間環(huán)境應(yīng)達(dá)到10000級、操作臺局部達(dá)到100級，操作前應(yīng)先開啟空調(diào)、層流系統(tǒng)，開啟紫外線消毒1h(紫外線燈管須定期監(jiān)測，當(dāng)紫外線強度<70(μm/cm2應(yīng)予更換并記錄）；確保環(huán)境溫度18~26℃；,相對濕度45%~65%。6.3.2在非潔凈室條件中操作PRP制備須在超凈工作臺內(nèi)進行，操作前先用紫外線消毒1h,每次操作前須用300mg/L含氯消毒劑擦試工作臺。

6.4封閉式條件下PRP制備的環(huán)境要求須滿足血液采集環(huán)境要求。PRP制品的質(zhì)量控制7.1PRP質(zhì)量控制（以下簡稱質(zhì)控）概述7.1.1PRP的質(zhì)量直接關(guān)系到臨床療效與安全。7.1.2PRP質(zhì)量指標(biāo)包括制品中的血小板濃度、白細(xì)胞和紅細(xì)胞混入量檢測（推薦質(zhì)控指標(biāo)），以及是否被微生物污染，進一步的PRP中生長因子、細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)檢測（暫不推薦）。7.1.3PRP質(zhì)控確保其滿足療效血小板在一定濃度范圍內(nèi)與其療效呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系，只有通過質(zhì)控才能使其濃度既不過低也不過高，從而達(dá)到PRP預(yù)期的療效。7.1.4PRP中生長因子和細(xì)胞因子等活性物質(zhì)的檢測尚無法開展質(zhì)控，因目前沒有相應(yīng)的快速、單樣品檢測方法，質(zhì)控的現(xiàn)實可操作性差，暫時無法（或不要求）開展質(zhì)控。7.1.5PRP中微生物污染的檢測暫不要求質(zhì)控，微生物檢測需要細(xì)菌培養(yǎng)或（和）核酸檢測，實際操作存在困難，故只建議各單位可根據(jù)自身條件、需要等實際情況確定是否開展質(zhì)控。

7.2PRP中血小板濃度的質(zhì)控7.2.1血小板濃度表示方式臨床使用實驗室制備的PRP通常用血小板計數(shù)（Ph)表示；使用PRP專用制備套裝制備的PRP通常用患者的基礎(chǔ)血小板濃度的倍數(shù)表示。本共識推薦使用前者。7.2.2PRP適宜的血小板濃度基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用研究都較傾向血小板濃度（500~1000

)x109/L。以倍數(shù)表示PRP中的血小板濃度時，ICMS提出PRP的血小板濃度有低倍基線（2.5~3倍

）和高倍基線（5~9倍

）濃度之分；國內(nèi)則普遍認(rèn)為PRP中的血小板濃度以4~8倍為宜。7.2.3采集制備PRP的血小板濃度以滿足臨床治療需求為準(zhǔn)。PRP的各種適應(yīng)證所需最佳血小板濃度尚不明確，有待進一步研究確定。7.3PRP中白細(xì)胞殘留量的質(zhì)控7.