高級中學名校試卷PAGEPAGE1山東日照市2023-2024學年高二下學期期中考試試題注意事項：1.答題前，考生將自己的姓名、考生號、座號填寫在相應位置，認真核對條形碼上的姓名、考生號和座號，并將條形碼粘貼在指定位置上。2.選擇題〖答案〗必須使用2B鉛筆（按填涂樣例）正確填涂，非選擇題〖答案〗必須使用0.5毫米黑色簽字筆書寫，繪圖時，可用2B鉛筆作答，字跡工整、筆跡清楚。3.請按照題號在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的〖答案〗無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。保持卡面清潔，不折疊、不破損。－、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有－個選項符合題目要求。1.腐乳是我國古代勞動人民創(chuàng)造出的一種經(jīng)過微生物發(fā)酵制作的大豆食品。下列敘述錯誤的是（）A.腌制腐乳的鹵湯中加入的一定濃度的酒精能夠起到滅菌作用B.若制作過程中溫度過低會導致毛霉菌絲不易進入豆腐塊深層C.微生物產(chǎn)生酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸D.腐乳的風味因豆腐含水量、發(fā)酵條件以及輔料的不同而不同〖答案〗A〖祥解〗影響腐乳的風味和質(zhì)量的因素是鹽的用量，酒的用量，發(fā)酵溫度，發(fā)酵時間等；鹽的濃度過低，不足以抑制微生物生長，可能導致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高，會影響腐乳的口味。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應的過程。通過腌制并配入各種輔料，使蛋白酶作用緩慢，促進其他生化反應，生成腐乳的香氣。【詳析】A、腐乳制作時，鹵湯中加酒精可以抑制微生物的生長，起消毒的作用，A錯誤；B、溫度為15～18℃適合毛霉生長，溫度過低，毛霉的菌絲生長緩慢，不易進入豆腐塊的深層，B正確；C、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，C正確；D、因豆腐的含水量、發(fā)酵條件及加輔料的不同，可制成不同風味的腐乳，D正確。故選A。2.圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細菌，能夠在土壤中獨立固定氮氣?？蒲腥藛T進行了土壤中圓褐固氮菌的分離、計數(shù)和鑒定，并將之用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。下列說法正確的是（）A.選擇培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基不需要加碳源和氮源B.為促進圓褐固氮菌的生長，需將培養(yǎng)基pH調(diào)至酸性C.通過計算可知每克土壤中的固氮菌數(shù)約為1.8×108個D.將種子與自生固氮菌拌種后播種，可減少化肥使用〖答案〗D〖祥解〗微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。【詳析】A、依題意，圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細菌，能夠在土壤中獨立固定氮氣。因此，選擇培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基不需要加氮源，要加碳源，A錯誤；B、圓褐固氮菌是細菌，細菌適宜在中性或弱堿性條件下生存，因此，為促進圓褐固氮菌的生長，需將培養(yǎng)基pH調(diào)至中性或弱堿性，B錯誤；C、每克土壤中的固氮菌數(shù)約為：個，C錯誤；D、依題意，圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細菌，能夠在土壤中獨立固定氮氣。因此，將種子與自生固氮菌拌種后播種，可減少化肥使用，D正確。故選D。3.進行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基組分及含量如下表所示。下列分析正確的是（）組分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂蒸餾水含量1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mLA.由表中成分可知，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.葡萄糖和瓊脂都可以為尿素分解菌提供碳源C.常用高壓蒸汽滅菌法對配制好的培養(yǎng)基滅菌D.只有尿素分解菌能夠在該選擇培養(yǎng)基上生長〖答案〗C〖祥解〗培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，篩選和分離微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作?！驹斘觥緼、根據(jù)表格成分可知，含有瓊脂，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，A錯誤；B、瓊脂一般不可以為尿素分解菌提供碳源，只起到凝固劑的作用，B錯誤；C、配制培養(yǎng)基需要采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min,C正確；D、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿素分解菌，還有可能是自生固氮菌，D錯誤。故選C。4.啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成，其主要工藝流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.制麥時需浸泡大麥，加入脫落酸有利于淀粉酶的形成B.糖化后煮沸，主要是為了終止酶的作用并對糖漿滅菌C.圖中發(fā)酵階段，要始終保持嚴格的無菌、無氧的環(huán)境D.生產(chǎn)精釀啤酒需對發(fā)酵產(chǎn)物進行更徹底的過濾和消毒〖答案〗B〖祥解〗分析題圖，啤酒生產(chǎn)需經(jīng)過制麥、糖化、發(fā)酵等主要環(huán)節(jié)。酵母菌可進行有氧呼吸獲得大量能量，從而快速繁殖，又可以進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2?！驹斘觥緼、浸泡大麥的目的是提高自由水/結合水的比例，進而提高細胞代謝速率和淀粉酶的形成，而加入脫落酸促進休眠，不利于淀粉酶的形成，A錯誤；B、糖化后煮沸，主要是為了終止酶的作用并對糖漿滅菌，B正確；C、為了縮短發(fā)酵時間，發(fā)酵初期應適當提供氧氣，有利于酵母菌有氧呼吸快速繁殖，C錯誤；D、生產(chǎn)精釀啤酒一般不添加食品添加劑，不進行過濾和消毒處理等，D錯誤。故選B。5.“手指植物”是利用植物組織培養(yǎng)技術培育出的瓶裝觀賞植物。下列敘述錯誤的是（）A.可用酒精、次氯酸鈉對生理狀況良好的外植體進行消毒B.外植體接種時要注意插入方向且應在酒精燈火焰旁進行C.脫分化過程需要在適宜的溫度和充足的光照條件下進行D.該技術屬于無性繁殖，可保持觀賞植物的優(yōu)良遺傳特性〖答案〗C〖祥解〗使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法等?！驹斘觥緼、在進行組織培養(yǎng)時，可先后使用酒精、次氯酸鈉對生理狀況良好的外植體進行消毒，以防止外植體表面的雜菌污染，A正確；B、外植體接種時要注意插入方向，防止形態(tài)學上下端顛倒，且應在酒精燈火焰旁等無菌區(qū)域進行，B正確；C、脫分化過程應遮光，C錯誤；D、該技術屬于無性繁殖，可保持優(yōu)良品種的遺傳特性，D正確。故選C。6.研究發(fā)現(xiàn)，雪蓮次生代謝物對急性酒精肝損傷具有較好的防治作用，利用植物細胞培養(yǎng)技術生產(chǎn)雪蓮次生代謝物的大致流程如下圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.從雪蓮中提取的次生代謝物不是雪蓮生長所必需的B.圖中培養(yǎng)單細胞或小細胞團所用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基C.可將培養(yǎng)的細胞置于低滲溶液中漲破以提取次生代謝物D.利用該技術生產(chǎn)雪蓮次生代謝物不受季節(jié)和氣候的影響〖答案〗C〖祥解〗（1）次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時間條件下才合成，具有產(chǎn)量小，應用廣泛的特點。（2）植物細胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖的技術，它不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制，因此對于社會、經(jīng)濟、環(huán)境保護具有重要意義?！驹斘觥緼、初生代謝是生物生長和生存所必需的，次生代謝不是生物生長所必需的，A正確；B、圖中培養(yǎng)單細胞或小細胞團體的目的為增加細胞數(shù)量，獲取大量雪蓮次生代謝物，因此該過程使用的是液體培養(yǎng)基，B正確；C、圖中細胞為植物細胞，由于細胞壁對細胞壁的支持保護作用，在低滲溶液中不會被漲破，C錯誤；D、植物細胞培養(yǎng)是在人工構建的環(huán)境中進行，因此使用該方法獲得次生代謝產(chǎn)物具有不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制等優(yōu)點，D正確。故選C。7.動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程常用的技術之一。下列敘述錯誤的是（）A.將動物組織分散成單個細胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程都需要95%氧氣和5%CO2的氣體條件C.培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等D.向培養(yǎng)的體細胞中轉入相關因子可能會使其轉化為誘導多能干細胞〖答案〗B〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)的氣體條件：95%空氣和5%CO2，取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斘觥緼、將動物組織分散成單個細胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，A正確；B、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程都需要95%空氣和5%CO2的氣體條件，B錯誤；C、培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等，C正確；D、向培養(yǎng)的體細胞中轉入相關因子可能會使其轉化為誘導多能干細胞，D正確。故選B。8.研究人員將可表達綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細胞注射到與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，經(jīng)培養(yǎng)最終得到了具有高比例胚胎干細胞的嵌合體猴，過程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.胚胎干細胞具有分化為獼猴體內(nèi)任何一種類型細胞的潛能B.胚胎干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織中C.需將供體獼猴的胚胎干細胞注入到桑葚胚的內(nèi)細胞團部位D.嵌合體猴僅部分位置發(fā)出綠色熒光可能是基因重組的結果〖答案〗A〖祥解〗胚胎干細胞來源于早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細胞。胚胎干細胞，是高度未分化的細胞。如果進行體外培養(yǎng)，能夠無限的增殖和分化。胚胎肝細胞還可以分化成多功能的細胞。胚胎干細胞具有多能性，可以分化成多種組織的能力但是無法獨自發(fā)育成一個個體細胞。胚胎干細胞被稱為一種“全能”細胞，可以分化成所有類型的細胞，并且攜帶生物體的全套遺傳信息?！驹斘觥緼、胚胎干細胞被稱為一種“全能”細胞，攜帶生物體的全套遺傳信息，具有分化成任何一種類型細胞的潛能，A正確；B、干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細胞和成體干細胞等，B錯誤；C、需將供體獼猴的胚胎干細胞注入到囊胚的內(nèi)細胞團部位，C錯誤；D、嵌合體猴中，由胚胎干細胞增殖分化形成的組織可發(fā)出綠色熒光，D錯誤。故選A。9.科研人員從供體母牛耳朵上采集細胞，注入到去核的卵母細胞中構建成重構胚，再將發(fā)育的胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)，最終獲得了克隆?！皦▔ā薄Ｏ铝袛⑹鲥e誤的是（）A.進行核移植前，通常需將采集到的卵母細胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期B.梯度離心法可在不穿透卵母細胞透明帶的情況下對卵母細胞去核C.Ca2+載體、乙醇等處理能使耳細胞和去核卵母細胞發(fā)生融合D.克隆?！皦▔ā钡倪z傳物質(zhì)與供體牛的遺傳物質(zhì)并不完全相同〖答案〗C〖祥解〗動物細胞核移植技術是指將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術?！驹斘觥緼、進行核移植前，通常需將采集到的卵母細胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期，A正確；B、目前動物細胞核移植技術中普遍使用去核辦法有：梯度離心、紫外線短時間照射和化學物質(zhì)處理等。這些方法是在不穿透卵母細胞透明帶的情況下對卵母細胞去核或使其中的DNA變性，B正確；C、Ca2+載體、乙醇等處理的目的是激活重構胚，要使耳細胞和去核的卵母細胞發(fā)生融合，使用的是聚乙二醇融合法、電融合法雞滅活病毒誘導法，C錯誤；D、克隆牛“墾墾”的遺傳物質(zhì)與供體牛的遺傳物質(zhì)并不完全相同，原因是“墾墾”的核遺傳物質(zhì)來自供體牛，“墾墾”的質(zhì)遺傳物質(zhì)來自供體牛和卵母細胞，D正確。故選C。10.研究人員利用細胞工程和基因編輯技術成功培育出了孤雄小鼠，實現(xiàn)了哺乳動物的同性繁殖，操作流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.上述實驗說明精子轉化來的ahESC具有發(fā)育的全能性B.卵母細胞去除的“核”其實是紡錘體—染色體復合物C.基因編輯的目的是將ahESC的Y染色體變?yōu)閄染色體D.理論上最終得到孤雄小鼠的性染色體組成為XX或YY〖答案〗B〖祥解〗精子激活轉化成ahFSC，通過基因編輯技術獲得具卵細胞細胞核特點的ahESC，從而得到孤雄小鼠?！驹斘觥緼、上述實驗說明精子轉化來的ahESC的細胞核具有發(fā)育的全能性，A錯誤；B、卵母細胞去除的“核”其實是紡錘體—染色體復合物，B正確；C、精子激活轉化成ahFSC，通過基因編輯技術獲得具卵細胞細胞核特點的ahESC，沒有改變?nèi)旧w，C錯誤；D、理論上孤雄小鼠是由去核細胞、精子（X或Y）、具卵細胞細胞核的ahESC（X或Y）組成，性染色體組成為XX、XY或YY，D錯誤。故選B。11.杜泊羊生長速度快，肉質(zhì)好?？蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程實現(xiàn)了杜泊羊的快速繁殖，其主要流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.采集的精子需要在體外進行獲能處理，才能獲得受精能力B.可以使用免疫抑制劑來降低代孕羊?qū)χ踩肱咛サ呐懦夥磻狢.用分割針將原腸胚均分后再進行移植可以提高胚胎的利用率D.操作時要用激素對當?shù)仄胀ㄑ蜻M行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理〖答案〗A〖祥解〗體外受精主要操作步驟（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)：方法一：對小型動物一般用促性腺激素處理，使其排出更多的卵子，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。方法二：對大型動物是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精（或從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞）（2）精子的采集和獲能：在體外受精前，要對精子進行獲能處理。獲能方法：培養(yǎng)法和化學法。（3）受精：獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細胞在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斘觥緼、采集的精子需要在體外進行獲能處理，使其產(chǎn)生相應的生理變化，才能獲得受精能力，A正確；B、受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應，因此不需要注射免疫抑制劑，B錯誤；C、用分割針將桑葚胚或者囊胚均分后再進行移植可以提高胚胎的利用率，C錯誤；D、操作時要用激素對當?shù)仄胀ㄑ蜻M行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對杜泊母羊進行超數(shù)排卵處理，D錯誤。故選A。12.下表為常用的限制性內(nèi)切核酸酶（限制酶）及其識別序列和切割位點，由此推斷下列敘述錯誤的是（）限制酶名稱識別序列和切割位點限制酶名稱識別序列和切割位點BamHⅠG↓GATCCSmaⅠCCC↓GGGHindⅡGTY↓RACSau3AⅠ↓GATC注：Y為C或T，R為A或G。A.能被BamHI識別并切割的DNA也能被Sau3AI識別和切割B.經(jīng)HindⅡ、SmaI切割后的片段可以由T4DNA連接酶連接C.有些限制酶的識別序列只有一種，有些限制酶識別序列有多種D.經(jīng)BamHI、Sau3AI切割后連接形成的片段不能被BamHI識別〖答案〗D〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。【詳析】A、Sau3AI和BamHI切割位點和識別核苷酸序列相同，能被BamHI識別并切割的DNA也能被Sau3AI識別和切割，A正確；B、HindⅡ、SmaI切割后形成的是平末端，T4DNA連接酶可以連接具有平末端的DNA片段，B正確；C、有些限制酶的識別序列只有一種，有些限制酶識別序列有多種，如HindⅡ限制酶的識別序列為GTY↓RAC，其中Y＝C或T，R＝A或G，說明其識別序列不只一種，C正確；D、BamHI切割G↓GATCC，Sau3AI切割↓GATC，故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AI切割，但是BamHI不一定能切割，D錯誤。故選D。13.某同學利用洋蔥為實驗材料，進行DNA粗提取和鑒定實驗。下列敘述錯誤的是（）A.也可以選擇豬肝、雞血等作為實驗材料，提取方法可能稍有不同B.將洋蔥研磨液過濾后，置于4℃冰箱中幾分鐘后，DNA出現(xiàn)在沉淀物中C.向DNA提取液中加入體積分數(shù)為95%的冷酒精后，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNAD.鑒定時，先將絲狀物溶于2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺并進行沸水浴加熱〖答案〗B〖祥解〗（1）DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍色；（2）DNA粗提取與鑒定的實驗中，不同操作步驟中加水的作用不同，破碎細胞獲取含DNA的濾液時，加蒸餾水的目的是使血細胞漲破；出去濾液中的雜質(zhì)時，加蒸餾水的目的是降低NaCl溶液濃度使DNA析出。【詳析】A、不同類型的生物材料（如植物細胞、動物細胞、微生物）中DNA的提取過程雖有相似之處，但也存在差異。例如，使用雞血作為實驗材料時，通常利用紅細胞破裂釋放出的DNA進行提取，而不需要研磨和去除細胞壁的過程，A正確；B、在DNA粗提取實驗中，通常首先通過研磨和加入適量的洗滌劑與食鹽溶液來釋放細胞中的DNA，并破壞細胞膜和其他細胞結構。然后，在此混合液中DNA會溶解在溶液中，并隨同蛋白質(zhì)、多糖等其他物質(zhì)一起存在。DNA在一定濃度的NaCl溶液中溶解度較高，所以初步處理后的濾液經(jīng)過離心或靜置后，DNA不會形成沉淀，而是在溶液中，B錯誤；C、在DNA提取過程中，當加入高濃度酒精后，DNA會因不溶于酒精而析出，形成白色的絮狀或絲狀沉淀，這就是粗提取得到的DNA，C正確；D、鑒定DNA時，常用的方法之一就是二苯胺顯色反應，需要將DNA樣品溶解在適當?shù)腘aCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，在沸水中加熱后，若存在DNA，則反應液會變?yōu)樗{色，D正確。故選B。14.蘋果切開后顏色會加深的現(xiàn)象稱為“褐變”?！昂肿儭笔怯捎诙喾友趸复呋喾宇愇镔|(zhì)生成棕色色素所致，培育抗褐變轉基因蘋果的操作流程如圖。下列敘述正確的是（）A.圖中的目的基因為多酚氧化酶基因，標記基因為卡那霉素抗性基因B.目的基因的表達依賴上游的啟動子，標記基因表達則不需要啟動子C.步驟③是獲得轉基因蘋果的核心工作，常采用的方法是農(nóng)桿菌轉化法D.可通過PCR技術檢測蘋果的染色體DNA上是否成功插入了目的基因〖答案〗D〖祥解〗題圖分析：過程①為構建目的基因表達的載體，過程②為獲取受體細胞，過程③為將目的基因?qū)胧荏w細胞，過程④為脫分化，過程⑤為再分化?！驹斘觥緼、要想獲得抗褐變的轉基因蘋果，應以抑制多酚氧化酶表達的基因作為目的基因，同時以卡那霉素抗性基因作為標記基因，A錯誤；B、啟動子的作用是驅(qū)動基因的轉錄，目的基因的表達依賴上游的啟動子，標記基因表達也需要啟動子，B錯誤；C、過程①表示基因表達載體的構建，是基因工程的核心步驟，C錯誤；D、檢測蘋果的染色體DNA上是否成功插入了目的基因可利用PCR技術，D正確。故選D。15.生物技術的安全性和倫理問題是社會關注的熱點。下列相關敘述正確的是（）A.某些轉基因食品中的DNA會與人體細胞的DNA發(fā)生基因重組B.將α‐淀粉酶基因與目的基因一起轉入植物，可防止轉基因花粉的傳播C.生殖性克隆是利用克隆技術產(chǎn)生特定的細胞來修復或替代受損的細胞D.試管嬰兒必需的技術有體外受精、植入前的遺傳學診斷和胚胎移植等〖答案〗B〖祥解〗（1）轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。（2）中國政府：禁止生殖性克隆人，堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人?！驹斘觥緼、一般轉基因食品中的DNA不會與人體細胞的DNA發(fā)生基因重組，A錯誤；B、將α-淀粉酶基因與目的基因轉入植物中，由于α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏而使花粉失活，因此可以防止轉基因花粉的傳播，B正確；C、生殖性克隆是通過克隆技術產(chǎn)生獨立生存的新個體，C錯誤；D、試管嬰兒對植入前胚胎一般不需要進行遺傳學診斷，而設計試管嬰兒往往為了避免后代患某種遺傳病，需要進行遺傳學診斷，故試管嬰兒必需的技術有體外受精和胚胎移植等，D錯誤。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.雙層平板法是先在培養(yǎng)皿中倒入底層固體培養(yǎng)基，凝固后形成底層平板；再倒入由宿主細菌、噬菌體以及瓊脂含量較低的培養(yǎng)基組成的混合液，形成上層平板。培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上觀察到由于噬菌體侵染周圍細菌而形成的空斑，即噬菌斑（通常一個噬菌斑來自一個噬菌體），根據(jù)噬菌斑的數(shù)目可計算噬菌體的數(shù)量。下列敘述錯誤的是（）A.需先調(diào)節(jié)滅菌后培養(yǎng)基的pH，然后再進行倒平板B.需使用滅菌后的涂布器將混合液均勻涂布在底層平板上C.利用雙層平板法統(tǒng)計出的噬菌體數(shù)量往往比實際值偏大D.可用雙層平板法來檢測噬菌體和細菌間是否存在寄生關系〖答案〗ABC〖祥解〗雙層平板法的優(yōu)點：①加了底層培養(yǎng)基后，可使原來底面不平的玻璃皿的缺陷得到了彌補；②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上，因此不僅每一噬菌斑的大小接近、邊緣清晰，而且不致發(fā)生上下噬菌斑的重疊現(xiàn)象；③因上層培養(yǎng)基中瓊脂較稀，故形成的噬菌斑較大，更有利于計數(shù)。【詳析】A、配制培養(yǎng)基時，要先調(diào)pH再滅菌，然后進行倒平板，A錯誤；B、依題意，由宿主細菌、噬菌體以及瓊脂含量較低的培養(yǎng)基組成的混合液直接倒入底層平板上，形成上層平板，不需要再用涂布器涂布，B錯誤；C、在計數(shù)時，有可能噬菌體入侵細菌后還未裂解細菌，未形成噬菌斑。因此，利用雙層平板法統(tǒng)計出的噬菌體數(shù)量往往比實際值偏小，C錯誤；D、依題意，噬菌體侵染周圍細菌會形成的空斑，即噬菌斑。若噬菌體不侵染周圍細菌就不會形成空斑。因此，可以通過觀察上層平板上是否會有噬菌斑來檢測噬菌體和細菌間是否存在寄生關系，D正確。故選ABC。17.果醋需要10%~12%的糖發(fā)酵得到，而宣木瓜原液含糖量僅5%左右。以宣木瓜為材料制作果醋時，果實軟化、破碎打漿后向溶液中加入白砂糖，接種酵母菌，敞口培養(yǎng)一天左右轉為密閉發(fā)酵。當酒精濃度穩(wěn)定后，接種醋酸菌，進行醋酸發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）A.加入白砂糖是為了給酵母菌發(fā)酵提供充足碳源B.敞口培養(yǎng)的目的是為酵母菌大量繁殖提供氧氣C.醋酸發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量CO2，因此需定時排氣D.醋酸發(fā)酵所需的溫度比酵母菌發(fā)酵所需要的溫度高〖答案〗C〖祥解〗（1）參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧的情況下酵母菌生長繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。（2）參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！驹斘觥緼、酒精發(fā)酵前加入的白砂糖主要是為酵母菌提供碳源，有利于提高酒精的生成量，A錯誤；B、敞口的目的是提供氧氣，為了酵母菌的繁殖，酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生CO2，當大量CO2產(chǎn)生時表明酵母菌的數(shù)量已大幅增加，B正確；C、酒精發(fā)酵成醋酸過程中沒有二氧化碳，不需要定時排氣，C錯誤；D、醋酸發(fā)酵所需的溫度（30-35℃）比酵母菌發(fā)酵所需要的溫度（18-30℃）高，D正確。故選C。18.某團隊利用植物體細胞雜交技術獲得了三倍體無核柑橘，方法是：首先處理由二倍體柑橘的花粉離體培養(yǎng)得到的愈傷組織，獲得原生質(zhì)體；然后處理二倍體柑橘幼葉細胞獲得原生質(zhì)體；隨后誘導兩種原生質(zhì)體融合，培養(yǎng)一段時間后檢測再生愈傷組織細胞中的DNA含量，結果如下圖所示（融合的原生質(zhì)體僅發(fā)生兩兩融合）。下列說法正確的是（）A.融合的原生質(zhì)體需放在無菌水中培養(yǎng)，以防止雜菌污染B.DNA相對含量為25、50的細胞來自未融合的原生質(zhì)體C.培養(yǎng)DNA相對含量為75的細胞可獲得三倍體無核柑橘D.通過該實驗也可以獲得四倍體柑橘的愈傷組織細胞〖答案〗CD〖祥解〗植物體細胞雜交就是將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術?！驹斘觥緼、融合的原生質(zhì)體需放在無菌水中培養(yǎng)，會導致細胞滲透吸水，甚至漲破，融合的原生質(zhì)體應放在等滲溶液中，A錯誤；B、由圖分析可知，DNA相對含量為50的細胞，也可能是兩個花粉細胞融合形成的細胞中的DNA含量，B錯誤；C、細胞中DNA含量為75，說明含有三個染色體組，應是花粉細胞和二倍體細胞融合形成的細胞，將該細胞進行培養(yǎng)可獲得三倍體無核柑橘，C正確；D、DNA相對含量為100的細胞，是二倍體細胞和二倍體細胞的融合體，將該細胞進行培養(yǎng)，可獲得四倍體柑橘的愈傷組織細胞，D正確。故選CD。19.對RNA病毒的檢測可采用RT-PCR技術。RT-PCR是將RNA的逆轉錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式反應（PCR）相結合的技術。檢測時，先提取病毒RNA，經(jīng)逆轉錄生成cDNA，然后在同一反應體系中進行PCR。下列敘述正確的是（）A.RNA提取液中需添加RNA酶抑制劑，目的是防止RNA被降解B.RT-PCR反應體系中加入的DNA聚合酶和逆轉錄酶均需耐高溫C.PCR利用DNA熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度控制DNA雙鏈的解聚與結合D.PCR反應的延伸過程中，DNA聚合酶只能從引物的3'端連接核糖核苷酸〖答案〗AC〖祥解〗PCR原理：在高溫作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、在RNA提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是抑制RNA酶的活性，防止RNA被降解，A正確；B、RT-PCR技術首先經(jīng)逆轉錄酶的作用，從RNA合成cDNA，再以cDNA為模板，在耐高溫的DNA聚合酶作用下擴增合成目的片段，逆轉錄酶不需耐高溫，PCR反應體系加熱至95℃時，逆轉錄酶會變性失活，B錯誤；C、在PCR技術的過程中包括：高溫變性（解鏈）→低溫復性→中溫延伸三個步驟，因此DNA兩條鏈的解旋過程不需要解旋酶的催化，而是利用了DNA在高溫下變性的原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結合，C正確；D、延伸過程中耐高溫DNA聚合酶從引物的3'端連接脫氧核苷酸，不消耗ATP，D錯誤。故選AC。20.雙向啟動子可同時結合兩個RNA聚合酶來驅(qū)動基因的表達，研究人員為檢測雙向啟動子的作用效果，構建了下圖所示的表達載體，并進行相關實驗。下列分析正確的是（）A.為了插入GUS基因，需用SalI和SphI酶切整合了LUC基因的質(zhì)粒B.可以通過在培養(yǎng)基中添加潮霉素來篩選成功導入表達載體的受體細胞C.圖中GUS基因和LUC基因轉錄時的模板鏈不是DNA分子的同一條鏈D.可通過觀察培養(yǎng)基中是否同時出現(xiàn)熒光和藍色物質(zhì)來確認雙向啟動子的作用〖答案〗BCD〖祥解〗基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、如果用SphI酶切已整合了雙向啟動子及LUC基因的質(zhì)粒時就會破壞LUC基因，A錯誤；B、如果成功導入含有潮霉素抗性基因的基因表達載體，受體細胞就具有抗潮霉素的能力，在含有潮霉素的培養(yǎng)基上能生存，因此可以篩選出成功導入表達載體的微生物受體細胞，B正確；C、轉錄是從5'→3'方向進行的，由圖可知，雙向啟動子位于GUS基因和LUC基因之間，所以GUS基因和LUC基因轉錄時的模板鏈不是DNA分子的同一條鏈，C正確；D、雙向啟動子如果正常表達，就會合成熒光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分別產(chǎn)生熒光或生成藍色物質(zhì)，從而確定雙向啟動子的作用，D正確。故選BCD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.產(chǎn)黃青霉菌是一種自然界中廣泛存在的霉菌，是生產(chǎn)青霉素的重要工業(yè)菌種。當產(chǎn)黃青霉菌處于葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時，會分泌青霉素。工業(yè)上生產(chǎn)青霉素的發(fā)酵工程流程如圖所示。（1）由圖中分離純化的結果推測，該過程中采用的分離純化方法是_____。剛分離獲得的菌種不會直接加入主發(fā)酵罐，而是先進行母種培養(yǎng)，其目的是_____。（2）圖中主發(fā)酵過程中要隨時取樣檢測培養(yǎng)基中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，同時，要嚴格控制______（答出三點）等發(fā)酵條件，因為環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖，而且會影響微生物代謝產(chǎn)物的形成。（3）隨著主發(fā)酵過程的進行，需要適時向發(fā)酵罐內(nèi)“補料”，補充的培養(yǎng)基成分有磷酸二氫鈉、葡萄糖等，其中磷酸二氫鈉的功能是______（答出兩點）。為使產(chǎn)黃青霉菌處于“半饑餓”狀態(tài)，延長青霉素的合成期，“補料”添加葡萄糖時應采取的方式是________（從添加的量與頻次角度回答）?！即鸢浮剑?）①.稀釋涂布平板法②.增加菌種數(shù)量（2）pH、溫度、溶解氧（3）①.提供無機鹽；維持培養(yǎng)液的pH②.少量多次添加〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。（1）由發(fā)酵工程流程圖中平板上菌落的分布，可推知分離純化菌種采用的方法是稀釋涂布平板法。當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此稀釋涂布平板法可用于菌落計數(shù)；由于發(fā)酵過程中需要的菌種數(shù)量大，因此將分離后的菌種先進行菌種的擴大化培養(yǎng)，即進行“母種培養(yǎng)”以增加菌種數(shù)量。（2）在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進程。要及時添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴格控制溶氧量、pH和溫度等發(fā)酵條件。環(huán)境條件的變化不僅會影響微生物的生長繁殖，也會影響微生物的代謝途徑，影響微生物代謝物的形成。（3）磷酸二氫鈉是培養(yǎng)基中的無機鹽之一，除此之外還可以作為緩沖劑調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；葡萄糖容易被菌體氧化并產(chǎn)生抑制抗生素合成酶形成的物質(zhì)、一次性添加過量會影響青霉素的合成，因此“補料”添加葡萄糖時易采用多次少量添加的方法。22.兩種遠緣植物的細胞融合后會導致一方的染色體被排出。若其中一個細胞中的染色體在融合前發(fā)生斷裂，產(chǎn)生的染色體片段會由于整合到另一個細胞的染色體上而留存在雜種細胞中。依據(jù)該原理，科研人員將苜蓿的耐寒基因轉入油菜細胞中，實驗流程如下圖。（1）圖中過程a常用______酶對油菜細胞和苜蓿細胞進行處理，以獲得兩種細胞的原生質(zhì)體。過程c中可以用化學誘導劑______誘導兩種原生質(zhì)體融合。（2）過程d中雜種細胞可以培育成再生植株，其原因是______。獲得再生植株的過程中，若愈傷組織在誘導生芽的培養(yǎng)基上未形成芽但分化出了根，原因可能是生長素用量與細胞分裂素用量的比值______（填“偏高”或“偏低”）。（3）利用特異性引物對油菜和苜?；蚪MDNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，然后利用上述特異性引物對再生植株進行PCR擴增，結果如下圖。據(jù)圖判斷，再生植株①~④中一定是雜種植株的是______。進一步檢測發(fā)現(xiàn)，植株②沒有表現(xiàn)出耐寒性狀，由此推測耐寒基因可能位于圖中大小為_______bp的DNA片段上?！即鸢浮剑?）①.纖維素酶和果膠②.聚乙二醇（2）①.植物細胞的全能性②.偏高（3）①.①②④②.1000〖祥解〗分析題圖：a表示去壁過程，常用酶解法；b表示用紫外線照射使苜蓿的染色體斷裂；c表示人工誘導原生質(zhì)體間的融合，形成雜種細胞；d表示植物組織培養(yǎng)；⑤表示篩選出耐寒油菜。（1）過程a常用纖維素酶和果膠酶對油菜細胞和苜蓿細胞進行處理，去除細胞壁，獲得兩種細胞的原生質(zhì)體。過程c表示人工誘導原生質(zhì)體間的融合，形成雜種細胞，常用的化學誘導劑是聚乙二醇。（2）過程d表示植物組織培養(yǎng)，之所以雜種細胞可以培育成再生植株，其原因是植物細胞的全能性。生長素和細胞分裂素的濃度、比例等都會影響植物細胞的發(fā)育方向，若生長素用量與細胞分裂素用量的比值偏高時，愈傷組織在誘導生芽的培養(yǎng)基上不會形成芽但分化出了根。（3）根據(jù)題意，雜種植株應同時具有油菜和苜蓿的DNA片段，根據(jù)圖譜，普通小麥含有堿基對為300和600的DNA片段，苜蓿含有堿基對為1000、1300和1500的片段；再生植株3，只含有長度為300和600的片段，與油菜一致；1、2、4既含有油菜DNA片段，又含有苜蓿DNA片段，為雜種植株；由于植株②沒有表現(xiàn)出耐寒性狀，故耐寒基因1300bp的DNA片段上，植株①和④具有耐寒性，但④不具有1500bp的DNA片段，二者都具有1000bp的DNA片段，說明耐寒基因可能位于圖中大小為1000bp的DNA片段上。23.Graves?。℅D）是一種自身免疫性甲狀腺疾病，主要表現(xiàn)為甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現(xiàn)，GD患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間粘附分子1（ICAM-1），導致甲狀腺腫大。科研人員通過制備單克隆抗體，對治療GD進行了嘗試。（1）用ICAM-1作為抗原多次免疫若干只小鼠，目的是_______。幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入到多孔培養(yǎng)板的不同孔中，然后向多孔培養(yǎng)板中加入_______進行檢測。依據(jù)反應結果，選出陽性反應最強的培養(yǎng)孔所對應的小鼠N。（2）培養(yǎng)骨髓瘤細胞時需要定期更換培養(yǎng)液，目的是防止_______。融合前將部分骨髓瘤細胞置于篩選雜交瘤細胞的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后，若培養(yǎng)基中_______，說明該培養(yǎng)基符合實驗要求。（3）取小鼠N的脾臟細胞制備成細胞懸液，與骨髓瘤細胞進行融合，然后用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有分裂能力的細胞。將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上進行培養(yǎng)，然后進一步檢測，從中選擇_______，將其植入小鼠腹腔中克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體?！即鸢浮剑?）①.使小鼠產(chǎn)生能分泌抗ICAM-1抗體的B淋巴細胞②.ICAM-1（2）①.細胞代謝物積累對細胞自身造成危害②.無骨髓瘤細胞生長（3）產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細胞〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。（1）用ICAM-1作為抗原多次免疫若干只小鼠，目的是使小鼠產(chǎn)生能分泌抗ICAM-1抗體的B淋巴細胞，在多孔培養(yǎng)板中加入ICAM-1，通過血清中抗體對ICAM-1的特異性反應以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應結果，選出抗原-抗體反應最強的培養(yǎng)孔所對應的小鼠M。（2）培養(yǎng)骨髓瘤細胞時需要定期更換培養(yǎng)液，目的是防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害，實驗用骨髓瘤細胞置于5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)，融合前將部分培養(yǎng)細胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中無骨髓瘤細胞生長，說明培養(yǎng)基符合實驗要求。（3）取小鼠M的脾臟細胞制備成細胞懸液，與實驗用骨髓瘤細胞進行融合，形成的雜交瘤細胞具有無限增殖能力。將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM-1檢測，從中選擇能大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細胞，植入小鼠腹腔中進行克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。24.組織纖維溶酶原激活物（t-PA）能高效降解血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。臨床使用發(fā)現(xiàn)t-PA有誘發(fā)顱內(nèi)出血的副作用，為此研究人員通過蛋白質(zhì)工程將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸（密碼子UCU），獲得了副作用顯著降低的改良t-PA.下圖為利用重疊延伸PCR技術改造t-PA基因和構建相應的表達載體的過程。（1）研究人員通過重疊延伸PCR技術對天然的t-PA基因進行序列改造，先利用引物________進行PCR1，獲得產(chǎn)物1；再通過PCR2，獲得產(chǎn)物2；重疊延伸后利用引物________進行PCR3，獲得大量改良t-PA基因。（2）研究表明，t-PA蛋白第84位氨基酸相應基因的模板鏈（圖中t-PA基因的上鏈）的堿基序列是ACA，則誘變引物b中該突變位點的堿基是________。將改良t-PA基因用限制酶切后得到如上圖所示的片段，那么質(zhì)粒pCLY11需用限制酶________切割，才能與改良t-PA基因高效連接。（3）質(zhì)粒pCLY11中的lacZ表達產(chǎn)物可以將X-gal分解為半乳糖和深藍色物質(zhì)，從而使所在的菌落呈現(xiàn)藍色，反之則為白色。將轉化后的大腸桿菌接種在含有________的培養(yǎng)基上進行篩選，含重組質(zhì)粒的大腸桿菌所長出的菌落呈________色?！即鸢浮剑?）①.a、b②.a、d（2）①.G②.XmaⅠ、BglⅡ（3）①.新霉素和X-gal②.白〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指通過物理化學與生物化學等技術了解蛋白質(zhì)的結構與功能，并借助計算機輔助設計、基因定點誘變和重組DNA技術改造基因，以定向改造天然蛋白質(zhì)，甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)的技術。蛋白質(zhì)工程的一般過程是：根據(jù)新蛋白質(zhì)預期功能設計相關蛋白質(zhì)結構→設計對應的氨基酸序列→合成可產(chǎn)生新蛋白質(zhì)的相關脫氧核苷酸序列→利用基因工程技術合成新的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎上延伸出來的第二代基因工程?；蚬こ碳夹g的基本步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。（1）圖中信息顯示，引物b和引物c可以互補配對，會導致引物失效，因此，如果PCR1和PCR2同時進行，無法達到預期目的，因此先利用引物a、b進行進行PCR1，獲得產(chǎn)物1；再通過PCR2，獲得產(chǎn)物2；重疊延伸后利用引物a、d從兩端進行擴增，獲得大量改良t-PA基因。（2）已知t-PA蛋白第84位是半胱氨酸，相應的基因模板鏈（圖中t-PA基因的上鏈）上的堿基序列是ACA，則半胱氨酸的密碼子為UGU，而絲氨酸的密碼子是UCU，由此可知，若要將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，則t-PA基因上鏈第84位發(fā)生堿基替換為ACA→AGA，圖中顯示引物b與t-PA基因的下鏈互補