2025屆湖南省道縣補習(xí)學(xué)校高三下學(xué)期一?？荚嚿镌囶}注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．人的X染色體和Y染色體的形態(tài)不完全相同，存在著同源區(qū)（Ⅱ）和非同源區(qū)（Ⅰ、Ⅲ），如圖所示。下列有關(guān)敘述中，錯誤的是（）A．Ⅰ片段上由隱性基因控制的遺傳病，男性患病率高于女性B．Ⅱ片段的存在，決定了X、Y染色體在減數(shù)分裂時的聯(lián)會行為C．由Ⅲ片段上基因控制的遺傳病，患病者全為男性D．由于X、Y染色體互為非同源染色體，故人類基因組計劃要分別測定2．下列有關(guān)酶和ATP的敘述，正確的是（）A．酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的并能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)的物質(zhì)B．長時間的高溫、強堿等條件會導(dǎo)致蛋白酶的肽鍵斷裂使其失活C．線粒體合成的ATP可在細(xì)胞核中發(fā)揮作用D．細(xì)胞質(zhì)中含有DNA聚合酶，該酶是一種調(diào)節(jié)DNA生理活動的信息分子3．物質(zhì)X通過細(xì)胞膜的運輸速率與膜內(nèi)外濃度差成正比，且不具有載體飽和效應(yīng)。據(jù)此推斷物質(zhì)X進(jìn)出細(xì)胞的方式為（）A．自由擴散 B．主動運輸 C．協(xié)助擴散 D．胞吞和胞吐4．葉綠體中存在具有編碼功能的cpDNA，這些cpDNA借助細(xì)胞核DNA編碼的酶系統(tǒng)合成多肽，用于光合作用的各個環(huán)節(jié)。下列敘述正確的是（）A．組成cpDNA的單體有5種B．葉綠體中有少量DNA，可以控制合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)C．葉綠體的功能不會受到細(xì)胞核DNA的調(diào)控D．核DNA編碼的酶不能進(jìn)入葉綠體內(nèi)發(fā)揮催化作用5．下表為對某家庭各成員的四種基因進(jìn)行檢測的結(jié)果，“√”表示含有該基因，沒有“√”的表示不含該基因。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）被檢測基因編號母親父親女兒兒子①號√√√②號√√③號√√√√④號√√A．若①號基因為A基因，則父親的基因型可能為aaB．②號基因可能位于Y染色體上，也可能位于常染色體上C．①號基因和③號基因的遺傳可能遵循基因的自由組合定律D．若④號是與紅綠色覺有關(guān)的B基因，則這對夫婦再生一個紅綠色盲男孩的概率為1/26．關(guān)于生物體產(chǎn)生的酶的敘述，錯誤的是（）A．酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA B．脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂焙虲O2C．蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類 D．纖維素酶能夠降解植物細(xì)胞壁和細(xì)菌細(xì)胞壁7．如圖是某細(xì)胞的局部示意圖。下列敘述正確的是（）A．結(jié)構(gòu)①③④屬于生物膜系統(tǒng)B．結(jié)構(gòu)③中葡萄糖氧化分解釋放大量能量C．該細(xì)胞一定不含有細(xì)胞壁D．該細(xì)胞不可能為處于分裂中期的動物細(xì)胞8．（10分）下列關(guān)于細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能的敘述正確的是A．細(xì)菌沒有核膜包被的細(xì)胞核，但有環(huán)狀DNA分子位于擬核區(qū)域B．需氧生物的細(xì)胞都是以線粒體作為產(chǎn)能的“動力車間”C．大腸桿菌中的酶，在核糖體上合成，并由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工D．藍(lán)細(xì)菌是自養(yǎng)生物，因為其葉綠體可進(jìn)行光合作用二、非選擇題9．（10分）已知甲病和乙病都是單基因遺傳病，其中一種病是紅綠色盲。圖1為患甲病的W家族遺傳系譜圖（顯性基因為A，隱形基因為a），圖2為患乙病的L家族系譜圖（顯性基因為B，隱形基因為b）。注意：每個家族均不攜帶另一個家族的致病基因。據(jù)圖回答。（1）W家族中甲病致病基因位于______染色體上，屬于______性遺傳。（2）W家族中4號基因型是______。（不考慮乙?。?）L家族中IV號的致病基因來自______號。（4）已知W家族不帶乙病致病基因，L家族不帶甲病致病基因，若W家族5號與L家族Ⅲ號婚配，生出一個攜帶兩種致病基因女孩的概率是______，這個女孩的基因型是______。（5）W家族中的4號與L家族中的Ⅲ號結(jié)婚后，若Ⅲ號的某個初級卵母細(xì)胞中的一條DNA分子上A基因突變成a基因，由這個初級卵母細(xì)胞形成的卵細(xì)胞與W家族中4號所產(chǎn)生的精子結(jié)合成受精卵。這個受精卵發(fā)育成患甲病孩子的概率是______。10．（14分）池塘養(yǎng)魚歷史悠久，魚的種類豐富，食性多樣：有素食性的魚類，如草魚、鰱魚、鳙魚，有肉食性的魚類，如青魚、鯰魚等?；卮鹣铝袉栴}：（1）養(yǎng)殖品種上最好選擇___________（填食性）魚類，以期獲得最大產(chǎn)量。（2）如果給池塘補充投放飼料，池塘的環(huán)境容納量（K值）將___________（填“增大”、“不變”或“減小”），從生產(chǎn)者到素食性魚類的能量傳遞效率將_______（填“增大”、“不變”或“減小”）。（3）要確保持續(xù)高產(chǎn)，應(yīng)在種群數(shù)量___________（填“小于”、“等于”或“大于”）K/2時捕撈。（4）在池塘水體中的某一水深處取水樣，將水樣分成三等份，一份直接測定O2含量（A）；另兩份分別裝入不透光（甲）和透光（乙）的兩個玻璃瓶中，密閉后放回取樣處，經(jīng)過24小時后測定甲瓶中的O2含量為B，乙瓶中的O2含量為C。假設(shè)甲、乙瓶中生物呼吸作用相同，完善有關(guān)問題：①寫出能間接表示該水層太陽能輸入總量的表達(dá)式___________（用字母表示）；②據(jù)此分析，池塘水層過深不利于養(yǎng)魚的原因是____________（答出兩點即可）。11．（14分）科學(xué)家研制出基因工程乙肝--百白破（rHB---DTP）四聯(lián)疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳菌苗、白喉類毒素和破傷風(fēng)類毒素。請回答下列問題：（1）為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對應(yīng)____________，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈DNA片段，獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列____________（填“相同”或“不同”）。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用_________，然后通過PCR技術(shù)大量擴增，此技術(shù)的原理是_______________。（3）把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時，科學(xué)家采用了改造后的腺病毒作為運載體，請寫出你認(rèn)為科學(xué)家選它的理由：______________（寫出兩點）。（4）研究發(fā)現(xiàn)，如果將白喉桿菌類毒素第20位和第24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，免疫效果更好，請寫出此種技術(shù)的基本流程：_________________________。（5）實驗證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次的效果比只注射1次更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的______________細(xì)胞數(shù)量增多，當(dāng)同種抗原再次侵入人體時，二次免疫的特點是___________________。12．黨的十九大報告從經(jīng)濟社會發(fā)展全局的高度創(chuàng)造性地提出了鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略，要求堅持農(nóng)業(yè)農(nóng)村優(yōu)先發(fā)展，按照產(chǎn)業(yè)興旺、生態(tài)宜居、鄉(xiāng)風(fēng)文明、治理有效、生活富裕的總要求，建立健全城鄉(xiāng)融合發(fā)展體制機制和政策體系，加快推進(jìn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村現(xiàn)代化。某青年響應(yīng)黨的號召，將屋后荒山開墾成果林，將屋前洼地改造成魚塘，并在山中放養(yǎng)土雞和野豬等。請回答下列問題：（1）土雞羽毛顏色多種多樣，體現(xiàn)了生物多樣性中的________________。（2）對于有害生物如田鼠，人們可采取一定措施降低其環(huán)境容納量。環(huán)境容納量指_________________________________。（3）魚塘中的一條食物鏈：浮游植物→浮游動物→鳙魚→烏鱧。鳙魚給分解者的能量包括______________________________兩部分。（4）荒山、洼地經(jīng)過改造成為果林、魚塘，塘泥可作為肥料，畜禽糞便可進(jìn)入沼氣池。有人認(rèn)為這些措施能促進(jìn)生產(chǎn)者、消費者、分解者之間的物質(zhì)循環(huán)，這種認(rèn)識是否正確？請說明理由。_______________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

分析題圖：Ⅰ區(qū)段是X染色體的特有的區(qū)域，其上的單基因遺傳病，分為伴X染色體隱性遺傳病和伴X染色體顯性遺傳病，其中伴X染色體隱性遺傳病的男性患病率高于女性，而伴X染色體顯性遺傳病的男性患病率低于女性；Ⅱ區(qū)段是X和Y染色體的同源區(qū)，其上的單基因遺傳病，患病率與性別有關(guān)，但男性患病率不一定大于女性，如①XaXa×XaYA后代所有顯性個體均為男性，所有隱性個體均為女性；②XaXa×XAYa后代所有顯性個體均為女性，所有隱性個體均為男性；Ⅲ區(qū)段是Y染色體特有的區(qū)域，其上有控制男性性別決定的基因，而且Ⅱ-2片段上的基因控制的遺傳病，患者全為男性?！驹斀狻緼、Ⅰ片段是X染色體特有的區(qū)域，其上的單基因遺傳病，分為伴X染色體隱性遺傳病和伴X染色體顯性遺傳病，其中伴X染色體隱性遺傳病的男性患病率高于女性，而伴X染色體顯性遺傳病的男性患病率低于女性，A正確；B、已知Ⅱ片段是X和Y染色體的同源區(qū)，由于同源染色體在減數(shù)第一次分裂前期會聯(lián)會，所以X、Y染色體的減數(shù)分裂時有聯(lián)會行為，B正確；C、Ⅲ片段是Y染色體（男性）特有的區(qū)域，其上有控制男性性別決定的基因，所以Ⅲ片段上的基因控制的遺傳病，患者全為男性，C正確；D、由于X、Y染色體互為同源染色體，但攜帶遺傳信息不一定相同，故人類基因組計劃要分別測定，所以人類基因組要測定24條染色體（22條常染色體和X、Y的DNA序列，）D錯誤。故選D。【點睛】本題以性染色體為素材，著重考查學(xué)生對伴性遺傳相關(guān)知識的理解能力和利用所學(xué)知識進(jìn)行推理判斷的能力，有一定的難度。2、C【解析】

1、ATP是生物體的直接能源物質(zhì)，ATP在細(xì)胞內(nèi)數(shù)量并不很多，可以和ADP迅速轉(zhuǎn)化，ATP中的能量可用于各種生命活動，可以轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽堋⒒瘜W(xué)能等。2、酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機物，絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，極少數(shù)酶是RNA。酶的特性：高效性、專一性和作用條件溫和的特性。酶促反應(yīng)的原理：酶能降低化學(xué)反應(yīng)的活化能?！驹斀狻緼、大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，少數(shù)酶是RNA，不能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，A錯誤；B、長時間的高溫、強堿等條件會導(dǎo)致蛋白酶的空間結(jié)構(gòu)改變而失活，B錯誤；C、線粒體合成的ATP可用于多種生命活動，包括在細(xì)胞核中發(fā)揮作用，C正確；D、DNA聚合酶具有催化作用而不是調(diào)節(jié)作用，D錯誤。故選C?！军c睛】解答本題需掌握住酶的本質(zhì)和作用及特性、ATP的利用等相關(guān)知識。3、A【解析】

物質(zhì)跨膜運輸方式：比較項目離子和小分子物質(zhì)大分子和顆粒性物質(zhì)被動運輸主動運輸胞吞胞吐自由擴散協(xié)助擴散運輸方向高濃度→低濃度高濃度→低濃度低濃度→高濃度細(xì)胞外→細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)→細(xì)胞外特點不需要載體、不消耗能量需要載體、不消耗能量需要載體、消耗能量不需要載體、消耗能量不需要載體、消耗能量影響因素濃度差濃度差、載體種類和數(shù)量能量、載體種類和數(shù)量能量、溫度能量、溫度【詳解】物質(zhì)通過自由擴散進(jìn)出細(xì)胞時，不需要載體蛋白協(xié)助，不需要消耗能量，運輸速率與膜內(nèi)外濃度差成正比，且不具有載體飽和效應(yīng)，A正確。故選A。【點睛】本題考查物質(zhì)出入細(xì)胞方式的相關(guān)知識，旨在考查考生的理解能力4、B【解析】

葉綠體是具有雙層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，其含有少量的DNA，是半自主性的細(xì)胞器，其含有的cpDNA具有編碼功能，借助細(xì)胞核DNA編碼的酶系統(tǒng)合成多肽，用于光合作用的各個環(huán)節(jié)?！驹斀狻緼、組成cpDNA的單體是四種脫氧核苷酸，A錯誤；B、葉綠體中有少量DNA，可以控制合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，B正確；C、根據(jù)以上分析可知，葉綠體的功能受自身DNA和細(xì)胞核DNA的調(diào)控，C錯誤；D、根據(jù)以上分析可知，核DNA編碼的酶能進(jìn)入葉綠體內(nèi)發(fā)揮催化作用，D錯誤。故選B。5、D【解析】

①號：若檢測基因標(biāo)為A，則基因型可表示為XAXa、XaY→XAXa、XaY，或者Aa（♀）、aa（♂）→Aa（♀）、Aa（♂）。②號：若檢測基因標(biāo)為A，則基因型可表示為XX、XYA→XX、XYA，或者aa（♀）、Aa（♂）→aa（♀）、Aa（♂）。③號基因位于常染色體上或X染色體上都可以，但不可能位于Y染色體的非同源區(qū)段上。④號：若檢測基因標(biāo)為A，則基因型可表示為XAXa、XaY→XAXa、XaY，或者Aa（♀）、aa（♂）→Aa（♀）、aa（♂）?！驹斀狻緼、若①號基因為A基因，父親不含該基因，因此父親的基因型可能為aa，A正確；B、由于只有父親和兒子有相關(guān)基因，②號基因可能位于Y染色體上，也可能位于常染色體上，不可能為于X染色體，B正確；C、若①號基因位于常染色體，③號基因位于X染色體，①號基因和③號基因的遺傳可能遵循基因的自由組合定律，C正確；D、若④號是與紅綠色覺有關(guān)的B基因，則表中的基因型可表示為XBXb、XbY→XBXb、XbY，這對夫婦再生一個紅綠色盲男孩（XbY）的概率為1/4，D錯誤。故選D。6、D【解析】絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，極少數(shù)酶是RNA，A正確；脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂焙虲02，B正確；蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類，C正確；細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，根據(jù)酶的專一性，纖維素酶不能降解細(xì)菌細(xì)胞壁，D錯誤?！究键c定位】酶的概念；酶的特性【名師點睛】解答本題，要熟練掌握酶的相關(guān)知識點：1、理解酶的概念：酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化活性的有機物，其中大部分是蛋白質(zhì)、少量是RNA。2、牢記酶的特性：①高效性：酶的催化效率大約是無機催化劑的107～1013倍。②專一性：每一種酶只能催化一種或者一類化學(xué)反應(yīng)。③酶的作用條件較溫和：在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低。7、D【解析】

分析題圖：圖示表示某細(xì)胞的局部示意圖，其中①為高爾基體，②為中心體，③為線粒體，④為核糖體?！驹斀狻緼、結(jié)構(gòu)④為核糖體，無膜結(jié)構(gòu)，不屬于生物膜系統(tǒng)，A錯誤；

B、結(jié)構(gòu)③為線粒體，其能將丙酮酸分解，但不能將葡萄糖分解，B錯誤；

C、該細(xì)胞含中心體，可能是動物細(xì)胞，也可能是低等植物細(xì)胞，其中低等植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁，C錯誤；

D、該細(xì)胞仍有核膜和核仁，因此不可能為處于分裂中期的動物細(xì)胞，D正確。

故選D。【點睛】本題考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，要求考生識記細(xì)胞中各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)、分布和功能，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。8、A【解析】

閱讀題干可知，本題涉及的知識有常見的原核生物和真核生物的類別以及原核生物與真核生物的區(qū)別，明確知識點，梳理相關(guān)的基礎(chǔ)知識，結(jié)合問題的具體提示綜合作答?！驹斀狻緼、細(xì)菌屬于原核生物，其沒有核膜包被的細(xì)胞核，但有環(huán)狀DNA分子位于擬核區(qū)域，A正確；B、藍(lán)藻也是需氧型生物，但是它是原核生物，沒有線粒體，B錯誤；C、大腸桿菌屬于原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，C錯誤；D、藍(lán)細(xì)菌屬于原核生物，其細(xì)胞中不含葉綠體，D錯誤。故選A?！军c睛】本題考查原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的異同，首先要求考生明確各選項涉及生物的類別，其次要求考生識記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的異同，能列表比較兩者。二、非選擇題9、常隱AA或AaⅡ1/8AaXBXb1/12【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：W家族中甲病的遺傳系譜圖，1號和2號均不患此病，但他們有一個患此病的女兒（3號），即“無中生有為隱性，隱性看女病，女病男正非伴性”，說明此病為常染色體隱性遺傳?。挥旨撞『鸵也《际菃位蜻z傳病，其中一種病是紅綠色盲，所以乙病為紅綠色盲，即伴X隱性遺傳病?！驹斀狻浚?）由以上分析可知，甲病為隱性遺傳病，致病基因位于常染色體上。

（2）W家族中3號、5號患病，故其父母的基因型都是Aa；又4號正常，故基因型是AA（1/3）或Aa（2/3）。

（3）L家族中乙病為紅綠色盲，所以IV號的致病基因來自母親，即Ⅱ號。

（4）已知W家族不帶乙病致病基因，L家族不帶甲病致病基因，所以W家族5號的基因型是aaXBY，L家族Ⅲ號的基因型是AAXBXB或AAXBXb，他們婚配后，生出一個攜帶兩種致病基因女孩的概率是1×1/2×1/4=1/8，這個女孩的基因型是AaXBXb。（5）W家族中的4號（1/3AA、2/3Aa）與L家族中的Ⅲ號結(jié)婚后，若Ⅲ號的某個初級卵母細(xì)胞中的一條DNA分子上A基因突變成a基因，由這個初級卵母細(xì)胞形成的卵細(xì)胞（含a的概率是1/4），與W家族中4號所產(chǎn)生的精子結(jié)合成受精卵，這個受精卵發(fā)育成患甲病孩子的概率是2/3×1/2×1/4=1/12?！军c睛】本題結(jié)合系譜圖，考查基因分離定律的實質(zhì)和伴性遺傳應(yīng)用，要求考生掌握基因分離定律的實質(zhì)，能運用口訣準(zhǔn)確判斷系譜圖中遺傳病的遺傳方式，進(jìn)而推斷相應(yīng)個體的基因型，并計算相關(guān)概率。10、素食性增大不變大于C-B下層水體光照不足，生產(chǎn)者一天的有機物積累量過低，難以養(yǎng)活魚類；氧含量過低，不利于魚類生存【解析】

能量通過食物鏈和食物網(wǎng)逐級傳遞，其特點是：1.單向流動；2.逐級遞減，生態(tài)系統(tǒng)中各部分所固定的能量是逐級遞減的。一般情況下，愈向食物鏈的后端，生物體的數(shù)目愈少，這樣便形成一種金字塔形的營養(yǎng)級關(guān)系。能量在相鄰的兩個營養(yǎng)級之間傳遞效率為10%~20%。在環(huán)境條件不受破壞的情況下，一定空間中所能維持的種群最大數(shù)量稱為環(huán)境容納量，又稱為K值，同一種生物的K值不是固定不變的，會受到環(huán)境的影響，當(dāng)生物生存的環(huán)境改善，K值會上升?！驹斀狻浚?）根據(jù)能量流動遞減規(guī)律，為最大程度利用能量，提高產(chǎn)量，最好選擇素食性魚類飼養(yǎng)；（2）如果投放飼料，池塘的環(huán)境容納量（K值）將增大，但能量傳遞效率不變；（3）處種群增長速率最大，捕撈后的剩余量維持在點可以保證持續(xù)高產(chǎn)，所以應(yīng)在大于時捕撈；（4）①甲瓶溶解氧量（B）＝原有溶解氧量?呼吸量，乙瓶溶解氧量（C）＝凈光合量＋原有溶氧量，那么乙瓶溶解氧量?甲瓶溶解氧量＝（凈光合量＋原有溶氧量）?（原有溶解氧量?呼吸量）＝凈光合量＋呼吸量＝實際光合量＝C?B；②池塘水層過深導(dǎo)致下層水體光照不足，生產(chǎn)者通過光合作用積累的有機物過少，難以養(yǎng)活魚類；同時氧含量過低，不利于魚類生存。【點睛】本題考查種群K值、能量流動、光合作用總量計算等知識，學(xué)生需分析24h后所測得的溶氧量的變化，甲瓶是由呼吸作用引起的變化，乙瓶是由光合作用和呼吸作用共同引起的變化。11、mRNA不同化學(xué)方法人工合成DNA雙鏈復(fù)制能自主復(fù)制、有多個限制酶切點，有標(biāo)記基因，對宿主細(xì)胞無害等預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列記憶細(xì)胞短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細(xì)胞【解析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。2、記憶細(xì)胞使得二次免疫反應(yīng)快而強?！驹斀狻浚?）為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對應(yīng)mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段中不含內(nèi)含子片段，與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用化學(xué)方法人工合成，然后通過PCR技術(shù)大量擴增，利用的原理是DNA雙鏈復(fù)制。（3）改造后的腺病毒作為載體，理由是能自主復(fù)制、有多個限制切位點、有標(biāo)記基因、對宿主細(xì)胞無害。（4）如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼幔庖咝Ч?，定向改造了蛋白質(zhì)，屬于蛋白質(zhì)工程，基本流程從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。（5）一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，當(dāng)同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點是短時